• Forum - Extraction, Protéines, Coeur

[Biologie Cellulaire] Extraction de protéine du coeur

Je cherche un protocole pour l'extraction des protéines à partir d'un coeur de rat. Ainsi que quelques détails sur le dosage BCA de Pierce.Merci.  [...] Pour l'extraction, le protocole sera très différent selon que tu souhaites extraire toutes les protéines ou une catégorie seulement... il faudrait plus de précisions.  [...]

IMPORTANT : extraction cytochrome c

Bonjour à tous, nous sommes dans une manip d'extraction de cytochrome c d'un coeur de boeuf. Nous avons déjà nettoyé la solution du reste des protéines à l'aide de sulfate ammonique. Nous avons atteind un pH de 7 d'où nous n'avons pas tocuhé au cytochrome c.  [...] Après centrifugation, nous avons acidifié le surnageantà pH 3.4 à l'aide de TCA. En effet, le cytochrome c oxydé est moins solublé dans le sulfate ammonique et devrait précipiter sous forme de flocons rouges.   [...]

extraction des protéines par le Tris-HCl

Je suis à la recherche du rôle de la concentration du solvant Tris-HCl dans l'extraction des protéines dans le coeur de dinde (un tissu ) j'ai fait une manipulation d'extraction par le Tris-HCl 1M / 2M et 3M et j'ai trouvé les résultats suivantes.  [...] pour appuyer la réponse de vpharmaco. l'extraction de protéines est un truc relativement variable dans la quantité obtenue même avec le même tissu de départ. Avec une mesure par condition et de tels résultats on ne peut absolument rien conclure.  [...]

Méthodes d'extraction et de purification des protéines recombinées

On dit protéine recombinante. Tu auras plus de réponses sur le forum biologie. En attendant. http.//fr.wikipedia.org/wiki/Purification_de_protéines.  [...] tu as deu méthodes d'extractions. non dénaturante (qui permet de maintenir l'activité de l'enzyme), dénaturante (si tu n'as pas besoin de conserver l'activité de la protéine).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction protéines pariétales

=. une extraction de protéines pariétales maison afin de réduire le pool protéique mais qui me donne pas assez de protéines.  [...] J'ai une ou deux idées sous le coude. partir sur des volumes d'extraction + importants et précipiter les protéines au TCA tenter un protocole d'extraction des protéines en pH alcalin.  [...]

[Biologie Moléculaire] Resolubilisation des proteines aprés extraction au trizol

Je suis en stage pour le M1. On travaille sur l'hypophyse de rat et on a fait une technique d'extractin d'ARN et de proteines au trizol. Ensuite les proteines sont mises dans du SDS et stockés à moins 20°C. Sauf que quand on a fait un dosage proteique par la methode de lowry d'où on a obtenu des quantités trés faibles de proteine.  [...] Un autre problème peut être que le SDS induit quelques soucis dans les dosages de protéines par la méthode Lowry. Dans certains kits tu as un produit supplémentaire à inclure dans ta réaction si tes échantillons contiennent du SDS, je saurais pas t'en dire plus vu que j'ai toujours utilisé ce genre de kit en suivant bêtement le protocole fourni.  [...]

[Biologie végétale] Extraction et purification des proteines à partir du fruit de la rosa canina

Extraction et purification des proteines à partir du fruit de la rosa canina.  [...] Je cherche une méthode d'analyse qui me permettra en premier lieu d'extraire et de purifier les protéines totales du fruit de la Rosa canina.  [...]

[Biochimie] extraction protéines membranaires à partir de tissu cérébral congelé (pour étude de co-IPP)

Ensuite j'aimerais faire une co-IPP pour étudier l'interaction entre deux protéines membranaires (la sonication, si présente, ne risque t'elle pas de les séparer sinon, qu'utiliser).  [...] Pour effectuer une co-IP sur des protéines membranaires, je pense qu'il vaut mieux opter pour un détergent doux. Le CHAPS est souvent utiliser pour les co-IP car il est très doux. Un détergent trop fort dénature les protéines et les interactions entre les protéines sont très sensibles à la structure 3D.  [...]

[Biotechnologie] Protocole d'extraction des proteines totales

[Biotechnologie] Protocole d'extraction des proteines totales.  [...] salut, je suis un jeune chercheur tunisien, bref, je cherche un article scientifique contient un protocole d'extraction des proteines totales de tissu vegetales( ex. palmier dattier), tenir compte que je veux faire une electrophorese monodimensionelle, SVP c trooooooop urgent si il ya plus d'articles priere les envoyez-moi sur email.  [...]

[Biochimie] Western blot sur Fractions polysomales

Pour chaque fractions, j'extrais soit les ARN totaux soit les protéines. L'extraction des ARN totaux se passent très bien malgré la présence de sucrose, mais l'extraction des protéines ne me donne pas de résultats satisfaisants.  [...] Il me semble normal qu'avec des extractions utilisant des solvants organiques tu obtiennes un mauvais résultat en western, mais je peux me tromper. S'il reste des traces de solvant, cela peut interférer sur la liaison SDS/protéine.  [...]