• Forum - Marquage, Protéines, Chaîne

[Biologie Moléculaire] His-tagged protein ?

Pouvez-vous s'il-vous-plaît m'indiquer en quoi consiste la méthode de marquage de protéines avec une chaîne d'histidine.  [...] On ajoute 6 histidine en début ou en fin de protéines. Ces molécules ont une grande affinité pour le cobalt ou le nickel. Ca simplifie les protocoles de purification en ce sens que l'on est plus obligé d'utiliser un protocole spécifique de la protéine d'intérêt.  [...]

Lactate. Comment se déplace-t-il dans le corps humain?

Ceci dit, cela ne devrait pas changer pas grand chose. À partir du moment où il y a des cellules qui absorbent le lactate du sang (foie, muscles bien oxygénés,...) il y aura circulation du lactate depuis les muscles mal oxygénés (et donc qui éjectent du lactate) et celles qui l'absorbent, qu'elles soient proches ou loin (par la circulation sanguine pour le second cas).   [...] C'est frappant sur un marquage succinate deshydrogénase (protéine de la chaine respiratoire, marqueur des fibres lentes) exemple ici.  [...]

[Biochimie] Loaclisation cellulaire de proteines Pulse Chasse

[Biochimie] Loaclisation cellulaire de proteines Pulse Chasse.  [...] Le marquage doit être court afin de ne rendre radioactives que les protéines synthétisées pendant le pulse. Si le marquage était plus long, les protéines nouvellement synthétisées pendant le chase seraient également radioactives et cela ne permettrait pas de visualiser le transport des protéines au court du temps.  [...]

[Biologie Cellulaire] Marquage GFP

si tu couples ta protéine d'intéret à la GFP, tu peux la suivre dans la cellule, qd elle se ballade du noyau au cytoplasme par exemple.  [...] Tu n'introduis pas la GFP seule, mais un gène codant une protéine de fusion GFP. Ainsi, ta protéine d'intérêt et la GFP étant lié covalement, en suivant la localisation de la GFP tu suivras la localisation de ta protéine d'intérêt.  [...]

asepar...ou qq chose comme ça?

Certaine protéines sont ainsi régulées par marquage à l'ubiquitine (souvent poly-ubiquitine) puis dégradation lysosomiale.  [...] Je crois que c'est le cas pour la dégradation de protéines codant pour des récepteurs de surface qui après invagination sont marquées à l'ubiquitine, puis intègre le lysosome oû elles seront dégradées.  [...]

[Biologie Moléculaire] Quel est le rôle du protéasome ?

Lorsque les chaperones ne parviennent pas a redonner leurs conformations natives a des proteines denaturees, elles dirigent ces proteines vers la polyubiquitinylation soit en recrutant des enzymes E3 soit parce qu'elles ont elles-meme une activite E3-like (E3 est une famille d'enzymes qui permet la specificite du marquage des proteines par l'ubiquitine).  [...] En cas de mutation de ce gene, on pourrait avoir une diminution de la quantite d'ubiquitine disponible dans la cellule et une accumulation de proteines, ce qui conduirait a la maladie... ceci dit, je ne crois pas qu'on ait de preuves formelles du role d'UCH-L1 dans la maladie.  [...]

[Biologie Cellulaire] cytométrie en flux et HSP

les HSP sont des protéines il est donc possible de les marquer spécifiquement (diverses techniques marquage de l'arn, des protéines) avec un fluorochrome, molécule qui envoie un photon de longueur d'onde déterminée après excitation (à une certaine longueur d'onde mais différente de celle d'émisson).  [...] tes cellules ainsi marquées passent dan un tube très fin les unes à la suite des autres ( d'ou le flux) qui est traversé par un faisceau de longueur d'onde correspondant à la longueur d'onde d'excitation de ton fluorophore. une fois excité il y a donc émisson d'un photon, qui est capté de l'autre coté du tube, les cellules qui passent sont comptées seulement si elle sont réactives tu peux donc savoir combien de cellules contiennent des HSP, tu met un autre fluorophore marquant toutes les cellules et tu passe ca dans la machine et tu obtient le nombre total de cellules, tu peut donc faire des rapports, des pourcentages etc.  [...]

[Immunologie] comment doser une proteine ?

-marquage par anticorps dirigés contre tes protéines, avec des anticorps contenant une séquence d'affinité ( affinity tag, je sais pas comment le dire en français).  [...] Lorsque des personnes trouvent la bonne volonté de te répondre, tache d'être courtois et respectueux envers eux, c'est la moindre des choses. Vu l'insolence dont tu as fait preuve envers Astrobax, et en guise d'avertissement, je ferme cette discussion.   [...]

[Zoologie] [zoologie] Monstre Mystère - Page 2

Je ne pense pas que ce soit l'actine ou la myosine qui soit marques, mais plutot une proteine des stries Z du muscle. L'actine ou la myosine devrait remplir les espaces entre les bandes vertes de cette photo. En bleu devrait etre un noyau et en rouge... hum.  [...] Cette image a ete obtenue par marquage fluorescent des divers proteines/compartiments et l'aspect un peu 3D a du etre obtenu par deconvolution de plusieurs images 2D.  [...]

besoin d'aide pour technique direct blot and following immonoprecipitation

Mes connaissance dans le domaine de l'immunoprécipitation et du marquage de protéines sont assez limitées et j'aurais besoin d'aide pour comprendre une manip.  [...] Du coup je ne comprends pas trop comment ça marche et comment interpréter le résultat.   [...]