• Forum - Extraction, ADN, ARN

[Biologie Moléculaire] Extraction ADN, ARN et protéines

Je voudrai savoir si quelqu'un connait une téchnique pour réaliser une triple extraction ADN ARN protéines.  [...] je souhaite réaliser une extraction ADN génomique sans kit. Je voudrais savoir si quelqu'un a un protocole qui marche avec une quantité de l'ordre de 50 à 100 ng d'ADN extrait pour faire une PCR ensuite.  [...]

[Biologie Moléculaire] ADN ARN extraction

J'ai un petit problème en TP de biologie moléculaire, c'est lors de l'extraction de l'ADN et de l'ARN. Ma question est. pourquoi l'ADN, à pH basique se retrouve en phase aqueuse, et pourquoi l'ARN se retrouve en phase aqueuse (tous les 2 lors de l'extraction bien entendu).  [...] Attention. pour faire des extractions d'ARN, il faut un phenol acide, et pour l'ADN un phénol tamponné. Si tu prends un phenol acide pour une extraction d'ADN, tu as un rendement très bas, car l'ADN reste dans le phenol et non dans la phase aqueuse.  [...]

[Biologie Moléculaire] solubilité ADN, ARN dans le phénol

En revanche, pour l'extraction d'ADN avec du phénol basique, c'est pas vraiment clair. Des sites comme http.//www.chups.jussieu.fr/polys/bi...Y.Chp.7.3.html disent que l'ARN et l'ADN sont en phase aqueuse (mais dans ce cas, qu'est ce qui élimine l'arn) mais sinon, implicitement, on pense que l'ARN est dans la phase organique (d'où la purification différentiel des acides nucléiques en fonction du pH).  [...] En fait, il faut savoir que les ARN sont sensibles au pH alcalin et en général, l'extraction ADN se fait en phenol/Chloroforme/IAA à pH 8 et nous aurons l'ADN en phase aqueuse avec les ARN endommagés, ce qui ne gêne pas pour certaines analyses mais pas pour d'autres d'où l'action de RNase dans certains cas.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction acides nucléiques totaux

La question que j'ai à poser à la communauté futura science est simple. connaissez-vous une méthodes d'extraction pour les acides nucléiques totaux (extraction ADN + ARN) qui fonctionne chez le végétal.  [...] Je sais que Qiagen offre de bons kits permettant l'extraction d'ADN génomique végétal et d'autres kits permettant l'extraction d'ARN.  [...]

[Biochimie] extraction ADN et ARN

je souhaiterais avoir quelques renseignements au sujet de différentes solutions utilisées pour l'extraction de l'ADN et de l'ARN.  [...] J'aimerais avoir les rôles du tampon citrate-sel, le rôle de l'alcool à 95° sur l'ADN, le rôle du réactif de Dische, le rôle du TCA, de l'acétone, de l'orcétone (quelle différence entre l'orcétone acide et l'orcétone alcoolique) pour l'extraction de l'ARN.  [...]

demande d'infos!!! extraction de l'ADN

Tout dépend pour quoi tu veux réaliser une extraction d'ADN. Je vais essayer de l'expliquer dans le cadre d'une extraction d'ADN pour les bactéries.  [...] - Pour cela, il faut utiliser du phenol pH8 ou 4 (je ne sais plus... l'un est utilisé pour l'extraction d'ARN et l'autre pour l'extraction d'ADN).  [...]

RT PCR quantitative

Dans les 2 cas, je te conseille de préparer soigneusement des ARN ADN-free = après extraction de tes ARN, tu les traites à la DNase. J'utilisais le kit RNeasy de Qiagen (colones) en faisant le traitement à la DNAse (Qiagen) directement sur la colonne pendant l'étape de lavage des ARN.  [...] Comme ça la DNase est eliminée au lavage. Après l'élution tu as des ARN tous propres, sans DNase (problématique pour l'étape de PCR suivante.) et sans ADN génomique qui te donnerait des résultats faussement positifs et sur-estimés.  [...]

[Biologie Moléculaire] biologie moléculaire

Bonsoir, en biologie moléculaire nous avons étudié l'extraction de l'ADN, l'ARN et des plasmides. Bon l'ADN c'est facile mais l'ARN et les plasmides ça n'est pas très claire, j'ai fait des recherches sur le net mais ça ne m'a pas vraiment aidé,si il y en a parmi vous qui aimerait bien m'expliquer comment se font ces 2 extractions, je leur en serais très TRES reconnaissante.  [...] Tu lyse tes cellules avec un réactif acide contenant de l'isothyocyanate de guanidium et du phénol. On fait une séparation par centrifugation avec du chloroforme ou du bromochloropropane. Tu obtiens une phase aqueuse (ARN), une interface et une phase organique.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction ARN

L'extraction phénol/chlorophorme ne permet pas de discriminer les ADN des ARN, quoiqu'il doit exister des protocoles suffisament précis pour optimiser le rendement en ARN.  [...] Le gradient de césium est bien plus précis et à mon avis on peut le faire après l'extraction phénol/chlorophorme, pour augmenter la pureté de sa préparation d'ARN.  [...]

Extraction d'acides nucléiques

J'aurais voulu connaître succinctement les principes généraux (et pas les protocoles..) des méthodes d'extraction de l'ADN plasmidique, ADN totaux, ADN chromosomique, ARN. Parmis les ARN peut on séparer les ARNr, ARNt et ARNm.  [...] Sinon a partir de la solution (extraction à partir de cellule de mammifere, levures etc..) de départ tu transformes des bacteries pour isoler le plasmide.  [...]