• Forum - Quantité, Protéines, Activite enzymatique

[Biochimie] Dilutions

On fait des cinétiques enzymatiques à 1,2,3,4 mins, puis on met 0,1ml de cette solution avec 0,2ml de KOH dans un puits d'une plaque de microtitration (donc on dilue 3 fois), ceci afin de lire la DO e.  [...] Tu ne dois pas prendre en compte la dernière dilution car ce n'en est pas vraiment une. L'activité que tu mesures dans ton puits résulte de la quantité de protéines présente. Peu importe le volume de KOH ajouté, la quantité restera la même. Le volume de KOH que tu ajoutes est juste là pour mettre en place la réaction.  [...]

[Biochimie] facteur de purification et rendement

En fait Berzelius à raison de ce poser des questions car sans une mesure autre que la quantité de protéines dans la fraction après purification il sera difficile de calculer le rendement ou l`enrichissement. En fait il manquerait soit une mesure de l`activité totale, spécifique ou enzymatique.  [...] .. la quantité de protéine que vous avez obtenu dans la deuxième fraction peut avoir n`importe quel ratio pyruvate kinase/protéines sans mentionner une différence aussi entre pyruvate kinase actives/protéines dans le cas spécifique de l`unité U.  [...]

[Biochimie] Résultats de purification de lysozymes

On a obtenue la quantité de lysozyme présents dans chacunes des fractions, et calculer à partir de la variation d'absorbance par minute le nombre d'unité d'enzymes.On a eu a calculer l'activité spécifique, le nombre d'unité enzymatique, et la quantité de protéines totale dans chaque fraction Pourquoi.  [...] Micrococcus est une bactérie (gram- il me semble) qui est sensible au lysoszyme. Aussi les valeurs de DO durant la lyse permet de connaitre de nouvelles valeurs petit à petit de la destruction des bactéries ( du moins, de leur membrane externe) et donc de connaitre l'activité enzymatique.  [...]

[Biochimie] Extraction d'enzymes musculaires

Au niveau de la quantité de protéine extraite, pourquoi veux-tu une concentration de protéines supérieure à 2 µg/µl sans avoir (enfin je pense vu la tournure du message) mesurer l'activité enzymatique voulue Personnellement je trouve cette concentration satisfaisante.  [...] Le mieux reste que tu testes ton activité enzymatique dans les extraits que tu as. S'il n'y a rien de détectable avec 2 µg/µl de protéines, c'est à partir de là qu'il faudra penser à mettre au point la manip.  [...]

[Biochimie] Activité enzymatique et pallier de quantité de produit formé ?

Pour moins, s'il y a un pallier pour la quantité de produit formé, c'est qu'il y a de moins en moins de liaisons peptidiques à rompre (action de l'enzyme d'hydrolyse des protéines).  [...] La trypsine hydrolyse les liaisons peptidiques dans lesquelles un acide aminé basique engage sa fonction acide. Elle coupe en C-terminal de ces acides aminés. Elle transforme les chaînes polypeptides en chaînes protéiques plus courtes pour permettre la digestion.  [...]

Activité enzymatique du lysozyme purifié

On nous dit que l'activité enzymatique est définie comme la quantité d'enzyme qui provoque une diminution de 0.001 unités d'absorbance à 450nm en une minute.  [...] Mes doutes sont plus sur la méthode, surtout si il ne faut pas non plus multiplier par le facteur de dilution la quantité de protéine, comme pour trouver l'activité enzymatique de Fo non diluée, afin de trouver le reste.  [...]

Rendement de transfection

Le D.O augmente avec la quantité de produit formé, il te permet donc de mesurer ton activité enzymatique. Le DO max te donne le pH optimal de l'enzyme, en utilisant la formule que tu as écrite tu peux avoir l'activité relative de l'enzyme à un pH donné.  [...] Oui c'est bien ça donc plus la solution est jaune plus le D.O est élevé et donc plus la quantité de produit crée est importante. Tout cela est proportionnel à ton activité enzymatique.  [...]

activité spécifique

L'activité Spécifique enzymatique (AS) correspond aux micromoles de produits apparu, par minute et par mg de protéines. On l'exprime aussi sous la forme. U/mg.  [...] Il est possible de la calculer à partir de l'Activité Enzymatique (micromoles de protuits formés par minutes et par mL de protéines, soit U/mL) déterminée de manière expérimentale et de la concentration en protéine en solution (mg/mL).  [...]

Téléthon et vérités de la science génomique

La protéine est synthétisée sur la base des informations exoniques, autrement dit sur l'ARN prêt à traduire, expurgé des introns. La myopathie de Duchenne est due à une erreur dans l'un des 79 exons codant pour la dystrophine, protéine d'agencement du tissu musculaire dont le gène est le plus long de tout l'organisme (14000 bases, 3600 acides aminés). Source. ICI.  [...] Pour le reste, la recuperation physique suite a une eventuelle thérapie dépendra uniquement de l'efficacité a reproduire une dystrophine fonctionnelle en assez grande quantité. C'est pour cette raison que la dystrophine, qui est une proteine de structure, n'est pas le choix idéal et qu'il vaudrait mieux développer cette stratégie pour des protéine a activité enzymatique.  [...]

ADN

Bon, on connait aussi des ADN catalytiques (dnazyme ou déoxyribozyme), avec une large palette d'activité. Pour l'instant, c'est in vitro. Mais rien ne dit que l'on en trouvera pas in vivo. Les ribozymes ne sont donc plus forcément un très bon argument pour le monde ARN.  [...] These artificial DNA enzymes or `deoxyribozymes' generate large chemical rate enhancements and demonstrate precise substrate recognition, much like their protein and RNA counterparts. Recent studies with these prototypic deoxyribozymes indicate that DNA has a substantial untapped potential for intricate structure formation that could be exploited in novel chemical and biological catalysis.  [...]