• Forum - Propre, Réplication, Plasmide

transduction phagique

Les phages que tu récupereras, seront soit identiques à ton phage d'origine, soit contiendront des séquences d'ADN de ta bactérie qui se seront malencontreusement retrouvés insérés dans la séquence du phage en plus de leur ADN d'origine. Il est peu probable que l'ADN de ton virus d'origine ait perdu un morceau de sa séquence car les phages n'ayant pas la séquence entière du phage d'origine, ont une trop grande chance d'avoir perdu une séquence essentielle comme celle de la capside ou des protéines virales. C'est tout ce que je vois comme solution.   [...] merci pour ta réponse, mais imagine que j'utilise ce phage pour faire de la trasduction d'un plasmide. l'adn du phage contiendra non seulement les informations nécessaires à sa propre réplication mais également mon plasmide. Les régions qui appartenaient au plasmide ne sont donc pas essentielles pour le phage.  [...]

origine de réplication

Bonjour à tous, lorsqu'on modifie génétiquement une cellule en lui injectant un plasmide, des fois on dit que le plasmide a une origine de réplication qui fonctionne dans une cellule et pas dans un autre organisme.  [...] ça veut dire quoi en faite pour moi l'origine de réplication c'était quand les 2 brins d'ADN se détachent et qu'on commence la réplication... est ce que quelqu'un peut m'aider merci d'avance.  [...]

[Biochimie] Clonage vecteur navette sur la levure

En fait, le passage en bactérie te sert à amplifier la quantité de plasmides, pour être certain que, lors de ta transformation, de l'ADN entrera effectivement dans la cellule.  [...] Dans le cas du plasmide, tu peux vouloir, ou non l'intégrer au génome ou bien le laisser autonome dans la cellule s'il dispose de sa propre origine de réplication.  [...]

[Biotechnologie] ADN recombinant réplication dépend du cycle cellulaire ?

Selon les bactéries et les vecteurs utilisés, la réplication plasmidique est indépendante de la réplication chromosomique.  [...] C'est d'ailleurs une propriété qu'on utilise pour augmenter le rendement de production de plasmides, en bloquant spécifiquement la réplication chomosomique sans gêner celle du plasmide.  [...]

Carte plasmide pcDNA 3.1

Je sais que les ori servent à initier la réplication, mais je croyais qu'un plasmide se répliquait d'un seul coup et toujours à partir du même endroit, donc pourquoi il y a 3 ori différentes (SV40ori, pUCori, f1ori) Et SV40pA qu'est ce que c'est.  [...] SV40ori sert d'origine de réplication dans certaines cellules eucaryotes, c'est-à-dire que si on l'insert dans E.coli il ne va pas s'exprimer Mais si le plasmide doit se répliquer dans une bactérie la réplication va commencer à pUCori ou f1ori Je ne comprends pas pourquoi il y a plusieurs origines.  [...]

[Biologie Cellulaire] Vecteur d'expression transitoire

Oui il y a expression de ton plasmide sans séquence Ori car cette séquence est nécessaire pour la réplication du plasmide et c'est une origine de réplication procaryote lorsqu'on fait des expressions transitoires car on produit les plasmides chez E. coli. Pour initier la transcription on utilise la plupart du temps le promoteur fort du cytomégalovirus (CMV) que l'on place en amont de la séquence codante.  [...] Et dernière chose, pour la production des plasmides dans des bactéries, il ne faut pas qu'une origine de réplication procaryote (Ori) mais aussi des séquence codant un ou plusieurs gènes de résistance à des antibiotiques (habituellement 2) pour sélectionner les bactéries qui ont intégré le plasmide dans un milieu de culture contenant les antibiotiques.  [...]

Problème de rendement kit Maxiprep

Le chloramphenicol comme Flying le propose, permet d'empecher ta bactérie de se diviser, mais sans empecher la réplication du plasmide, tu peux donc laiser plus longtemps (pour avoir pus de plasmide) sans saturer en bactérie car elles arretent de se mutiplier quand tu ajoute le chloramphenicol,  [...] J'étais justement en train de faire des recherches sur l'ajout de chloramphenicol mais c'est recommandé pour les plasmides ayant une origine de réplication pMB1 ou ColE1. D'après la carte de mon plasmide, ce n'est pas le cas (quoique je m'interroge quand même car il a une pUC ori donc s'agit-il d'une origine pMB1 J'ai l'impression que j'ai trop de lacunes dans mes connaissances.  [...]

[Biologie Moléculaire] Régulation de la réplication bactérienne

D'après ce que j'ai lu, la réplication commence si l'ARN II entre dans la bulle de réplication au niveau de l'ori du plasmide et qu'il est clivé par la RNase H. Mais ceci arrive peu fréquemment. Dans la plupart des cas, l'ARN I va s'hybrider à l'ARN II et apparemment Rop (sous forme dimérique) facilite cette hybridation.  [...] Dans le mem registre si tu conaissais des trucs sur la replication plasmidique type rolling circle faisant intervenir DSO et SSO.  [...]

Différence entre le chromosome et les plasmides.

Certains plasmides peuvent aussi être transmis par conjugaison bactérienne.  [...] A noter. le plasmide possède une capacité d'auto-réplication.  [...]

[Biologie Moléculaire] Vecteur d'expression

Les gènes codant pour une resistance à l'ampicilline par exemple permettent de sélectionner les bactéries qui ont reçu le transgène. Mais pour ce qui est de l'amplification pour obtenir de grandes quantités de plasmide, c'est tout bête mais l'origine de réplication permet de répliquer le vecteur dans une même bactérie ou bien chez les cellules filles aprés mitose.  [...] Et enfin dans un exercice on introduit un vecteur viral par voie intraveineuse et on observe que les différents tissus de l'organisme n'expriment pas la même quantité de protéine recombinante. En fait si je comprend bien on a injecté un virus portant le gène d'interêt dans l'organisme ce qui va permettre d'injecter le matériel génétique dans la cellule hôte Dans ce cas comment expliquer les variations observées Est-ce que c'est dû au fait que le virus n'infecte qu'un type paarticulier de cellule.   [...]