• Forum - Réaction, ADN, Protéine

[Evolution] mécanisme de correction des mutations génétiques, quelle utilité évolutive?

Le premier mécanisme de correction est dans la protéine même qui réplique l'ADN. Elle a une faible activité DNase, c'est à dire que dès que le nucléotide est incorporé, il se passe en même temps une réaction de rejet de ce nucléotide, mais si la liaison est plus stable ça ne marche pas et le nucléotide reste en place.  [...] Des erreurs dans la transcription ou traduction ADN-. ARN-. Protéine surviennent sûrement, et avec une proba plus élevée, mais ce n'est pas grave car ce n'est qu'une protéine sur des centaines/milliers qui sera impactée, toutes les autres protéines identiques feront le boulot, on n'est pas à une unité près dans une cellule.  [...]

Question : analyser une protéine

Quand tu as extrait et purifié la protéine dont tu souhaites déterminer la séquence, il faut préférablement la dénaturer, notamment lyser les éventuels ponts disulfure au cas où il y en aurait. on utilise le réactif de Cleland (DTT), qui est un réducteur porteur d'un thiol (sulfurhydryl) qui va se fixer aux résidus portant les mêmes groupes thiol (la cystéine en l'occurence), ou accessoirement le 2-mercaptoéthanol.  [...] à vrais dire j'ai posté une autre question sur le forum où je demandais comment analyser une protéine responsable d'une réaction dans un anabolisme (bon il n'y a pas encore eu de réponses haha). Du-coup après avoir analysé cette protéine je voulais le cheminement pour déterminer quel séquence d'ADN la codait.  [...]

[Biochimie] Proteines

en tous cas l'hormone se lie un receptore spèsifique, qui vas dèclanchè une cascad de reaction biochimie, on appele ça un signiale, elle aboutit a lancè un factore nuclor qui donne le signiale a une partie spècial dans l'adn de fair la transcription et donc ce hormone favorise la formation de proteine, ça c'est une des methode pour favoriser la formation des proteine.  [...] Ouai pas de soucis. Mais je crois que en faite en fonction du produit que tu prends, les proteines qui vont se créer vont etre differente et donc sa va pas aboutir a la meme chose.  [...]

[Biologie Moléculaire] Cross-linking

bjr, svp j'aimerai savoir à quoi servent le KCl et le PBS dans une réaction de cross-linking ou je regarde une interaction entre 2 protéines. sachant que les tampons de mes protéines contiennent du KCl. mon mixte comprend. les protéines, du PBS 10, le BMH( agent pontant) le KCl et H2O.  [...] par contre j'aimerai aussi savoir si c'est vrai que le KCl permet d'augmenter la force ionique concernant un band shift( interaction ADN-protéines) le Tris joue t-il le rôle de tampon( comme le PBS).  [...]

Questions en immunologie , vaccination

2) dans le cas de l'atténuation par recombinaison de l'ADN en utilisant les vecteurs qui utilise la technique de transgenèse pour fabriquer des microorganisme non pathogène ( comme Eshirichia coli ) vaccinant, est ce que cela consiste à isolé le gène virulent et de l'introduire dans l'ADN du vecteurs ce qui permet la synthèse la protéine viral ( la technique de génie génétique ).  [...] bien sur que non, on n'injecte pas la protéine responsable de la pathogénicité non modifiée. je pense que l'atténuation par recombinaison de l'ADN consiste à enlever le gène responsable de la virulence. donc on a bien une E coli mais sans le gène du facteur de virulence, elle déclenche la réaction immunitaire sans donner la maladie.  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin - Page 2

En fait, l'étape de purification de l'ADN n'est plus obligatoire, surtout que l'on travaille avec des quantités infimes d'ADN. Le problème de ne pas purifier, c'est que les protéines de la cellule peuvent venir perturber la réaction PCR. D'où l'étape de purification de l'ADN, afin d'enlever un maximum de protéines.  [...] Tolistento, en relisant toutes vos interventions, ( sur les autres fils que vous avez ouverts également) on a vraiment l'impression qu'elles ont un but bien précis et ne sont pas simplement de la curiosité. Lequel, si ce n'est pas trop vous demander Parce que vous auriez sans doute une réponse plus rapide si vous nous disiez ce que vous cherchez à démontrer ou à prouver, plutôt.   [...]

[Biotechnologie] Principe de la PCR

La réaction de polymérisation en chaîne est réalisée dans un mélange réactionnel qui comprend l'extrait d'ADN (ADN matriciel), la Taq polymérase,  [...] la réaction de polymérisation en chaîne (détergents, EDTA, phénol, protéines…). La quantité d'ADN matriciel dans le milieu réactionnel pour initier.  [...]

Uracile

Dans la chaîne de synthèse c'est l'uracile qui est transformée en thymine. cela peut s'expliquer par une origine évolutive, l'ADN ayant été inventé après l'ARN. Forterre et collègues ont mis en évidence qu'il y a deux familles de protéines réalisant cette réaction. l'ADN a été inventé deux fois.  [...] En fait le T est le 5-methyl-uracile. Il ne differe du U que par l'adjonction d'un CH en 5. Cette méthylation coute chère en energie. Donc elle est acceptable dans l'ADN car dés lors le T est l'assurance de l'intégrité de la base et permet de discriminer les erreurs.  [...]

[Biologie Moléculaire] kinase

Un test que tu peux tenter juste pour savoir si ta proteine est phosphorylee et dans le cas ou tu peux immunoprecipiter ta proteine est de faire une immunoprecipitation dans differente condition de stringence et incuber ton immunoprecipitation dans un tampon de reaction adequate pour les kinases avec de l'ATP32.  [...] En general, quand il s'agit de toxine, d'inhibiteurs etc... on ajoute le solvant, mais dans ce cas, comme on ajoute une proteine qui a une activite non negligeable, l'anticorps, il est bien d'ajouter le meme type de proteine mais qui n'a pas la meme specificite pour etre sur qu'il n'y a pas une reaction aspecifique inattendue de la partie conserve de l'anticorps par exemple qui menerait a une conclusion attive et fausse.  [...]

Enzyme de restriction

3- Aprés la réaction de la question 2, pourrait-on toujours joindre les extrémités Bam HI par incubation avec l'ADN ligase de T4 Pourrait-on joindre les extrémités Pst I (L'ADN ligase de T4 peut joindre aussi bien des extrémités franches que des extrémités cohésives).  [...] Ta réponse n'est pas bonne. L'amorce est le 3'OH crée par la coupure, l'ADN pol va pouvoir recopier les quelques nucléotides qui sortent. MAIS l'ADN pol n'est capable de synthétiser l'ADN QUE de 3'-. 5'. Autrement dit elle ne peut amorcer la réaction qu'a partir d'un 3'OH et pas d'un 5' phosphate.  [...]