• Forum - Extraction, Histones, Compte rendu

principe d'extraction des histones

c'est a propos du principe d'extraction des histones car je dois remettre un compte rendu et j'ai fouiner un peu partout et sans rien trouvé j'ai besoin du principe et non pas du protocol.  [...] on peut peut être avoir un peu de contexte le protocole devrait aider à comprendre le principe.  [...]

[Evolution] Le transformisme aujourd'hui

Je soumets une autre observation sans pour autant la corréler avec ce que je viens de dire. Toute personne qui a fait un rien de biologie sait qu'à la fin de la gâmetogénèse, les histones sont remplacés par les protamines. Ce sont des protéines encore plus basiques que les histones dont l'apport à deux conséquences.  [...] 2. on s'est rendu compte que tous les histones n'étaient pas éliminés. Il reste dans les gamêtes environs 15% du nombre initial d'histones associés à la chromatine. De plus ces histones ne sont pas répartis de manière homogène sur le génome mais dans des spots encore mal compris.  [...]

Diversité des cellules mais ADN identique

On a regardé au niveau proteique avec une attention soutenue vers les facteurs proteiques. Aujourd'hui on prend la mesure du role important joué par les ARNs, on se rend compte de l'importance des histones.  [...] Alors que l'on avait un joli modèle avec des promoteurs qui permettaient le recrutement des facteurs de transcription qui eux même permettaient le recrutement ARN polymerases et la transcription des gènes on voit maintenant que c'est plus compliqué que cela.  [...]

[Biochimie] Protocole extraction des histones

J'ai une extraction nucléaire à faire demain, je voulais faire un extraction acide, mais je viens de me rendre compte que je ne n'ai pas de TCA à 100 %, mais du TCA à 20%.  [...] Au pire si je trouve pas d'autres protocoles, je vais essayer de faire 1.25V de TCA (x5 en fait) en jouant sur le volume V pour pas qu'il soient trop elevé pour pas trop diluer mes histones et j'augmenterais le temps de centrifugation... Qu'en pensez vous.  [...]

[Divers] bio de la reproduction

Dans les spermatozoïdes, les histones sont remplacés par les protamines qui, à priori, permettent l'organisation hyper-condensé de la chromatine de leur noyau.  [...] Il est intéressant de noter qu'on se rend compte que la distribution des histones restantes n'est pas homogène sur les chromosomes. Il y a des clusters où il n'y a pas de protamines et où il ne reste que des histones. On pense que ceci permet à ces régions d'être immédiatement actives après la fécondation.  [...]

[Génétique] Extraction ADN des queues de souris

Au laboratoire, nous digérions les tissus par la PK (dans un tampon de lyse) avant de procéder à son extraction par le phénol/choloroforme. J'étais surpris de lire qu'ici on propose d'extraire avant de digérer par la PK, cependant, j'ai vu cela dans des expériences de CHIP.  [...] J'imagine que l'idée ici est de digérer les protéines nucléaires insolubles, type histones, avant de procéder à l'extraction finale là encore avec quelque chose comme le phénol/chloroforme.  [...]

[Biologie Moléculaire] Code génétique

Encore un point sur le métabolisme cellulaire (dont croissance et/ou différenciation et apoptose). il est souvent (systématiquement ) résultant d'une concomittence de facteurs physico-chimiques (communications cellulaires, chimiotactisme...). Il y a des actvations de gènes mais aussi des exctinctions de gènes, tout cela avec des boucles de rétro-contrôle positif comme négatif, quantité de cascades.   [...] Et je ne suis pas certain qu'il n'y ait que des facteurs épigénétiques qui entrent en compte dans la condensation/décondensation mais aussi des facteurs simplement génétiques (expression des histones par exemple).  [...]

[Biochimie] extraction protéines membranaires à partir de tissu cérébral congelé (pour étude de co-IPP)

Sinon je compte faire sur ces mêmes homogénats un fractionnement subcellulaire avec tampon sucrose EGTA MgCl2, inhib proteases, j'ai testé en WB, ma fraction cyto est bien pure (pas d'histones), mais la fraction nucléaire est un peu contaminée par les prot cytoplasmiques (actine notamment), mais il paraît que c'est normal. qu'en penses-tu.  [...] 100% d'accord. Après comme tu le dis, délicat dosage extraction - solubilisation - protection. Tu devrais essayer sur des échantillons qui ne sont pas précieux à quelle limite de détergent tu arrives à solubiser ton récepteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] replication

2) l acéthylation des histones permet de rendre l ADN moins serres autours d eux et donc apres de permettre aux facterus de transcription d acceder a l ADN. Apres la replicaiton comment le complexe histone et ADN se reconstitue t il et pour les ADN repliqués les nouveuax histones viennent d ou.  [...] Pour la deuxième question, d'après mes souvenirs, le complexe histone et ADN se reconstitue par l'intervention des histone désacétylases qui peuvent être associé à des répresseurs de la transcription. la répression de la transcription des domaines méthylés de l'ADN pourrait aussi être due au recrutement d'ADN méthylases par des histone désacétylase, mais ceci reste à vérifier.  [...]

[Biologie Moléculaire] Homologues = 2 à 2?

Donc, c'est la double hélice d'ADN. Ensuite, puisque l'ADN ne se balade pas à poil dans la cellule, il y a les histones. Il existe différents niveaux de compaction (cf. la très mignone figure qu'Alegs a collé ci-dessus ).  [...] Aujourd'hui, there is growing evidence, comme on dit dans plein de papiers que le rôle des histones est loin d'être limité à la simple structure. C'est pour cette raison que j'ai parlé d'organisation fonctionnelle parce que selon la position de modification et sa nature (telle lysine acéthylée par exemple) le gène sera exprimé ou pas (c'est grossier, hein ).  [...]