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[Biotechnologie] Cibler des cellules cancéreuses

Est-ce que certains seraient au courant des dernieres avancées dans ce domaine. En particulier je me demande s'il est maintenant envisageable de délivrer un médicament ou une molécule thérapeutique (comme un siRNA) directement au sein de cellules cancereuses, limitant ainsi les effets secondaires de ces molécules.  [...] Le principe c'est d'administrer des molécules à des heures précises et à intervalles définis, ces moments correspondants par exemple à une moindre expression de transporteurs d'efflux et à une forte expression de la cible au niveau des cellules tumorales et dans le même temps, à une moindre activité métabolique au niveau des organes sains.  [...]

real time pcr

Si tes gènes constitutifs ont un niveau d'expression de l'ordre de 10 000 copies/ng ARN et que ton gène cible est à 500 copies/ng ARN, l'impact d'une faible contamination d'ADNg ne sera pas le même.  [...] Je te conseille de choisir plutôt un gène d'expression constitutive, par exemple le facteur d'élongation eIF4-A ( j'ai la séquence des oligos chez Arabidopsis thaliana si ça t'intéresse).  [...]

microRNA

Les petits ARN sont une découverte récente. Le phénomène n'est pas encore très bien compris. J'imagine mal par contre la cellule synthétiser un brin d'ARN seulement pour réduire sa production d'une protéine... Il serait plus logique de seulement atténuer l'expression du gène.  [...] Et si, les microRNA inhibent aussi l'expression des protéines endogènes, soit en inhibant la traduction soit en provoquant la destruction du mRNA cible, c'est un moyen de contrôle de l'expression des gènes (au niveau de la protéine) autrement qu'au niveau transcriptionel.  [...]

[Immunologie] immunité innée (incompréhension)

.. Enfin je comprends pas comment un macrophage ou un cellule dendritique intercepte directement une molécule du non-soi, pour ma part je suppose que c'est le complexe majeur d'histocompatibilité qui joue un rôle important a ce niveau là merci pour vos futures réponses.  [...] L'expression n'ont pas de cible spécifique ne veut pas dire n'ont pas de cible. Les cellules de l'immunité innée reconnaissent des motifs non-spécifiques (certaines molécules de l'environnement, molécules communes à plusieurs pathogènes (PAMP)). Prenons un exemple.  [...]

[Biologie Moléculaire] Etapes de mise au point qPCR - gène peu exprimé

J'ai passé en qPCR tous mes couples d'amorces parallèlement à mes 2 gènes housekeeping préférés, sur des ADNc de cellules qui surexpriment mon gène en faisant des gamme de dilution de mes ADNc de 10-1 à 10-5. Grosse déception, seuls 2 couples sur les 6 designés ont eu une courbe de fusion acceptable, et une efficacité correcte.  [...] Pour ce qui est le niveau d'expression faible, vous pourriez envisager un priming en introduisant dans votre réaction de RT les amorces pour votre cible.  [...]

[Génétique] thérapie par cellules souches

Des essais ont été fait sur des souris présentant une neurodégénérescence. on leur a injecté des précurseurs de neurones pour restaurer le tissu nerveux. Le problème est qu'elle ont développé des tératomes, c'est à dire des cancers de type embryonnaire, l'un des effets secondaires classiques des cellules souches.  [...] Une autre stratégie qui est en cours de développement consiste à dynamiser les cellules souches en provoquant leur sortie d'un tissu donné pour qu'elles aillent vers un tissu cible dégénéré. C'est le cas des cellules souches mésenchymateuses présentes au niveau de la moelle épinière.  [...]

[Immunologie] Cmh

Le CMH1 existe sur la surface de l'ensemble des cellules qui ont un noyau et le CMH2 sur la surface de quelques cellules immunitaires. En cas d'une cellule somatique cancéreuse, le complexe CMH1-peptide est reconnu par les lymphocytes T8 ( car elle possède un récepteur membranaire spécifique au CMH1), alors ma question comment sera détruite cette cellule cancéreuse ( tant qu'elle ne représente pas un CMH2 sur sa surface membranaire donc le peptide anormal ne sera pas reconnu par les lymphocytes T4 indisponsable à l'activation de la réaction immunitaire).  [...] Il y a aussi les lymphocytes NK capables de reconnaître une diminution de l'expression du CMH I à la surface des cellules cancéreuses, et qui agissent comme les LT8 avec la perforine et le granzyme B pour induire une apoptose de la cellule cible.  [...]

[Biologie Moléculaire] délai de temps entre la transcription et la traduction

en termes d'ARN, j'observe une augmentation d'expression de mon gène cible de manière significative aprés 3 heures de traitement. à quelle moment environ verrais-je une augmentation au niveau protéique.  [...] ce que j'ai constaté après mon WB c'est que l'augmentation d'expression de la protéine cible se fait à 14 h.. légèrement à 6h (trés léger) et plus rien à 24h.  [...]

récepteurs nucléaires et hormones thyroidiennes

dans ce cas il y recrutement de co-represseursssss qui empechent le recrutement de la machinerie transcriptionnelle notamment via une action au niveau de la chromatine (c'est mon kif on s'en fout) = repression.  [...] RXR et TR restent fixés au niveau du T3RE mais TR change de conformation ce qui a pour effet le relargage des corepresseurs et recrutement de coactivateursssss, ouverture de la chromatine, et finalement recrutement de la machinerie transcriptionnelle et donc expression du gène cible direct.  [...]

[Journal club] Extinction de l'expression de gènes par les siRNA : la découverte

, Nature, 1998). l'introduction d'ARN double brin dans les cellules de nématode provoque une extinction efficace et spécifique de l'expression du gène cible. L'ARN interférence était déjà utilisée sur C. elegans ainsi que sur la drosophile pour étudier la fonction de gènes.  [...] .. Je ne sais pas si des puces Affymetrix ont été faites sur des extraits de cellules transfectées avec un siRNA d'intérêt dans d'autres papiers. C'est sans doute trop fort comme approche pour s'assurer que le siRNA ne touche qu'à son gène cible mais c'est la seule que je vois pour avoir une vision globale de l'expression génique.  [...]