• Forum - Origine, Réplication, Promoteur

[Biotechnologie] Clonage Eucaryote

Voilà, j'ai ecrit que pour la production de protéines dans des cellules de mammifères, il fallait utiliser un plasmide contenant un site polyA, une origine de réplication virale ainsi qu'un promoteur de type viral.  [...] Oui mais pour utiliser un plasmide dans une cellule de mammifères, faut il alors qu'il y a ait une origine de réplication de type virale ainsi qu'un promoteur type viral.  [...]

Différence entre transposons, intégrons, super-integrons

J'ai uniquement compris les deux termes opéron et réplicon, un opéron serait un gène classique c'est à dire 3 parties (structure, opérateur, promoteur), et un réplicon est une zone d'un ADN contenant une seule origine de réplication.  [...] Après pour définir transposons et intégrons (super-intégrons) j'ai vraiment du mal, même après quelques recherches.   [...]

[Biotechnologie] Insuline

Je travaille actuellement sur un projet bibliographique pour la conception d'une insuline par voie orale.   [...] Il va falloir que tu utilises un vecteur possédant un gène de sélection (HIS4 par exemple), une origine de réplication et un promoteur fort (généralement celui de l'alcool oxydase AOX1) compatibles avec pastoris. Invitrogen propose des plasmides pour l'expression chez pastoris mais je n'en sais pas plus.  [...]

[Génétique] Quelques questions diverses

3. La TATA box (région contenant beaucoup d'adénine et de thymine dans l'ADN) est-elle l'origine de réplication de l'ADN ou l'origine de transcription (autrement dit, le promoteur).  [...] C'est théoriquement une région qui recrute l'ARN polymérase (pour la transcription) mais j'ai une dia de mon prof (il ne donne que des fichiers power point) qui parle de région riche en T et en A qui est l'origine de réplication de l'ADN (qui recrute l'ADN polymérase).  [...]

[Biochimie] Manipulation de l'ADN: plasmide

je suis actuellement en première année de licence en biologie et nous avons étudié les plasmides mais je n'ai pas tout compris notamment sur la carte de réstrction. Quelle est son principe et qu'est ce qu'un site de réstrction, une origine de réplication, un promoteur et un terminateur.  [...] L'avantage de ces enzymes est qu'ils coupent des séquences en acide aminés très spécifiques et forment (souvent) ce qu'on appelle des bouts collants (ils ne coupent pas les doubles-brins nets mais laisse dépasser un des deux brins). L'intérêt de ceci est qu'un bout collant généré par une enzyme de restriction aura tendance à s'attacher à un bout collant généré par la même enzyme.   [...]

[Biologie Cellulaire] Vecteur d'expression transitoire

Oui il y a expression de ton plasmide sans séquence Ori car cette séquence est nécessaire pour la réplication du plasmide et c'est une origine de réplication procaryote lorsqu'on fait des expressions transitoires car on produit les plasmides chez E. coli. Pour initier la transcription on utilise la plupart du temps le promoteur fort du cytomégalovirus (CMV) que l'on place en amont de la séquence codante.  [...] Et dernière chose, pour la production des plasmides dans des bactéries, il ne faut pas qu'une origine de réplication procaryote (Ori) mais aussi des séquence codant un ou plusieurs gènes de résistance à des antibiotiques (habituellement 2) pour sélectionner les bactéries qui ont intégré le plasmide dans un milieu de culture contenant les antibiotiques.  [...]

[Biotechnologie] Construction plasmidique

En ce qui concerne mon plasmide, il doit contenir. Un Promoteur, une Origine de Réplication, et des gènes de résistance ou de levé d'auxotrophie selon l'organisme.  [...] Mon cour traite en fait des différents plasmides, et des éléments qui le compose ( promoteur fort ou non, adn polymérase, gène de resistance etc...) ainsi que les transformation génétique chez les levures et bactéries.  [...]

vecteur d'expression

Le vecteur d'expression comprend la partie codant de ton gène, ainsi que des séquence non codante. promoteur, origine de réplication, polylinker... et souvent des gènes de résistances (ampiciline, neomycine...) ou des tag.  [...] Le vecteur d'expression est en général un plasmide circulaire contenant le gène d'intérêt accompagné de tous les éléments nécessaires à sa transcription, une ou plusieurs origines de réplication et un marqueur de sélection (gène de résistance ou autre).  [...]

[Biochimie] Vecteur d'expression pour une proteine recombinante

Vu que j'ai peu de chance d'avoir un site de restriction juste apres mon promoteur et juste avant mon terminateur, cela signifie que l'ARN polymerase va me polymeriser un ARNm qui contient des codons supplémentaires par rapport à l'ARNm issues de la transcription de l'ADNc uniquement.  [...] Ici tu peux voir entre le promoteur et le terminateur ce MCS qui contient plein de sites de restriction. Il y a aussi l'origine de réplication (ColE1), un gène de résistance à la néomycine (neoR).  [...]

[Biologie Moléculaire] Résumer Génétique (absurde)

Je m'explique sur ce terme. pour moi un promoteur au niveau de la transcription, un réplicon ou origine de réplication dans la réplication, ou une séquence comme la séquence Shine Dalgarno dite site de fixation du ribosome, sont ce qu'on appelle des pistes d'atterrissage.  [...] Pour aider à cette fixation de la polymèrase ce sont le séquences situées avant le gène codant qui sont importante. les promoteurs et les enhancers. Ces séquences peuvent nécessité la présence de facteurs de transcriptions et/ou de molécules de réplication pour permettre le fonctionnement.  [...]