• Forum - Principe, Extraction, ARN

Extraction d'ARN

Quelqu'un pourrait-il m'expliquer le principe de l'extraction de l'ARN svp.  [...] Bonjour quand même et ça dépend par quelle technique.   [...]

[Biologie Moléculaire] Solution Q du kit Qiagen

A tout hasard est ce que tu utilises le Kit Rneasy Mini pour l'extraction de l'ARN, pourrais tu m'expliquer quel est le principe Merci d'avance.  [...] Il y a effectivement aussi une étape a la DNase. Mais celle-ci n'est cependant pas obligatoire. tout dépend de la manip que tu veux réaliser après avoir extrait tes ARN. Si avoir un peu d'ADN ne dérange pas, alors tu peux passer sur cette étape.  [...]

[Biologie Moléculaire] Kits d'extraction d'ARNm

Salut tt le monde. qq pourrait m'aider à comprendre le principe des kits d'extractions d'ARNm à partir des tissus végétaux, étape par étape svp (en fait je n'ai aucune idée sur les kits et je vais les utiliser bientot lors d'un stage), merci bcp.  [...] De façon succinte, voilà le principe des kits d'extraction d'ARN.  [...]

[Génétique] Principe de l'extraction d'ARN???

J'utilise pour l'extraction d'ARN, le kit Qiagen RNeasy(extraction en colonne), voila j'aimerai savoir sur quels principes il repose.  [...] J'ai vainement essayer de trouver une réponse à ma question en faisant partant de la piste donnée par Tiscarab... Mais rien de très concluant, la seule chose précisée dans le protocole est que la méthode combine les propriétés de fixation sélective des membranes de silice et de multiples étapes de centrifugation... Ca ne m'aide pas vraiment.   [...]

[Biologie Moléculaire] extraction faible qté ARN

Pour répondre à Greg concernant mes quantités et protocoles, je ne travaille pas sur des cellules mais sur de l'ARN circulant dans le sang d'où les faibles quantités obtenues et la fragilité des ARN. J'ai utilisé la méthode d'extraction au Trizol puis passage sur une colonne rneasy mini kit.  [...] Nous sommes un labo qui travaille de façon quotidienne avec de l'ARN (transcrits in vitro, extraction d'ARN, etc) et nous n'utilisons jamais de DEPC, juste des solutions autoclavées. Même les bacs à gels traînent à l'air libre, sans nettoyage. Il n'arrive qu'extrêmement rarement des dégradations, et d'habitude c'est dû à une contamination accidentelle de notre faute.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN par la méthode phénol/chloroforme

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN par la méthode phénol/chloroforme.  [...] j'aurais une petite question au sujet de l'extraction des ARN totaux par la méthode au phénol chloroforme.  [...]

[Biologie Moléculaire] Difficultés pour solubiliser de l'arn

Suite à une extraction d'ARN totaux à partir de larves de Trichinella (nématode) j'ai des difficultés pour ressolubiliser mon ARN. Mon protocole est basé sur une extraction classique au phénol-chloroforme et à la fin un lavage à l'éthanol 75% et séchage. Le séchage de mon culot s'est fait en étuve à +37°C puis resupension dans de l'eau Rnases free.  [...] En fait j'ai réussi à ressolubiliser une partie de mon culot en refaisant une extraction phénol-chlo. Néanmoins, il me reste une partie insoluble. Pensez-vous que pour faire ma banque d'ADNc je devrais refaire une extraction où je peux travailler avec mon culot dissout En gros, j'ai peur que ne se sont dissoutes que certaines catégories d'ARN, lesquelles je ne sais pas mais c'est possible.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction ARN

j'aurais voulu savoir si lorsque l'on fait une extraction d'ARN par gradient de césium il est nécessaire de faire avant une extraction phénol/chloroforme.  [...] L'extraction phénol/chlorophorme ne permet pas de discriminer les ADN des ARN, quoiqu'il doit exister des protocoles suffisament précis pour optimiser le rendement en ARN.  [...]

[Biochimie] L'acétone à froid dans l'extraction de l'ARN

après avoir cherché à plusieurs reprises sur internet, je n'ai pas réussi à trouver le rôle de l'acétone à froid dans l'extraction de l'ARN.  [...] On me l'avait expliqué comme étant une étape de purification, toutes les molécules qui pouvaient se fixer sur l'acide nucléique ne pouvait le faire dans l'acétone. Sur le moment, j'avais pris ça pour argent comptant, mais maintenant, c'est vrai que c'est intéressant comme réflexion.   [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction d'ARN pour puce

.. j'ai testé mon extraction sur des cellules cultivés en milieu optimum et c'est pareil, un énorme pic 5S. ma principal méthode d'extraction est phenol/chloroforme, j'ai testé un kit macherel, j'ai eu le m^me pic, avait vous une idée sur ce que peut etre ce pic des 5S des ARN degradés.  [...] donc je vais essayé une extraction en congelant mes culots (sans rien) se qui me fait un peu peur, j'ai deja essayé le RNA latter, mais ca m'a bien compliqué les choses parceque il precipite les proteines.  [...]