• Forum - Localisation, Protéines, Anticorps

[Biochimie] Identification et caracterisation de protease

Pour les anticorps, tu ne peux pas t'aider de sa capacité à cliver les protéines virale de fusion pour connaitre un peu comment est sa structure et trouvé un anticorps qui puisse être complémentaire à celui-ci (tu pourrais ainsi vérifier par immunomarquage si cette protéine est bien celle que tu cherche par sa localisation intracellulaire ^^).  [...] Ouais peut etre possible de trouver des anticorps contre ce type de protease...une fois que je saurais a quel type de protease j'ai a faire.  [...]

determiner la localisation subcellulaire d'une proteine végétale

1) Je pense qu'on peut co-transformer avec d'autres proteines dont on connais la localisation subcellulaire, en la fusionnant avec un autre fluorochrome.  [...] Une fois que tu as fait ca si tu as besoin d'une localisation plus précise, alors le mieux est l'immunofluorescence en utilisant des anticorps reconnaissants des protéines présentent spécifiquement dans les différents compartiments.  [...]

[Biologie Moléculaire] Quelle stratégie adopter?

est ce que je dois prendre des cellules hépatiques non transfectées comme temoin pour la localisation il me semble qu'il serait judicieux de faire une immunohistochimie mais est ce que je detecte les 2 proteines dans la meme cellule et ceci avec 2 anticorps différents couplés avec une fluorescence différente.  [...] et comparer la localisation et l'intensité de fluorescence donc cela serait suffisant pour voir si la proteine chimérique modifie les fonctions endogènes selon toi.  [...]

[Biologie Cellulaire] Compter les passages

je travaille actuellement sur des cellules HEK. J'aimerai savoir comment sont comptabilisés les passages Logiquement, on devrait repartir de P0 lorsque l'on décongèle un lot mais je ne suis pas sur que cela marche comme cela - j'ai lu un travail (Luo et coll, 2005) qui parle de l'extinction de certaines protéines avec le nombre de passage.  [...] Si tu as des anticorps dirigés contre ta protéine, tu peux faire une IF pour regarder le % de cellules exprimant ta protéine au cours des passages. Cela te permettra aussi de voir la localisation de ton récepteur qui peut éventuellement varier.  [...]

[Divers] Imagerie par fluorescence - Applications

La fluorescence est un formidable en biologie, et en médecine. C'est une technique en plein développement, elle permet la localisation subcellulaire de protéines,de quantifier l'expression des gènes, de déterminer les interactions prot/prot (FRET), ou encore de déterminer avec précision les signature calcique (apoaequorine, sonde caméléon,  [...] * En anatomie pathologique (réalisation d'une biopsie), l'immunofluorescence directe sert à déceler les dépôts d'immunoglobulines ou des protéines du complément dans les tissus. Ensuite en cancérologie, on peut quantifier l'expression d'oncogènes par cytofluorimétrie.  [...]

l'Actine, ses homologues et l'origine de la polarité

Savez-vous si l'actine chez les eucaryotes est capable d'entraîner une polarité dans la localisation de certaines protéines pouvant ainsi mener à une division asymétrique De ce fait, l'actine pourrait elle êre un argument pour dire que l'une des origines de la différenciation réside chez les procaryotes.  [...] Oui on connait des mécanismes de division asymétrique notamment chez une protéobactérie C.crescentus. Si on déplète en actine cette cellule, on observe une perte de la forme, mais aussi de la localisation à un pôle de certaines protéines, impliquées dans la formation notamment des pili ou d'un pied d'adhésion.  [...]

[Immunologie] Différence entre idiotope, épitope et paratope

étant donné que les anticorps sont des glycoprotéines, ils peuvent se comporter eux-mêmes comme de puissant immunogènes pour induire une réponse anticorps.  [...] les déterminants antigéniques (= épitopes) se classent en trois catégories selon leur localisation dans des régions caractéristiques de l'anticorps.  [...]

[Biochimie] Question sur les protéines...

Des protéines chimériques, on sait faire aussi. Pour info, le prix nobel 2008 de chimie a été donné aux chercheurs qui ont découvert la GFP, une protéine fluorescente que l'on greffe très souvent à d'autres protéines afin d'étudier par exemple leur localisation cellulaire.  [...] Tu dois bien connaître quelques protéines et leurs rôles respectifs. Commence déjà par nous donner tes idées d'organisation du devoir, on ne le fera pas à ta place.  [...]

evaluation de l'immunogénicité

Eventuellement pour la localisation, tu produis des anticorps et tu fais une immunofluorescence sur des cellules d'interêts.  [...] Donc tu produis ta protéine dans le tabac, tu la purifies, tu l'injectes à une souris, et tu regardes ce qu'il se passe (tu peux par exemple titrer les anticorps contre cette protéine) et surtout, tu compares ces résultats avec ceux de la protéine directement produite par M.bovis.  [...]

[Biochimie] Lien entre appareil de golgi et mitochondries

Ce lien saura mieux t'expliquer la situation www.biologieenflash.net/animation.phpref=bio-0053-2 notant que l'espace rose est l'espace intermembranaire et l'espace marron est la matrice mitochondriale.   [...] Les enzymes mitochondriales sont synthétisées par des ribosomes cytoplasmiques. Ces protéines à destination de la mitochondrie possèdent une séquence de localisation mitochondriale. Elles sont donc prises en charge par des protéines qui les accompagnent à la mitochondrie.  [...]