• Forum - Fragment, ADN, Visualisation, Coloration

PCR : Réaction en Chaîne par Polymérase

Merci pour votre réponse. Mais ce que je ne comprends pas, c'est qu'après la PCR on aura beaucoup de fragments d'ADN, mais nous servent-ils tous puisque un seul suffit à détecter s'il y a mutation ou non.  [...] Un seul fragment d'ADN n'est absolument pas détectable si on effectue une visualisation sur gel après coloration avec du syBRgreen. Il y a nécessité d'avoir une forte amplification du fragment pour qu'il soit bien détectable.  [...]

[Divers] Système de visualisation d'ADN en gel, fluorescence et UV!

Système de visualisation d'ADN en gel, fluorescence et UV.  [...]

Kit de dosage des acides nucléiques?

C'est un peu abbérant un laboratoire sans spectro (apres je sais pas quel est la spécialisation de ton laboratoire mais le spectro est utilisé quand même dans pas mal de manip').   [...] Si c'est à la louche fais une comparaison sur gel d'agarose aprés migration, coloration BET et visualisation sous UV... Tu peux comparer à l'oeil ou avec un logiciel d'acquisition. Encore faut il avoir des témoins corrects.  [...]

Comment coder un rétro Virus?, Ou trouver de l'arn, creation d'un rétro virus et le coder HELP !

Je suis pas spécialiste en rétrovirus mais ça a l'air de dépendre de l'hôte et de sa capacité à réguler la virémie soit via son système immunitaire, soit en ralentissant la prolifération virale en agissant sur plusieurs points du cycle réplicatif du virus.   [...] 2) avoir des ailes c'est bien mais s'en servir pour voler c'est autre chose. Un humain est beaucoup plus lourd que le plus lourd des oiseaux. Et de plus les oiseaux ont énormément d'adaptations au vol, qui ne concernent pas toutes l'aile. leus os sont creux et pneumatisés, le coeur, les poumons, tout est affecté par l'adaptation au vol.   [...]

[Microbiologie] l'examen microscopique direct

- quelle est l'intéret de l'examen microscopique direct ( l'etat frais, coloration de Gram, coloration MGG et bleu de methylene) dans le diagnostic bacteriologique.  [...] Le coloration de Gram, si elle permet une meilleure visualisation que l'état frais permet surtout de déterminer la nature de la paroi bactérienne (Gram+ ou Gram-).  [...]

[Biologie Cellulaire] Cytoenzymologie

Bonjour, je voudrais savoir à quoi sert la cytoenzymologie.   [...] Ce sont des méthodes de détection des enzymes in situ qui les révèlent par leur activité et non pas par leur présence. La visualisation permet de préciser la localisation intracellulaire de l'enzyme. soit directement (oxydo-reductases), soit indirectement par coloration (hydrolases).  [...]

[Biologie Moléculaire] Design primers pour PCR sur cDNA

OK merci pour votre réponse si rapide, je ne fais donc pas de changement au niveau de la méthode de design. J'utilise le logiciel Primer3 car c'est le premier dont on m'a parlé, je le maitrise bien à présent donc je souhaite continuer avec celui-là, il est très simple d'utilisation.   [...] Salut, je veux lancer une PCR pour amplifier un fragment d'env 400 bp. (avec du M13) Est-ce trop long quels sont les risques à craindre C'est pour faire ensuite du séquençage. Je ferai ma visualisation à l'aide d'un Multina ( http.//www.shimadzu.com/an/lifescien.  [...]

[Biologie Moléculaire] Résultats PCR

Je viens de faire une PCR et le résultat après l'éléctrophorèse me laisse perplexe, ceratins me disent qu'il n'y a pas eu d'amplification et que c'est de l'ADN génomique, d'autres qu'il y'a eu amplification mais qu'elle est non spécifique et d'autres me disent qu'il s'agit d'ARN dégradé (pas très convaincue) ou encore que ma concentration d'ADN est trop élevée et qu'il faut l'abaisser (j'ai travaillé avec 10 ng/µl).  [...] -je manipule de l'ADN génomique qui a été purifié et visualisé dans un laboratoire très performant où toutes les conditions étaient optomisées...ce n'est pas le cas de mon laboratoire notez que le smear n'est pas apparu lors de la visualisation de mon ADN (dans le labo d'accueil) et que les bandes étaient très claires.  [...]

Expériences en génétique…

Il n'y a pas besoin de connaitre la taille du gène (d'ailleur tu fais migrer de l'ADN ou de l'ARN et pas forcément un gène) car tu fais migrer un marqueur de taille à coté. On utilise l'électrophorèse par exemple pour contrôler les manips que l'on fait. Par exemple si tu veux voir si un gène que tu as voulu insérer est bien présent dans un plasmide, tu peux faire une restriction en coupant dans le gène hypothètique et tu calcules la taille des fragments obtenus en supposant que ton gène est présent.  [...] En ce qui concerne ta remarque sur les smires, je crois que là encore il y a confusion, un smire est une visualisation de la dégradation par les DNases de ton ADN que tu retrouves en bas de ton gel.  [...]

[Biologie Moléculaire] tampon de charge

Le plus critique dans ce genre de tampon de charge, c'est de s'assurer qu'on n'a pas un colorant qui va gêner la visualisation de nos bandes d'intérêt.  [...] Dans le orange loading 6x il y a déjà du Tris et de l'EDTA...je migre dans du TBE 0.5X, le BET est inclus dans le gel lors de la préparation. La résolution est plutôt très belle.   [...]