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biologie moléculaire : la dégradation des protéines

voila je vous cite la phrase de mon cours que je n'arrive pas bien a comprendre. les protéines cellulaires sont dans un état de renouvellement dynamique c'est à dire que leur vitesse de synthèse et leur vitesse de dégradation dépendent de la quantité présentent a tout moment.  [...] oui ca se peut que ca soit quantité de protéine. En effet il existe des mécanismes de régulation. Avoir trop ou trop peu dune protéine peut être un signal pour inhiber ou activer leur synthèse.  [...]

relation entre nombre de cellules \quantité de protéines

est ce qu'il y a un ratio relation entre le nombre de cellules et la quantité de protéines ie pour n cellules combien de protéines on aura.  [...] Maintenant vous ne parlez sans doute pas de nombre de cellules à densité égale, mais sans doute de la quantité de protéines en fonction de la confluence. N'est ce pas.  [...]

Electrophorèse sds-page de la MMP2

sur le gel Page vous vouliez voir les MMP au bleu de coomassie ou toutes les protéines j'imagine que c 'est pour normaliser la quantité de MMP par rapport au total.  [...] Le bleu de coomassie est un colorant très peu sensible, il colore certes les protéines mais on ne voit à l'oeil que les bandes principales. Surtout que dans un surnageant cellulaire, la quantité de protéine est pas suffisamment importante pour voir des bandes. Peut être avec du nitrate d'argent.  [...]

Origine de la vie : analyse critique de documentaires

La raison plus chimique tient à la multiplicité des liaisons chimiques pouvant être excitées par la lumière. Dans les longueurs d'onde des domaines visibles et avoisinnant, cela peut occasionner des changements de conformation comme chez la rhodopsine (pigment rétinien impliqué dans la vision du rouge), à des lyses occasionnelles (comme le brin d'ADN ou des protéines sous UV).  [...] ..), la quantité d'oxygène dans l'atmosphère, l'énigme de l'homochiralité de la vie, et quelques autres sujets, comme l'idée selon laquelle la création d'une protéine fonctionnelle de 100 résidus demanderait davantage que l'âge de l'Univers pour se former par hasard (dans le sens Nord-Américain très particulier).  [...]

Le rapport Campbell ; Découverte majeure ou manipulation de données scientifiques ? - Page 3

C'est vrai que le dogme veut que les protéines soient découpées en acides aminées dans l'intestin avant d'être absorbés, et donc la séquence des Acides aminés n'importe pas, ce qui importerait c'est la quantité de chaque type d'acide aminés dans l'ensemble des protéines.  [...] Souvent les consommateurs de viandes sont des consommateurs avec une fourchette large de quantité, parfois ou souvent excessives) et au final, on n'obtient pas une comparaison avec un groupe qui mangerait des protéines animales dans le cadre d'un régime équilibré car la première chose à laquelle va réfléchir un végétarien après le choix du régime, c'est d'équilibrer son régime (remplacer ses protéines et pas simplement supprimer les protéines animales), contrairement à l'omnivore qui n'y réfléchit que parfois.  [...]

[Biologie Moléculaire] Quelle stratégie adopter?

Pour se faire j'ai construis deux vecteurs, le premier contient un promoteur fort puis la PG1 et la GFP et le deuxième contient un promoteur fort puis la SIRT1 puis la luciférase je réalise un BRET en excitant la luciférase avec coelenterazine j'ai donc fluorescence de la GFP j'ai donc bien montré l'interaction or le professeur me demande de faire un test de localisation puis un test de fonction de la proteine endogène pour cela est ce que je dois prendre des cellules hépatiques non transfectées comme temoin pour la localisation il me semble qu'il serait judicieux de faire une immunohistochimie mais est ce que je detecte les 2 proteines dans la meme cellule et ceci avec 2 anticorps différents couplés avec une fluorescence différenteet pour la fonction je ne sais pas dutout d'autant plus qu'il faut savoir si la proteine chimerique modifie les fonctions endogènes de la proteine pour ca je netrouve pas de strategies.  [...] Le choix de la transfection ou pas dépend sans doute aussi de la sensibilité de l'immunohistochimie (je n'ai jamais utilisé cette technique donc je ne sais rien là dessus ), et donc de la quantité de protéines qu'il y a naturellement dans tes cellules.  [...]

[Microbiologie] Quantité de protéines/biomasse

Après des manipulations sur une souche de Pseudomonas nous avons pu établir des courbes nous donnant la quantité de protéines présente dans différents échantillons.  [...] Merci pour ta réponse. Donc si lors de la croissance de la souche il y a accroissement de la biomasse couplé à l'accroissement de la quantité de protéines cela signifie que la souche grandit dans des conditions favorables.  [...]

[Biochimie] gros loading de protéine pour un western blot

Je fais pas mal de Western blot et mon prof est convaincu qu'il faut des loadings de 60ug de protéine pour avoir une chance de marquer les quelques protéines (Hif1a, VHL...) qu'ont veut (avec des anticorps pour lesquels nous n'avons toujours pas de ctrl positif, soi-dit en passant).  [...] 60µg c'est vraiment beaucoup. L'expérience montre que si l'on charge trop un gel la migration est pourrie et la détection marche mal. C'est ainsi que parfois, quand on y arrive pas il vaut même mieux diminuer la quantité de protéines chargées plutôt que de l'augmenter.  [...]

[Biochimie] Chromatographie d'exclusion sur colonne !

Après coloration par la méthode de Bradford (bleu de Comassie se colore en bleu en présence de protéines dans une solution acide) et mesure de l'absorbance du complexe formé à 600nm. on observe un pic d'absorbance pour la thyroglobuline et un pic pour le cytochrome C.  [...] Après coloration par la méthode de Bradford (bleu de Comassie se colore en bleu en présence de protéines dans une solution acide) et mesure de l'absorbance du complexe formé à 595 nm.  [...]

[Biochimie] Petite question sur le Western Blot

Je fais des WB en ce moment et une personne du labo m'a mis des doutes car elle ne comprends pas que je normalise la quantité de protéines que je dépose sur mon gel.  [...] Le probleme est que le raisonement repose sur une enorme approximation de départ (que la protéine surexprimée va avoir un impacte significatif sur la quantité de protéines). Or ce n'est jamais le cas, les variations d'expression d'une proteine ne seront jamais suffisantes pour avoir un impacte sur la quantification.  [...]