• Forum - Intérêt, ADN, Forme

[Biologie Moléculaire] ADN Hélicase

Petite question. Qu'elle est l'intérêt d'une ADN Hélicase à agir sur de l'ADN monocaténaire Quand l'ADN est bicaténaire je comprends bien puis ce que c'est une contrainte le fait qu'il soit sous forme double brin mais là on est sous forme simple brin, l'ADN Hélicase n'a aucune utilité selon moi mais dans mon cours et sur des sites internet ils disent que l'ADN Hélicase agit également lors de la réplication d'ADN monocaténaire, quelqu'un pourrait m'expliquer.  [...]

[Biologie Moléculaire] l'hybridation d'une sonde

Une sonde est une séquence d'acides nucléiques qui est complémentaire à un brin d'ADN mono-caténaire que tu souhaites marquer. C'est à dire que les bases nucléiques de la sonde et celle de ton ADN d'intérêt sont complémentaires. (par exemple, chaque fois qu'il y aura un C dans ton ADN, il y aura un G dans ta sonde, et inversement...).  [...] Cependant, si tu as marqué la sonde sonde, par exemple à l'aide d'une molécule fluorescente, tu peux alors la visualiser (avec un microscope à fluorescence par exemple). Par ailleurs, étant donné que la sonde est fixée sur ton ADN d'intérêt, le fait de visualiser ta sonde te permet de visualiser ton ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Lyse cellulaire

J'ai trouvé une solution en fait. créer un mutant de notre protéine avec uniquement le domaine qui m'intéresse plus quelques acides aminés pour le lier à un anticorps sur une colonne. Reste à faire passer les lipides dans la colonne et récupérer le complexe. Je pense que ça peut le faire.  [...] non, un crosslinker = un produit qui fait des liaisons covalentes entre tous les trucs qui passent à sa portée. C'est utilisé pour fixer des liaisons labiles le temps de purifier une interaction. Par exemple on l'utilise en ChIP pour fixer les protéines sur l'ADN, avant de lyser les cellules et de récupérer l'ADN lié aux protéines d'intérêt (formaldehyde par exemple).  [...]

[Biotechnologie] Principe de la PCR

d'exemplaires un fragment d'ADN particulier (la séquence d'intérêt, ADN d'intérêt ou ADN cible) à partir d'un extrait d'ADN (ADN matriciel). En.  [...] Pour la dénaturation et l'hybridation des amorces, 30 secondes suffisent généralement. Pour l'élongation, il faut compter 1 minute par kilobase d'ADN d'intérêt et 2 minutes par kilobase pour le cycle final d'élongation. Le nombre de cycles, généralement.  [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

L'ADN de sperme de saumon permet, pendant le southern blot (et d'autres techniques comme le gel shift (EMSA)), d'empêcher les interactions non spécifiques avec la sonde (un peu comme la BSA ou le lait dans les western blot ou en immunohistochimie).  [...] le but de la sonde est de detecter l'adn d'interet, alors pourquoi la préhybridation vu qu'elle va s'hybrider avec notre adn recherché.  [...]

[Biochimie] modification génétique

techniques de recombinaison de l'ADN impliquant la formation de nouvelles combinaisons de matériel génétique par l'insertion de molécules d'acide nucléique, produites de n'importe quelle façon hors d'un organisme, à l'intérieur de tout virus, plasmide bactérien ou autre système vecteur et leur incorporation dans un organisme hôte à l'intérieur duquel elles n'apparaissent pas de façon naturelle, mais où elles peuvent se multiplier de façon continue.  [...] Modifier génétiquement une plante est un peu plus complexe, cela demande soit d'infecter la plante par une agrobactérium contenant le gène d'intérêt, soit former un protoplaste (cellule végétale sans paroi) pour transfecter un gène ou encore tirer à l'aide d'un canon biolistique des billes d'or entourées d'ADN.  [...]

Grippe Mexicaine (grippe A-H1N1), vos questions. - Page 23

Le principal intérêt du Tamiflu, c'est qu'il permet trait de diminuer les risques de développer une forme grave de la grippe A.  [...] -Pour les formes graves chez le bien portant, il y en a aussi avec la grippe saisonnière et on ne fait le même cinéma que pour la A. Pourquoi.  [...]

Random priming

Est-ce que les techniques de random priming peuvent ou non être utilisées à des fins de sélection d'un gène d'intérêt à partir d'une banque d'ADN génomique (en pratique j'entends, car n'étant pas encore dans le milieu de la recherche, je ne sais pas quelles techniques sont les plus utilisées et pour quoi parmi toutes celles vues en cours).  [...] J'ai bien compris le processus permettant d'obtenir des sondes marquées capables de s'hybrider à un ADN donné. Ce que je ne sais pas, c'est comment ces sondes peuvent s'hybrider spécifiquement à une gène d'intéret de séquence inconnue Après réfléxion, j'en viens même à me demander si c'est seulement possible via cette technique (et donc ce qu'on utilises en pratique pour faire ça).  [...]

Intégration dans un plasmide

L'intégration de séquence d'intéret ( un ou plusieurs gènes ) se fait par technique d'ADN recombinant. En gros, tu vas utiliser des endonucléases ( ou enzymes de restriction) qui font créer des extrémitées cohésives ( pouvant être ligasé par une ADN ligase ) sur ta séquence d'intérêt et sur ton vecteur plasmidique.  [...] Non, c'est pas systematique. Ca depend de la qualité de tes digestions, de la taille de ton vecteur et de ton insert. Par contre, ce genre de construction se fait in vitro. Tu transformes ensuite la bacterie par ton plasmide. Pour integrer un fragment d'ADN dans un plasmide deja dans une cellule, je dirais que tu ne peux le faire que par recombinaison homologue, mais c'est bcp plus compliqué et j'ai jamais entendu d'une telle manip pour modiifier des plamisdes.  [...]

transgenèse

Vous savez également comment introduire un gène d'intérêt dans un vecteur désarmé, ou de l'ADN exogène dans un génome chloroplastique.  [...] Seules sont conservées les séquences bordantes de l'ADN T, indispensables pour le transfert, qui encadrent la construction génétique que l'on souhaite intégrer dans la plante (un gène d'intérêt accompagné généralement d'un (ou de) gènes permettant la sélection des cellules transformées).  [...]