• Forum - Question, Culture, Cellules

[Biologie Cellulaire] Nombre de passages

J'aurais une petite question concernant la culture cellulaire. Auparavant je n'avais fait que des cultures primaires de fibroblastes, et je devais faire attention au nombre de passages de mes cellules.  [...] Et moi non plus je ne comprends pas bien l'autre question... On maintient nos cellules parceque c'est notre outils de travail et qu'il faut bien les maintenir en culture pour pouvoir maintenir la lignée et travailler avec.  [...]

[Biotechnologie] culture des cellules

Il y a plein de cellules différenciées qui se divisent... c'est même le cas de la plupart des cellules à l'exception (globules rouges ou autres cellules nerveuses...).  [...] Pour les cultures on utilise généralement des lignées cellulaires. C'est à dire des lignées stables, les cellules se divisant alors pour former des cellules filles identiques à la cellule mère.  [...]

[Biochimie] Différence entre les LPS et utilisation

Je me pose depuis quelques temps la question suivante. J'ai fais deux manipulation en culture cellulaire sur des cellules différentes (CACO2 et CCD18). Mais sur ces deux cellules, j'ai mis deux types de LPS différents. un était le O155.B5 et l'autre le O111.  [...] B4. Pour le O j'ai vu ce qui était différent mais à quoi correspond le B et pourquoi prendre deux LPS différents.   [...]

télomère et prolifération

Bonsoir, j'ai une question sur les telomeres. la taille des telomeres peut conditionner la proliferation des cellules primaire en culture.  [...] C'est faux. Les cellules primaires sont synonymes de cultures primaires. Elles ont été prélevées depuis un organisme et ont une capacité de division limitée (limite de Hayflick = limite de divisions). Cela s'oppose aux lignées cellulaires et aux cellules souches qui sont immortelles, c'est-à-dire qui n'ont plus cette limite et peuvent se diviser virtuellement indéfiniment.  [...]

[Biotechnologie] culture de méristèmes

pour l'assainissement des plante on utilise la culture de méristèmes la question que je me pose est pourquoi lors de l'infection virale les cellules méristématiques ne sont pas touchées.  [...] Le virus doit s'attaquer qu'à une classe de cellule particulière du végétal, or les cellules du méristème sont encore indifférenciés.  [...]

[Biologie Cellulaire] Adhérence cellulaire

bonjour à tous, une petite question toute bête...comment les cellules adhèrent elles à la boite de culture et donc qu'est ce qui différencie les cellules adhérentes et les non adhérentes du point de vue moléculaire.  [...] J'avais lu dans un livre comment effectuer une culture de cellule souche et je l'ai même retrouvé sur un site où ce trouve un passage qui parle de l'adhésion de ces cellules sur une boite de culture, et il est vrai qu'il existe des cellules fortement adhésive comme les fibroblastes et des cellules faiblement voir non adhésive comme certaine cellules du sang, de la rate et de la moelle osseuse.  [...]

[Immunologie] Lymphocytes T à mémoire

Même question pour les lymphocytes B, et plus généralement, y a t-il des types de cellules immunitaires (pas forcément à mémoire) que l'on peut mettre en culture sans passer par les cellules souches hématopoïétiques.  [...] Mis à part les cellules à développement rapide, de moelle osseuse ou d'intestin par exemple, qui sont capables de se développer en formant spontanément une matrice, les autres cellules, comme les lymphocytes par exemple, sont incapables de se développer en culture dans du milieu de culture standard. Dans ces conditions, il faut trouver.  [...]

[Biologie Cellulaire] apoptose cytométrie

Après plusieurs essais en annexine on a préféré prendre le DiOc6. En annexine on avait une augmentation du marquage sur les cellules non traitées.  [...] Je n'avais pas eu l'idée de récupérer le surnageant en effet les cellules apoptotiques perdent de l'adhérence par conséquent il est important de le faire.  [...]

[Biologie Cellulaire] Dmso

Petite question de curiosité, quelqu'un saurait-il me dire à quoi sert le DMSO que l'on utilise dans le milieu de culture pour congeler les cellules.  [...] J'ai eu l'occasion de comparer des taux de survies cellulaires avec des cellules placées dans différentes conditions et on observait 25% de mortalité cellulaire avec un protocole classique (10% de DMSO dans le milieu de culture, décongélation rapide à 37°C), 30% de mortalité avec 10% de DMSO et une décongélation lente à température ambiante (20°C environ) et 20% de mortalité avec un mélange à 1% de DMSO et une décongélation rapide à 37°C.  [...]

Courbe de croissance cellules immortalisées

J'ai une question concernant la mort des cellules immortalisées. Voilà j'ai mis en culture des fibroblastes embryonnaires murin immortalisés et fait une courbe de croissance avec le test au MTT sur 7 jours. Une fois arrivée à confluence la courbe de ma lignée KO pour une protéine importante de la mitochondrie décroit tout de suite.  [...] Il n'y a pas de plateau comme observé sur ma lignée sauvage. Alors je voulais savoir combien de temps les fibroblastes immortalisés pouvaient rester à confluence sans mourir et de quelle mort s'agit-t'il On m'a dit que c'était une mort cellulaire programmée mais pas une apoptose.  [...]