• Forum - Quantité, Enzymes, Digestion

Hydrolyse totale et hydrolyse partielle de l'ADN

je veux savoir quelle est la différence entre hydrolyse totale et hydrolyse partielle de l'ADN et on joue avec quels facteurs et merci bcp.   [...] Si vous voulez parler de digestions totales et partielle par des enzymes de restriction, alors c'est le fait de ne pas couper tous les sites présents en jouant sur la quantité d'enzyme et le temps de digestion. Sinon je ne vois pas.  [...]

Carte de restriction d'un plasmide inconnu

Sachant que l'on doit choisir 5 à 6 enzymes. Deja dans un premier temps comment peut on savoir lesquels choisir préférentiellement Est ce que le choix des enzymes auraient juste avoir avec les couples d'enzymes qui ont une bonne activité ensemble pour pouvoir les coupler lors des digestion avec un même tampon Je compte faire mes digestions et analyser sur gel d'électrophorèse d'agarose à 1% (ne connaissant pas du tout la taille du plasmide je suppose qu'il a plus de chance de se trouver entre 10kb et 0.  [...] Le deuxième problème est la concentration en glycerol. Généralement, les enzymes sont suspendu dans un tampon coupé à 50% de glycerol, afin d'éviter les cycles de congélation/décongélation, qui abimeraient l'enzyme. Cependant, le glycerol est très mauvais pour l'activité de l'enzyme, et communément, ont admet que la quantité d'enzyme (+glycérol) ne dois pas dépasser 10% du volume total de digestion.  [...]

[Biochimie] l'investigation des procédés biochimiques chez les êtres vivants

j'espère que je ne vous ai pas trop  [...] bibliographique par les livres de biochimie, je veux apprendre ce qu'on m'a pas appris dans ce module, à savoir l'investigation biochimique, ou comment découvrir par l'expérience quelle enzyme agit dans la réaction étudiée parmi plusieurs enzymes dans le tube à essai, comment isoler cette enzyme et voir sa structure en 3d dans un pc ma thèse portera sur les enzymes digestives des ravageurs de maïs et des céréales accompagnée d'une étude sur leur comestibilité et le devenir de ces enzymes digestives une fois dans l'intestin humain lorsque l'insecte est mangé cru si nous pouvons tirer profit de ces enzymes qui digèrent bien les proléines et les glutéines (des protéines de la famille du gluten nocives pour la santé car elles irritent l'intestin grêle et augmentent sa porosité et lorsque la porosité augmente, des macromolécules arrivent à la circulation sanguine et font beaucoup de dégâts sur la santé, même psychiatrique de l'individu.  [...] A mon avis les insectes dans leur intestin ont juste la quantité d'enzymes nécessaire à la digestion de ce qu'ils avalent, donc il faudrait boulotter pas mal d'insectes pour digérer la tartine du matin (que d'ailleurs on ne digère pas si mal que ça sans insectes).  [...]

[Biologie Moléculaire] Enzymes de restriction sur plasmides- Digestion complète et incomplète

.. bref, pour tout un tas de raisons. Et comme on ne maitrise jamais parfaitement chacun de ces paramètres, on ne peut pas non plus prévoir si la réaction sera complète ou non. Surtout si plusieurs enzymes différentes sont utilisées pour chacun des sites. Après, si on fait un électrophorèse, on peut quantifier l'avancement de la digestion pour chacun des sites, car en général, les différents fragements n'ont pas la même taille.  [...] dites moi svp comment peut on trouver le nombre de fragments d'ADN produits lors d'une double digestion du plasmide pCR-gai par les enzymes de restriction HindIII et EcoRI et leurs tailles respectives.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage

Si tu peux fais des doubles digestions avec des enzymes n'ayant pas d'extrémité compatible pour éviter que ton plasmide ne se re-ligue sur lui même (Si possible biensure).  [...] Comment fais tu ta digestion En rajoutant toute la quantité d'enzyme d'un coup Moi, je diminue la quantité d'enzyme par deux et j'en rajoute à la moitié du temps de digestion pour diminuer son essoufflement.  [...]

[Biologie Moléculaire] Carte de restriction électrophorèse

J'ai réalisée une digestion d'un plasmide bactérien inconnu afin de déterminer sa carte de restriction. Pour cela, je l'ai digéré avec des enzymes de restriction. BamHI et EcoRI. J'ai fait une digestion avec chacune des enzymes tampon E pour BamHI et tampon MC pour EcoRI et une avec les 2 dans le tampon MC (activité 75% pour bamhI et 100 pour ecorI).  [...] Oui je suis d'accor il n'y a qu'un seul site bamHI car 1 seul bande mais j'ai auusi 2 site ecoRI car jobtien de bandes après digestion. Ce que je ne compren pas c'est que je n'obtien qu'une bande lors de la double digestion, est-il possible alor que lors de cette double digestion les enzymes bamHI et ecoRI aient coupé au même endroit.  [...]

Mon chat est accro à la bière...

Je peux te dire en revanche que le chocolat est toxique pour les chiens (quoi c'est une information importante meme si elle n'a rien a voir avec ta question ).   [...] Pour être un peu plus précise c du à l'enzyme responsable de la digestion du lait, la lactase qui n'est pas produite automatiquement, sa synthèse est activée lors de l'ingestion de produits lactés mais PROGRESSIVEMENT, sa quantité s'adapte également à la consommation.  [...]

[Biologie Moléculaire] Fréquence de sites de restriction

Tout dépend des conditions de ta digestion, notamment de la quantité d'ADN génomique que tu fais digérer pour une certaine quantité d'enzyme.  [...] En fait, 7000/256 serait le facteur de perte d'activité enzymatique. Pour savoir combien de site ne subiraient pas de digestion, il suffirait de diviser le nombre de sites total par ce facteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

J'ai fais une extraction d'ADN puis je l'ai mis en présence d'enzyme de restriction ( c'est le TP basique avec les enzymes BamHI, EcoRI, HindIII) c'est de l'ADN de phage lambda cependant comment savoir si l'ADN a été digéré par élélectrophorèse sur gel d'agarose car j'observe plusieurs fragments mais je comprends pas trop si quelqu'un peut m'éclairer merci infiniment.  [...] Et ensuite en comparant les profils de restrictions de chaque enzyme et des combinaisons de plusieurs enzyme tu peux déduire comment les sites de restrictions se trouvent les uns par rapport aux autres sur ton ADN de phage du départ.  [...]

Transmission par voie orale ?

Les rapports oro-genitaux quels qu'ils soient sont tout a fait capables d'induire une contamination par le VIH s'ils ne sont pas protégés ( c'est a dire souvent ) et ce potentiellement en un seul contact. Le risque est ici tout a fait non negligeable, le sperme ou même le simple liquide pre-seminal peuvent être porteurs d'une quantité consequente de virus.  [...] Le virus est fragile, et la bouche est loin d'être un terrain de culture très propice ( milieu très agressif avec des enzymes destinés a la digestion chargés de commencer a attaquer le bol alimentaire en formation dans la bouche ). Avec des quantités si infime de virus potentiel le risque n'est donc pas très elevé.  [...]