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[Biochimie] Extraction et dosage des protéines

Je suis obligée de beaucoup diluer pour éviter ce dosage parasitesui de plus et inégal selon mes échantillons. En fait quand je colore au bleu de coomassie un gel contenant mes protéines après électrophorèse, je m'aperçois que je ne retombe pas sur mon dosage (certains profils protéiques sont plus intenses alors que moins concentrés que d'autres lors du dosage).  [...] De plus, lorsque vous dosez au Bradford, vous dosez les protéines libres dans votre solution. Mais avant de déposer sur votre gel vous mélangez votre solution avec du dénaturant et chauffez un peu non Vous allez alors lyser les cellules sanguines présentes encore dans votre solution et libérer les protéines qu'elles contiennent et qui n'avaient pas été dosées au Bradford.  [...]

extraction et séparations des composants d'une membrane

Mais je n'ai malheureusement pas réussi à trouver comment séparer lipides et protéines libres obtenus, histoire d'obtenir une solution de lipides uniquements.  [...] Une solution est de faire une chromato sur résine échangeuse d'ions (à condition d'avoir utilisé un détergent non chargé (urée, triton...)... car alors, même si tes prot sont dans des micelles, la micelle aura une charge si elle contient une ou plusieurs protéines.  [...]

[Biochimie] Détection des proteines d'une solution acqueuse.

Je dois élaborer un test afin de détecter et quantifier la présence de proteines et d'acide aminés libres dans une solution acqueuse.  [...] Le problème avec Bradford c'est que c'est uniquement les AA aromatiques, tu n'en as que 3. Trp, Tyr, Phe. Pour les acides aminés libre, si tu as Ala, Ile, Gly,... tous les autres en gros, c'est bon tu les vera pas. Si t'as des protéines qu'y n'ont que très peu voir pas d'acides aminés aromatiques tu les vera pas.  [...]

peptide signal et ribosomes libres

note que jeviens de regarder un bouquin de biocell où il est dit. après leur synthèse par les ribosomes dans le cytoplasme la plupart des protéines destinées à la mitochondrie... donc jpense que je tiens le bon bout qd je dis que ces protéines sont synthétisées par les ribosomes libres, et donc oui je pense qu'ils peuvent tout à fait ajouter un signal d'adressage à leur protéines.  [...] Donc ce sont bien les ribosomes libres qui synthétisent les protéines à destination des plastes, péroxysomes, noyau et mitochondrie.  [...]

[Biochimie] notion de pH

Donc si j'ai une solution x acide, à l'intérieur il ya beaucoup de H+ libres... On m'a dit non le H+ n'est pas libre. Alors comment on peut dire qu'il y a beaucoup de H+ s'il n'est pas libre.  [...] Comme l'a dit nowell, les H+ ne sont pas forcément libres. En effet il faut considérer les acides non dissociés (c'est à dire lorsque le proton H+ est encore lié à l'acide) comme une réserve potentielle de H+. Par exemple si tu prend de façon théorique de l'acide sulfurique pur, alors les H+ seront encore liés à l'acide.  [...]

[Biologie Cellulaire] RE et Golgi

J'avais un gros doute vue que l'on parle toujours de l'importation vers l'appareil de Golgi pour les protéine synthétisé dans le RE.  [...] On va plutôt dire les protéines cytoplasmiques (ce qui inclu cytosol + organites (dont vacuole, lysosome,...) que cytosoliques (cytosol). En effet, les protéines cytosoliques ne proviennent que des ribosomes libres.  [...]

[Biologie Cellulaire] Maturation des protéines issues de ribosomes libres

En cours nous avons évoqué le fait que tous les ribosomes étaient libres dans le cytosol mais certain se rattachaient au Reticulum Endoplasmique Rugeux par l'intermédiaire des signaux peptides (détectés par SRP,puis par SR),s'ensuivait ensuite la maturation de la protéine.  [...] Je me demandais,comment les protéines destinées à rester dans la cellule,qui ne comporte donc pas de signal peptide,peuvent maturer.  [...]

protéines cytoplasmiques

Cela voudrait donc dire qu'elles(les protéines cytoplasmiques) passent toutes par les ribosomes puis si c'est des libres par exemple elles peuvent aller dans les mitochondries noyau et peroxysome. Mais j'ai vu que dans mon cours les protéines cytoplasmiques pouvait directement être adressé par les lysosomes.  [...] Donc pour être clair, les protéines cytoplasmique pures sont celles qui sont libres dans le cytosol. (sauf exceptions peroxy / mito').  [...]

proteines du plasma?

C'est la même chose, c'est juste une formulation. Les protéines totales sont les protéines totales présentes dans le sérum.  [...] Par ailleurs, je ne pense pas que toutes les protéines de l'organisme passent par le plasma. Le transport principal entre intestin et périphérie est sous forme d'acides aminés libres, à ce que je comprends. Les protéines du sang sont fonctionnelles (e.g., transport d'acides gras libre pour l'albumine), elles ne sont pas là juste pour être transportées.  [...]

[Biochimie] Importation post et co traductionel

- Certaines protéines ne passent pas par le RE, ce sont des protéines synthétisées par des ribosomes libres et qui sont destinées à rester dans la cellule (Ex. les protéines de la mitochondrie).  [...] Je suis quasiment sûr que la translocation co-traductionnelle fait toujours référence au RE. La seule autre possibilité étant la synthèse par des ribosomes libres ou polysomes dans le cytosol =. protéines destinées aux organites (mitochondrie par exemple), protéines cytosoliques (enzymes de la glycolyse par exemple) ou protéines nucléaires (facteurs de transcription par exemple).  [...]