• Forum - Protéines, Activite enzymatique, Tampon

[Biochimie] conservation d'echantillons au long terme

je travaille sur le cancer colorectal, au temps normal je récupère mes colons dans de l'eau physiologique et je les conserves à -40°...sauf que je les utilises dans l'immédiat. Je voudrai conserver mes echantillons au long terme (l'indisponibilité de certain réactifs m y oblige) J'ai la possibilité de les conserver dans de l'azote liquide.   [...] ..afin de préserver mes protéines et mon activité enzymatique y aurait il un tampon qui soit préconiser.  [...]

Immunoblot

C'est tout à fait ça. Et pour le western, on détecte les protéines avec un anticorps dirigé contre la protéine d'intérêt, cet anticorps lui-même porteur d'une activité détectable (fluorescence, activité enzymatique, radioactivité). C'est donc une variante du SDS-PAGE, car c'est toujours une électrophorèse de protéines sauf qu'on n'est pas en conditions dénaturantes et qu'on détecte avec un anticorps.  [...] Et pour le western, on détecte les protéines avec un anticorps dirigé contre la protéine d'intérêt, cet anticorps lui-même porteur d'une activité détectable (fluorescence, activité enzymatique, radioactivité).  [...]

[Biologie végétale] Plante C4 et C3

Je travaille sur les plantes en C3 et C4 (ce qui est vaste) mais n'ayant eu de cours la dessus je fais appel à vous pour savoir si quelqu'un pourrait m'éclaircir à ce sujet ( voir des cours pour que je me renseigne de manière autonome).   [...] D'autre part, j'ai effectuer des mesure de l'activité enzymatique sur une extraction protéique de maïs et une autre espèce en C3 (Dichanthelium). J'ai mesuré la DO du NADH sous 5 conditions de tampon NAD-MDH/NADP-MDH, NAD-ME/NADP-ME, PEPc/PEPcK, NAD-GAPDH/NADP-GAPDH, Ala-AT/Asp-AT.  [...]

Question : Identifier une protéine dans un anabolisme

En fait, de nos jours, on aurait probablement déja identifié la protéine (du moins virtuellement) et le gène correspondant. En effet, maintenant que les organismes sont entièrement séquencés, on connait théoriquement toutes les protéines potentielles et on a une idée de leur fonction (par analogie de structure, analogie de séquence).  [...] Une approche différente est d'étudier l'activité enzymatique de fraction protéiques, par exemple. On sépare un pool de protéines selon leur caractéristiques biochimiques (charge, taille, etC...) et on regarde dans quelle fraction on retrouve l'activité enzymatique recherchée.  [...]

[Biochimie] Plusieurs questions sur les chromatographies échangeuses d'ions et d'affinité

Lors d'une question. les protéines B sont plus petites que l'enzyme on a répondu vrai car les protéines B se situent APRES l'activité enzymatique.  [...] Je sais trop qu'est ce que tu veux dire ici... Généralement pour ce type de chromatographie (surtout les IMAC) la concentration en NaCl des différents tampons est relativement élevée ([NaCl]. 300 mmol/l). Cela permet d'augmenter la specifité, c'est a dire que seules les molécules (protéines généralement) ayant une forte affinité avec la colonne se fixeront sur cette dernière.  [...]

ADN

Bon, on connait aussi des ADN catalytiques (dnazyme ou déoxyribozyme), avec une large palette d'activité. Pour l'instant, c'est in vitro. Mais rien ne dit que l'on en trouvera pas in vivo. Les ribozymes ne sont donc plus forcément un très bon argument pour le monde ARN.  [...] These artificial DNA enzymes or `deoxyribozymes' generate large chemical rate enhancements and demonstrate precise substrate recognition, much like their protein and RNA counterparts. Recent studies with these prototypic deoxyribozymes indicate that DNA has a substantial untapped potential for intricate structure formation that could be exploited in novel chemical and biological catalysis.  [...]

La Momification

Je pense que ce que vous recherchez comme concept c'est celui de la température et du pH optimaux de fonctionnement d'une enzyme. Les enzymes sont des protéines à activité catalytique, et l'évolution a fait qu'elles fonctionnaient mieux dans la plage de température et au pH qui sont les caractéristiques physiologiques des êtres vivants les possédant (pour l'humain, la température physiologique est 37 et le pH autour de 7,4 (cela dépend des compartiments, certes)).  [...] En effet, une modification du pH, par simple réaction acido basique avec les acides aminés des protéines, va modifier leur charge, donc leur conformation et leur activité catalytique. plus ou pas d'activité enzymatique.  [...]

[Biochimie] préparation d'une gamme etalon

En faite je dose une activité enzymatique avec un réactionnel composé de 125 µl de tampon, 50 µl de solution enzymatique et 75 µl de substrat pNP-glycoside.  [...] Le milieu réactionnel est incubé à 37°C pendant 10 min. La réaction est arrêtée par ajout de 2 ml de carbonate de sodium (2 %, p/v). L'activité enzymatique se manifeste par l'apparition d'une coloration jaune caractéristique du paranitrophénol (pNP) libéré dans le milieu.  [...]

biochimie.les proteines

1/ Pouvez vous me confirmer que seules les protéines globulaires ont une structure tertiaire (il y a certaines contradictions dans mes fiches..).  [...] 2/ Est ce qu'il faut obligatoirement avoir une structure tertiaire pour avoir une structure quaternaire (Dans ce cas les protéines fibrillaires n'auraient jamais de structure quaternaire si le 1/ est vrai).  [...]

[Biologie Cellulaire] enzymes specificité

la réaction du biuret met en evidence les liaisons peptidique qui unissent les acide aminé entre eux dans les protéines. Elle consiste a verser une solution du sulfate de cuivre et de la soude sur la matière a tester et laisse a agir une minute la coloration violette indique une réaction positive.  [...] Quoi qu'il en soit le réactif du biuret ne permet pas d'évaluer l'activité enzymatique de l'amylase. Il ne permet que de révéler la présence de protéines et rien de plus. Vous mettriez une protéine non enzymatique ca serait exactement pareil.  [...]