• Forum - Origine, Réplication, Copies, Cellules

[Biologie Moléculaire] Colonies de bactéries

Je suis actuellement entrain d'effectuer une modification de BAC par recombinaison homologue dans la bactérie DH10B. Je viens de transformer mes bactéries qui contiennent le BAC avec le plasmide contenant la séquence que je veux insérer dans ce BAC. Après l'electroporation, mes bactéries ont poussées sur un milieu contenant des antibiotiques appropriés montrant que certaines ont bien intégrer le plasmide et que celui ci a du s'intégrer dans le BAC (le plasmide contient une origine de réplication qui ne lui permet pas de se répliquer de façon autonome dans ce type de bactéries).  [...] Malheureusement il me semble (à confirmer) que les BAC possèdent une origine de réplication OriS qui maintient le nombre de copies à 1 par cellules.  [...]

[Biologie Moléculaire] Préparation de plasmide, chloramphenicol

3. Et puis autre question, j'ai egalement lu que l'origine de replication colE1 pourrait necessiter un cofacteur bacterien tres instable. Cultiver des bacteries avec ce plasmides en presence de chloramphenicol ne devrait donc pas permettre d'augmenter le nombre de copie par cellules, puisque si la synthese de proteine est inhibee, le facteur en question n'est pas renouvele, donc le plasmide n'est pas replique.  [...] Par ailleurs, j'ai egalement lu que certains facteurs bacteriens sont responsables de controle du nombre de copies de plasmides par cellules en reprimant l'origine de replication colE1 (c'est ce qui fait la difference entre les plasmides high et low copy, si j'ai bien compris).  [...]

biologie moleculaire

- Une molécule capable de se répliquer, comme celle que tu as cité. C'est le premier critère. En fonction de tes besoin, tu vas choisir une molécule qui peut se répliquer en grand nombre de copies (plasmide avec origine colE1 de réplication, ou oriC) ou en nombre moindre (p15a).  [...] - Des sites de clonages de restriction. avec toute une zone qui serait des sites uniques pour un maximum (en priorité les plus communes) d'enzymes de restriction. Certains vecteurs sont vendus de façon linéaire et traités de façn a pouvoir incorporé un insert sans qu'il y ait besoin de digérer avant.   [...]

[Biologie Moléculaire] Choisir le bon vecteur?

Pour choisir un vecteur, il te faut regarder la force de l'origine de réplication (qui détermine le nombre de copies de plasmide dans la bactérie), les résistances aux antibiotiques (sélection des bactéries intégrant le plasmide), la présence d'autres marqueurs de sélection comme la beta-galactosidase, le type de système d'expression (promoteur euca/procaryote, RBS pour traduction chez procaryote,  [...] Pour ce qui est finalement du choix du vecteur, il te faut un vecteur contenant une origine de réplication procaryote, un gène de résistance à un antibiotique et pourquoi pas le gène beta-galactosidase à cheval du polylinker (cela permet de sélectionner les bactéries qui ont un plasmide ayant intégré un insert), et bien sûr le polylinker.  [...]

Guerir les malades du SIDA? voici ce que je propose... - Page 3

L'idée initiale a été tentée en 1987 par le pr Roué à l'hopital militaire Bégin. Il a effectué une exsanguino transfusion sur un patient, mais bien entendu le virus est réapparu car on sait depuis qu'il se cache dans beaucoup de cellules autres que les cellules sanguines T4.  [...] C'est le principe même de toute infection. la réplication de l'agent infectieux et même si le virus initial est éliminé, il restera toujours des copies qui prendront la suite pour faire la même chose dans les mêmes cellules. La trithérapie, comme tous les traitements, agit sur tous les agents infectieux accessibles (que ce soit des virions ou l'original).  [...]

[Evolution] Création de nouveaux gènes

La réplication est le processus qui permet de recopier tout le génome d'une cellule et qui a lieu durant la phase S du cycle cellulaire. Il est vrai qu'on abouti à une deuxième copie du génome donc c'est une duplication oui si on veut puisque la définition de dupliquer est doubler la quantité de.  [...] C'est l'essentiel pour la réplication. sans que réplication de l'ADN se produise, pas de division cellulaire, donc pas de nouvelles cellules. On a deux copies du génome de la cellule en question. C'est très important de noter ça. le génome entier est répliqué, donc tous les chromosomes qui le composent et donc tous les gènes que ces chromosomes portent.  [...]

Persistance des mutations

En fait il existe de multiples versions de chaque gène appelées allèles. Chacune de ces versions/copies devient plus ou moins unique au fil des réplications/générations, puisque l'ADNpolymérase n'est pas très fiable dans ses copies. D'un parent à sa descendance et même d'une cellule à l'autre au sein d'un individu, il y a d'infimes erreurs de copies qui se glissent au fil de la réplication de chromatides. Ce qui n'empêche nullement la procréation.  [...] Ce sont des petites différences, qui s'accumulent au fil des générations pour aboutir à des différences permettant ainsi de distinguer deux espèces différentes. Mais dans ce cas, il y a de grandes chances que l'espèce d'origine est elle aussi évolué de son côté, devenant elle aussi une espèce différente de celle d'origine.  [...]

[Biologie Moléculaire] La molécule mystère - Page 4

Euh, ben là du coup, je suis un peu perdue. l'ADN plasmidique est répliqué par la polymérase de la cellule hôte, la condition à une bonne réplication étant les compatibilités entre son Ori et l'espèce hôte.  [...] Plus proche de la notion de réplication. s'agit-il d'une protéine participant au contrôle du nombre de copies A la partition lors de la division cellulaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] replication transcription

On parle de brin matrice plutôt pour la transcription. C'est le brin qui va servir de support pour synthétiser l'ARNm. Pour la réplication, les deux brins servent de support puisque l'intégralité de l'information génétique est répliquée au cours de ce processus.  [...] De cette façon, on comprend mieux que la réplication, qui vise à transmettre l'intégralité de l'information génétique à la descendance, va se servir des brins A ET B comme matrice pour synthétiser l'ADN double brin afin de générer deux copies. une pour chaque cellule fille.  [...]

cycle cellulaire

En effet, si l'ADN est endommagé, la cellule a tout intérêt de ne pas répliquer des copies erronées. Elle va d'ailleurs stopper son cycle et attendre la réparation de son ADN avant d'entrer en réplication (cf point de contrôle d'entrée en phase S).  [...] Si la molécle d'ADN peut être réparée, alors le cycle reprendra et la cellule entrera en réplication après que les dommages aient été corrigés.  [...]