• Forum - Membrane, Molécules, Poids

[Biochimie] dialyse

Pour expliquer simplement, ça permet de remplacer le tampon initial par le tampon que tu veux. C'est souvent utiliser pour enlever les sels d'un tampon (on les diluent a un niveau ou il ne risquent pas d'interférer avec la suite des expériences pour être plus exact).   [...] Sinon la membrane utilisée est poreuse et laisse donc passer les molécules inférieures a un certain poids (dépendant de la membrane utilisée) tout en gardant les protéines a l'intérieur de la membrane.  [...]

Pyruvate

Au cours sur le métabolisme, le prof nous a pas expliqué comment le pyruvate passait les membranes de la mitochondrie, il nous a juste donné le terme Shuttle... Je doute que cette molécule puisse diffuser librement a travers les membranes de la mitochondrie (surtout l'interne.  [...] des Eucaryotes, le pyruvate doit d'abord traverser la membrane externe très perméable par un tunnel aqueux formé par la porine, une protéine qui permet le passage des molécules dont le poids.  [...]

[Biologie Cellulaire] Hypertonicité, hypotonicité, osmose

Une molécule de faible poids moléculaire va pouvoir traverser une membrane perméable sans problème, et ce déplacement de molécules va s'effectuer du milieu le plus concentré vers le milieu le moins concentré (= dans le sens du gradient de concentration), de façon à équilibrer les concentrations de chaque côté de la membrane.  [...] Les MHPM, concernées par l'osmose, ne peuvent pas franchir cette membrane (car trop grosses). Il y a donc d'un côté de la membrane une quantité plus importante de molécules sans équilibrage possible, puisque le franchissement de la membrane n'est pas possible.  [...]

[Biologie Cellulaire] Question qcm avant exam

5) - La bicouche lipidique a une perméabilité sélective, tout comme la membrane de dialyse. Cependant, dans le cas de la membrane de dialyse, il s'agit d'une sélection en fonction d'un poids moléculaire seuil, alors que la bicouche est une membrane réelle.  [...] Pour la 4 je dirais non car la membrane cellulaire ne laisse pas passer les ions.Elle ne laisse pas passer le NaCl par diffusion car c'est une molécule chargée. Il passe par une protéine, un canal, le Na K Atpase. Idem pour le saccharose je pense alors que dans la membrane de dialyse ils passent tout les 2 par diffusion.  [...]

[Biologie Moléculaire] Western Blot Transfert sur membrane

Le moyen le plus simple de voir si tu as transféré quelque chose, c'est de contrôler que ton marqueur de poids moléculaire ait bien été transféré sur ta membrane. Si il n'est pas sur la membrane, c'est que tu n'as rien transféré.  [...] Mon problème en ce moment c'est qu'après le transfert sur membrane mes bandes de protéine sont coulantes comme si on les avait frottés tout comme les bandes du marqueur de poids moléculaire.  [...]

[Biologie Cellulaire] Diffusion passive/transport passif

diffusion passive. Elle se fera à travers les pores aqueux des membranes biologiques. Cela concerne les molécules hydrosolubles, ionisé, de faible poids moléculaire comme les électrolyte.  [...] - diffusion simple. passage de molécules à travers la membrane selon le gradien électrochimique (je dirais même chimique uniquement, car les molécules chargées ne passent pas.). Cela ne concerne que les molécules hydrophobes, les petites molécules polaires non chargées (eau compris. osmose).  [...]

La diffusion de l'eau

l'eau est une petite molécule polaire qui diffuse plus lentement que O2 mais diffuse bcp + vite que les ions en solution et que les autres petits solutés polaires. On dit que la membrane est semi-perméable et que l'eau la traverse par osmose.  [...] Il me semble que toute molécule non chargée et de poids moléculaire inférieur à 100Da diffuse librement à travers la membrane plasmique. C'est le cas de l'eau comme c'est le cas de l'éthanol par exemple.  [...]

[Immunologie] immunoblot...

Pour lire un poids moleculaire d'une proteine inconnue sur un gel, je dessine une courbe de calibration avec mes poids moleculaires standards. et apres Y a t-il un rapport logarythmique dans la migration des molecules.  [...] Avec cette échelle contenant certaines molécules d'un poids déterminé, tu sauras donner un poids approximatif à ta protéine.  [...]

[Biochimie] Problème avec mon western

Mais quand j'ai déshybridé la membrane pour hybrider l'actine, à la révélation c'était la catastrophe, j'ai eu presque pour tous les puits des mi bandes, comme si les puits étaient remplis qu'à moitié avec les protéines... je ne comprend vraiment pas.  [...] ...Dans le cas où les deux protéines ont des poids moléculaires suffisamment espacés, on peut couper la membrane entre les deux tailles attendues (grâce au marqueur de taille) et faire l'incubation de chacune des parties avec l'anticorps adéquat. Ou alors, si les deux protéines ont des tailles proches, il y a trop de risque de couper des bandes d'intérêt, donc on peut faire migrer deux gels en parallèle.  [...]

Problème de séparation - Western blot

J'ai un problème assez bizarre. Lors de mon western blot, juste avant d'arrêter la migration, j'ai remarqué que mon marqueur de poids moléculaire ne s'était pas séparé et était resté entier, par contre il a bien migré jusqu'en bas du gel, de même pour les échantillons.  [...] Il faut savoir que j'ai poursuivi jusqu'à la révélation et j'ai obtenu des bandes blanches sur une membrane noire (l'inverse de ce qu'on devrait avoir en gros) et les bandes blanches étaient tout en bas de la membrane, rien ne s'est séparé en fonction du poids moléculaire et tout est au même endroit, je pense que la bande blanche est due à ça. signal trop fort car tout au même endroit.  [...]