• Forum - Quantité, Enzyme, Digestion

[Biologie Moléculaire] Clonage

Et je bloque à cette étape. j'obtiens autant de clones pour mes bactéries transformées par le vecteur linéarisé que par celles transformées par le plasmide natif. J'en ai donc déduit une mauvaise digestion. Or, j'utilise les enzymes Fast Digest de chez Fermentas pour une digestion o/n.  [...] Comment fais tu ta digestion En rajoutant toute la quantité d'enzyme d'un coup Moi, je diminue la quantité d'enzyme par deux et j'en rajoute à la moitié du temps de digestion pour diminuer son essoufflement.  [...]

Mon chat est accro à la bière...

Je peux te dire en revanche que le chocolat est toxique pour les chiens (quoi c'est une information importante meme si elle n'a rien a voir avec ta question ).   [...] Pour être un peu plus précise c du à l'enzyme responsable de la digestion du lait, la lactase qui n'est pas produite automatiquement, sa synthèse est activée lors de l'ingestion de produits lactés mais PROGRESSIVEMENT, sa quantité s'adapte également à la consommation.  [...]

Hydrolyse totale et hydrolyse partielle de l'ADN

je veux savoir quelle est la différence entre hydrolyse totale et hydrolyse partielle de l'ADN et on joue avec quels facteurs et merci bcp.   [...] Si vous voulez parler de digestions totales et partielle par des enzymes de restriction, alors c'est le fait de ne pas couper tous les sites présents en jouant sur la quantité d'enzyme et le temps de digestion. Sinon je ne vois pas.  [...]

[Génétique] hybridation adn/adn : technique de southern blot

[quote]- digestion incomplète, ou absence d'enzyme, mais dans ce cas, je me dis qu'on observerait de gros patés en haut du gel. [quote].  [...] Par contre je n'ai pas bien compris le rôle du tampon 10x. S'agit-il bien d'un tampon permettant l'activation de l'enzyme en question Dans ce cas, une quantité insuffisante de ce tampon expliquerait - il une digestion incomplète de l'enzyme, d'où le fait que j'obtienne des fragments trop gros restant coincés en haut du gel comme tu l'as dit.  [...]

[Biologie Moléculaire] Fréquence de sites de restriction

Tout dépend des conditions de ta digestion, notamment de la quantité d'ADN génomique que tu fais digérer pour une certaine quantité d'enzyme.  [...] En fait, 7000/256 serait le facteur de perte d'activité enzymatique. Pour savoir combien de site ne subiraient pas de digestion, il suffirait de diviser le nombre de sites total par ce facteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] Clonage en plasmides de grande taille via Sfi I (astuces)

Cela fait un mois que j'essaie de réussir un clonage mais en vain. Je vois que le problème dont tu parles date du mois de novembre. As-tu trouvé une astuce Moi mon vecteur n'est pas aussi grand que le tien. 6kb, mon Insert fait 720pb. Les deux sont des produits de digestion NCOI et XHOI.  [...] la digestion je la fais géneralement avec 1,5 µl d'enzyme 1Hà 37°C. mais comme le signal obtenu après dépos sur gel est trop faible, j'ai augmenté la quantité d'ADN digeré (80µL dans 350 final) avec 5µl d'enzyme de digestion 1h 37°C(j'ai essayé d'amplifier le fragment par pcr, ça ne marche pas).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ADN génomique

Et mon grand problème est que j'arrive pas à digérer une grande quantité d'ADN(200 Ml dans un volume de 500 Ml)mais dans un petit volume(10Ml dans 15Ml)j'arrive à digérer mon ADN...(concentration d'ADN est 400 ng/Ml).  [...] Or dans votre grand mix vous diminuez encore votre ratio d'enzyme. Du coup il faut soit digérer beaucoup plus longtemps soit augmenter la durée de digestion. Je vous conseille de jouer sur les deux paramètres.  [...]

[Biologie Moléculaire] Résolution gel d'agarose

Soit cette deformation ne te gene pas pour voir ton resultat et je te conseille e laisser tomber, soit c'est vraiment critique et la je te conseille de digérér une plus grosse quantité d'ADN, de passer la digestion sur une colone de purification (utiliser pour les PCR).  [...] - Comme on te l'a souligné, ça peut venir (avec la plus grande probabilité) de la quantité infime de ta digestion et/ou l'efficacité de(s) l'enzyme(s) de restriction utilisées.  [...]

[Biochimie] enzyme de digestion-restriction

q'elle est la difference entre l'enzyme de digestion ( utilisé avant la technique PFGE) et l'enzyme de restriction.  [...] nb. dans mon travail l'enzyme de digestion est I-CeuI,  [...]

besoin d'aide lactase

j'aurais une autre question. pourquoi le lactose, si il n'est pas digéré par l'enzyme, rend-il malade Les personnes intolérantes au lactose ont souvent des maux de ventre prononcés quand elles boivent du lait. Le lactose ne pourrait-il pas traverser le système digestif et se faire oublier.  [...] est ce que cela signifie que les intolérant ne posséde pas cette enzyme qui permet la digestion du lactose si oui j'ai alors tout compris et je vous remercie pour tout.  [...]