• Forum - Membrane, Externe, éthanol

Coloration gram +, peptidoglycane (hydrophile) imperméable à l'alcool (hydrophile) ??

Mais en faisant le lien avec la différence entre gram - et gram + je ne comprends pas comment l'alcool peut pénétré beaucoup plus facilement dans les bactéries gram - surtout que ces dernières ont une Double couche lipidique (donc intérieur hydrophobe).   [...] Sinon l'explication réside dans le fait que chez les grams - la membrane externe est dissoute par l'éthanol et ce dernier passe ensuite a travers la muréine (couche pas assez épaisse pour être dite imperméable par rapport a celle des gram+).  [...]

[Biologie Moléculaire] western blot /tampon de transfert

De plus le methanol peut etre facilement remplace par de l'ethanol voire supprime (sauf utilisation de membrane PVDF evidemment).  [...] Rapidement...pareil, pas d'ajustement de pH et remplacement du methanol par de l'ethanol. Le retrait de l'ethanol peut ameliorer le rendement de transfert de proteines de haut poids moleculaire. On peut supprimer l'ethanol avec les membranes de PVDF, pas conseille avec les membranes de nitrocellulose.  [...]

alcool à 70°?

Non ça c'est la mauvaise explication. Prend du violet de gentiane et de l'éthanol, tu verras que ça ne décolore pas si bien. En fait l'éthanol déstabilise la membrane et provoque la fuite du colorant.  [...] Alcohols are most effective when combined with purified water to facilitate diffusion through the cell membrane. 100% alcohol typically denatures only external membrane proteins. A mixture of 70% ethanol or isopropanol diluted in water is effective against a wide spectrum of bacteria, though higher concentrations are often needed to disinfect wet surfaces.  [...]

[Biochimie] Western blot

Un facteur qui peut également jouer est la balance éthanol/SDS. Le SDS aide tes protéines à sortir du gel mais diminue leur fixation à la membrane. à l'inverse l'éthanol aide à la fixation mais empêche les protéines de sortir du gel. Tu peux donc essayer peut être d'augmenter la quantité de SDS et de baisser un peu l'éthanol.  [...] Cependant une personne de mon équipe a réalisé un transfert d'une très grosse protéine (. 300 kDa) et il a un tampon de transfert adapté, pris d'une publie. Il réalise son transfert à 20V à 4°C et a noté une nette amélioration du transfert des marqueurs de haut poids moléculaire comparé aux méthodes classiques.   [...]

[Biologie Moléculaire] Western Blot avec membrane PVDF

Je transférais mes protéines sur une membrane de nitrocellulose (transfert semi-sec avec Trans Blot Turbo System de Bio-rad) mais j'ai testé depuis peu la membrane de PVDF (même méthode de transfert). J'ai incubé mes membranes avec plusieurs anticorps primaires (toujours les même anticorps et 1 anticorps primaire/membrane).  [...] J'ai déjà entendu dire que la membrane de PVDF pouvait mieux retenir certaines proteines, est- ce le cas Avez-vous déjà rencontré ce problème et si oui, comment peut-on éviter au mieux d'avoir un signal aspécifique.  [...]

[Biochimie] Questions Western Blot

Hmm, il me semble que le méthanol permet de rendre la membrane PVDF (plutôt hydrophobe) hydrophile et de faciliter ainsi les transferts. Les membranes de nitrocellulose ne nécessitent pas ce traitement au méthanol pour que les transferts s'effectuent.  [...] Sur le même topic. j'utilise des membranes PVDF. Seulement ma membrane a séchée (exposition O/N). si je la réactive dans de l'éthanol et que je la stripp. cela va-t-il refonctionner.  [...]

[Biochimie] bruit de fond western blot

Je sais que nous on réutilise le méthanol dans lequel on a trempé la membrane car apparemment on a pas le choix d'utiliser du méthanol par contre pour le tampon de transfert, on peut utiliser de l'éthanol à la place du méthanol.  [...] Je confirme, méthanol pour mouiller la membrane c'est mieux, il suffit de tremper dans quelques ml sous la sorbonne, 30 sec juste histoire de mouiller la membrane, rien de si contraignant... Ensuite on peut la mettre à équilibrer dans le tampon de transfert pour lequel on utilise de l'éthanol.  [...]

[Biochimie] Diffusion simple et facilité

Un certain nombre de petites molécules 02,CO2, acides gras, éthanol, peuvent traverser librement la membrane cytoplasmique lorsque leur concentration dans le milieu extra cellulaire est supérieure à celle du milieu intracellulaire.  [...] En ce qui concerne la diffusion facilitée, cela dépendra de la présence des protéines trans-membranaires présentes pour une cellule donnée. En effet, les molécules dans ce cas présent doivent, pour traverser les membranes, être aidées par des protéines enchâssées dans la bicouche lipidiques.  [...]

[Microbiologie] microbio altaire

je ss a la recherche des doc qui concernes la fermentation de jus extrait des dattes en ethanol et en vinaigre dans un fermenteur (biorecteur) a membrane recycler.  [...]

[Biologie Cellulaire] Membranes

Donc oui, elle peut être dûe aux glycoprotéines qui se fixent que du coté extérieur de la membrane. Elles donnent un sens à la membrane. Les différentes concentrations de lipides aussi. Composition des phospholipides Peut être bien genre. Phospholipides plus longues d'un coté de l'autre etc.  [...] Hmmmm. Il me semble que l'éthanol passe assez bien la membrane. C'est une molécule hydrophile. Je ne dirai pas qu'elle est imperméable à toutes les molécules hydrophiles mais la plupart.  [...]