• Forum - Gamme, Concentration, Solution, Protéine

[Biochimie] Absorbance

En gros je fais une gamme étalon, de protéine en solution ( juste de l'eau distillée ) de concentration connue. Du coup, ben je soustrais l'absorbance de mes tubes de protéine avec l'absorbance de l'essaie avec l'eau. La pas de souci.  [...] Puis après, je regarde l'absorbance de mes tubes de protéines avec du tampon, sans eau distillée ( du coup je soustrais l'absorbance du tampon. Et de l'essaie à blanc avec l'eau non ).  [...]

[Biotechnologie] méthode de Bradford

Et si j'ai bien compris la gamme de sérumalbumine bovine prédéfinie va réagir avec le Bradford qui aura une coloration de plus en plus intense plus la concentration sera élevée, en comparant avec notre solution à doser qui elle aussi à réagit avec le bradford et va donner une certaine coloration, on saura donner la concentration en proteine de la solution à doser en fonction de son intensité en bleu Ai-je bien compris.  [...] Le bradford est un réactif, il doit être ajouté dans chaque puits contenant une protéine à doser, que ce soit l'étalon (la BSA) ou la solution à concentration inconnue.  [...]

[Biochimie] dot plot et overlay

Si tu es riche en matériel, tu peux commencer par faire des tests par toi même, par exemple en faisant une gamme de quantité a déposer, puis une gamme de concentration de ta solution de protéine, sans oublier les contrôles adéquats.  [...] je compte faire une gamme de concentration des deux protéines mais avant tout je dois trouver LE COMMENT de la technique.  [...]

Western Blot et coomassie

Pour moi la coloration coomassie va me permettre d'estimer la concentration de ma protéine en me référant aux puits ou j'ai déposé ma gamme de concentration connue.  [...] merci pour votre réponse. Le but était d'estimer la concentration de ma protéine. j'ai noté qu'on faisait un WB pour voir si la protéine était dégradée, est ce vrai.  [...]

Test ELISA

J'ai réalisé un test ELISA en TP afin de déterminer la concentration d'une protéine dans un échantillon. Afin que ce test soit quantitatif, j'ai réalisé une gamme de concentration. Après mesure de l'absorbance, j'obtiens des résultats aberrants qui ne sont pas interprétables (à la fois pour ma gamme de concentration et pour mon échantillon).  [...] C'est difficile de dire ça à priori pour les échantillons que tu testes vu que t'es pas sensé connaître la concentration, mais si ta gamme à foirée il y a un souci technique, qui peut venir de plein de choses différentes. coating mal réalisé, dilution ratées (en général pour la gamme on fait des dilutions 1/2 en cascade donc pour se planter faut quand même y mettre du sien.  [...]

[Biologie Cellulaire] Toxicité d'un inhibiteur de caspase 3

Les données du constructeurs ne parlent pas de toxicité du produit ni d'une posologie en particulier. Ils préconisent seulement une concentration (de 1000X à 5000x).  [...] Tu devrais peut-être essayer de l'utiliser à concentration finale 1000x inférieure à celle de cette solution-mère, voir même tenter une gamme de 1000 en 1000 depuis 1000x à 5000x pour voir laquelle convient le mieux à ton type cellulaire.  [...]

Western blot- serum humain

Ma stratégie est. d'incuber dans un premier temps la membrane avec le serum humain puis d'incuber avec les IgG couplé à la PA qui me servira à la révélation. Seulement je ne sais pas comment préparer et à quelle concentration utiliser les plasma humain. Quelqu'un pourrait t-il m'aider pour la préparation des plasmas.  [...] Ta seule solution est de faire une gamme de concentration et de regarder laquelle fonctionne sur ton antigène. Vu que tu n'es pas sur que les anticorps du sérum réconnaissent l'antigène, l'idéal serait d'avoir un controle positif.  [...]

[Divers] Problème de comparaison de résultats dosage protéique

Lors du dosage BCA (dosage colorimétrique avec une gamme étalon) j'ai des mg/mL de solution ressolubilisé tandis que pour le Kjeldahl, j'ai des % de protéine du produit fini.  [...] J'aimerais savoir comment je pourrais transformer ce pourcentage en concentration ou l'inverse afin de pouvoir comparer.  [...]

[Biochimie] gamme étalon

voila un petit probleme que je n'arrive pas a résoudre. on me demande en préparation de TP de faire une gamme étalon d'une solution X. je dois calculer les volumes d'eau et de solution de glucose a 100mg.L-1 préalablement préparée à verser dans 11 tubes pour obtenir une gamme de concentration allant de 0 a 100 mg.L.  [...] dans le premier tube (tube 0), il y a 0 de glucose et 0,5 d'eau la concentration est donc de 0 (facile u_u ) le truc c'est que je ne sais pas comment répartir les différentes quantités de glucose et d'eau pour les autres tubes.  [...]

[Biochimie] Calcul vitesse pour une étude enzymatique (Biochimie)

Au début de tp on a fait une gamme de dilution de trypsine pour déterminer la concentration optimale. je trouve qu'elle est optimale quand la trypsine est diluée au 1/2. (la solution mère de trypsine est à 1mg/mL).  [...] La concentration n'apparaît pas dans ma formule finale mais je me demande si, comme elle est diluée au demi, il ne faut pas au début changer la formule en v = Cx2 / temps.  [...]