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[Biochimie] Dialyse et réactions colorées des protéines

il consiste au Dialyse et reacyions colorées des proteines.  [...] a t=30 min normalement il ya coméme passage d'une petite quantité de proteines dans liquide de contre dialyse.  [...]

Production protéine recombinante E.coli

Aprés une première dialyse je dose ma quantité de protéines et j'ai une concentration de 2,5mg/ml ensuite à la dernière dialyse j'ai une concentration de 0,6mg/ml. J'observais des agrégats que j'ai éliminé par centri.  [...] Pourquoi la proteine s'agrége c'est seulement cela qui explique la différence de concentration, la technique de dialyse est-elle efficace sinon pourrais-je utiliser une autre technique comme la filtration.  [...]

[Biochimie] Dosage des protéines

Aprés précipitation au sulfate d'ammunium suivie d'une dialyse est ce qu on doit assister à une augmentation ou plutôt une diminution en termes de quantités de protéines.  [...] La quantité de protéines totales ne peut pas augmenter, sauf si vous faites de la magie. Donc vous allez perdre des protéines tout au long de votre purification.  [...]

[Biochimie] Qu'est-ce qu'un sac à dyalise ?

La dialyse est une purification qualitative. C'est à dire qu'après dialyse, la concentration en protéines de taille supérieure à la porosité de la membrane de dialyse sera inchangée. Par contre, le degré de pureté sera supérieur.  [...] Imaginez un extrait cellulaire. On a des polysaccharides, des lipides, des acides nucléiques, et des protéines de toutes tailles. On choisit de dialyser l'extrait car on a une protéine de 200 kDa qui nous intéresse, mais elle est perdu au milieu de toutes ces molécules.  [...]

denaturalisation protéines

L'urée est surtout utilise pour solubiliser les protéines. Certaines protéines forment des corps d'inclusion (aggrégation de protéines) lorsqu'elles sont surexprimées, si on veut les purifier on les solubilisent en ajoutant de l'urée ou du chlorure de guanidium.  [...] Certaines protéines vont se replier naturellement lorsque l'urée va etre enlevée (par dialyse entre autre) alors que d'autres protéines resteront dénaturées.  [...]

[Biochimie] extraction protéine d'une huile ou d'une cire pour quantification

l'huile étant insoluble dans l'eau il m'est impossible de solubiliser le peu de protéines présents, (je tiens à préciser que le dosage est réalisé sur des quantités exprimées en ng de protéines/mg d'échantillon) donc j'ai très peu de matière.  [...] Après centrifugation (quelles sont les paramètres optimums pour former le culot) je suppose devoir faire une dialyse pour supprimer cette forte quantité de sel dans ma solution. pouvez vous me conseiller du matériel ou autre je n'en ai jamais réalisé.  [...]

[Biochimie] Purification de la beta-gal

(je copie colle ce que j'ai écris dans mon compte rendu et on dispose d'un extrait bactérien qui a subit lyse membranaire et dialyse donc dans l'extrait on a que des protéines).  [...] Je serai tenté de dire que dans les fractions issues de l'extrait bactérien nous n'avons pas de protéines chargées positivement et/ou neutres ainsi que dire que la béta-gal est la dernière protéine a s'être retirer de la colonne (car pas de coloration bleu dans la fraction 10 après ajout du bleu de coomassie) mais je trouve que cette conclusion est très vulgaire et je doute que ce soit cela.  [...]

[Biochimie] Purification sur colonne et EDTA

Au labo, les purifications de protéines sont réalisées sur colonne de nickel et malgré l'étape de dialyse, il arrive régulièrement qu'il reste un peu d'EDTA (présent dans le tampon d'extraction), ce qui détruit la colonne.  [...] Peut-on titrer l'EDTA présent dans l'extrait protéique après dialyse et avant passage sur la colonne (sans utiliser tout l'extrait protéique bien sûr).  [...]

[Biochimie] dialyse-protéines

j aimerai savoir si lors d une dialyse des protéines les sacs de dialyse se gonflent ou gardent leur volume de départ.  [...] Yoyo (si je peux me permettre de parler en son nom...), plutot que de te donner la réponse toute machée, essaye juste de te faire réfléchir sur le phénomène afin que de toi même tu trouves la réponse.   [...]

[Biochimie] Dialyse

Mon cours dit que l'on doit placer les extraits de membrane solubilisées dans un sac semi perméable. lorsque ce sac est placé dans un milieu dépourvu de détergent, celui ci sort du sac de dialyse par diffusion.  [...] et après cela, le complexe protéique a une chance sur deux d'être insérés dans le même sens que la membrane biologique. et s'il y a échec de reconstitution, on se retrouve avec quoi.  [...]