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Hybridome

Dans mon cours il est marqué que les anticorps monoclonaux sont obtenus par ADN recombinant (jusque la Ok), puis qu'il est utilisé en cancérologie et qu'il est obtenu à partir d'un seul clône de plasmocyte.  [...] La cellule myélomateuse donc tumorale est immortelle et confère cette propriété aux cellules hybrides formées. C'est la magie de la génétique ou pas.   [...]

[Génétique] CGH-array

pour être plus précis, on cohybride sur une puce contenant des fragments d'ADN humain, l'ADN amplifié du patient qui est marqué dans une couleur (par exemple rouge) avec de l'ADN d'un sujet sain amplifié et marqué d'une autre couleur (par exemple vert).  [...] Dans ce cas, un fragment en nombre copie normal apparaitre jaune, un fragment délété apparaitra jaune-vert (plus d'ADN marqué en vert que d'ADN marqué en rouge) et un fragment dupliqué apparaitre jaune orangé (plus d'ADN marqué en rouge que d'ADN marqué en vert).  [...]

Test ELISA ??

Ensuite, on applique l'anticorps I, les substances à tester, puis l'anticorps II marqué. Enfin, on mesure la DO. Ceci est assez résumé, mais cette technique ressemble au principe de l'Elisa. Pouvez vous me dire de quelle technique il s'agit svp, et si c'est de l'Elisa de quel type.  [...] On incube et on fait un lavage, on ajoute un 2 eme anticorps marqué donc anticorps anti anticorps marqué. Incubation lavage. On ajout des substrat coloré, et ceux ci vont réagir avec l'enzyme on obtiendra un produit coloré, qu on mesura la densité optique.  [...]

Test ELISA

une question sur le test ELISA dit indirect. pourquoi passe t-on par un anticorps secondaire marqué, au lieu de marquer directement l'anticorps primaire.  [...] Mieux vaut avoir des anticorps anti souris couplés à ton marqueur. Tu les garde en stock et tu les utilise indifferament de l'anticorps primaire tant qu'il est de souris. Donc plus besoin de bidouiller ton anticorps precieux.  [...]

[Biochimie] Marquage TUNEL!

2- Pourquoi rajouté le DAPI (à part le fait qu'il marque l'ADN, sachant que notre ADN est sensé être marqué par le fluorochrome).  [...] 1) on marque les extrémités des ADN, produites par clivage lors de l'apoptose. La DNAse sert en général de contrôle positif, pour générer des fragments d'ADN qui seront donc marqués.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marquage par Ac-FITC : du solide ?

Après la période d'incubation, j'aurais ajouté un anticorps anti-[protéine récherchée]. puis un second anticorps marqué au FITC et dirigé contre l'anticorps du complexe précédent.  [...] Lors d'une assistance à une thèse sur le biofilm marqué au FITC, on ne faisait que 3 lavages consécutives après 2h d'incubation et 22h d'incubation, lavage au PBS, donc je ne vois pas le problème si tu souhaite éliminer l'excès d'anticorps par ce moyen (enfin on utilisais des lectines nous, pas des anticorps ^^).  [...]

[Biotechnologie] Test immuno-enzymatique... ELISA

On ajoute un deuxième anticorps qui se lie spécifiquement au premier anticorps. Le deuxième anticorps est marqué par un produit fluorescent, une espèce radioactive,... On peut aussi lui attacher une enzyme qui transforme un substrat (la molécule qu'on lui donne) en un produit détectable.  [...] On met en évidence l'anticorps marqué. Si on le détecte, la protéine est présente. Sinon, elle ne l'est pas. Dans le cas où on a attaché une enzyme au deuxième anticorps, on ajoute le substrat pour voir si la réaction se fait, et ainsi vérifier que l'enzyme est présente.  [...]

[Biologie Moléculaire] Un anticorps marqué par un fluorochrome peut-il se fixer à un acide nucléique?

J'ai une petite question... est-il possible d'utiliser des anticorps marqués par un fluorochrome pour détecter la présence d'ARN et d'ADN au sein d'une cellule.  [...] Je débute en bio mol et je me demande si un anticorps n'est pas trop gros pour pouvoir se fixer à un acide nucléique... j'ai entendu parler des puces à ADN mais je ne crois pas qu'il s'agit d'anticorps.  [...]

[Immunologie] Différence entre la technique ELISA indirect et direct (sandwich)

Dans le cas de l'ELISA direct, tu 'coates' les puits directement avec ton antigène (Ag) d'intérêt et tu le détectes avec un anticorps (Ac) marqué. Cette méthode est donc plus chère puisqu'il faut que ton anticorps spécifique soit marqué. En gros, tu détectes la présence du virus.  [...] Dans le cas de l'ELISA indirect, tu cherches à doser les Ac dirigés contre le virus EBOLA donc tu cherches à déterminer si la personne a réalisé une réaction immunitaire contre EBOLA et donc tu détectes de façon indirecte la présence du virus. Cette méthode indirecte bien que plus longue (3 acteurs qui entrent en jeu) est plus sensible dû à l'amplification du signal et est moins chère et plus flexible grâce à l'utilisation d'un anticorps secondaire marqué.  [...]

[Biologie Cellulaire] Demande d'explication de résultat d'expérience

On mélange en quantité egale de l'ADN du bactériophage T4 marqué avec de l'azote 15, et de l'ADN froid du bactériophage T4. Le melange est chauffé a 95°c jusqua dénaturation complete, refroidi puis analysé par uultracentrifugation a lequilibre en chlorure de Césium ( centrifugation durant 48h a vitesse élevée ). 3 pics sont observé dans ces conditions.  [...] Si on fais la même expérience cad melange ADN bacteriophage T4 marqué a lazote 15 et ADN froid du bactériophage T5, 2 pics seulement sont observés.  [...]