• Forum - Expression, Bactéries, Cellules

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques

Je cherche actuellement à extraire les ARN totaux de cellules de bactéries lactiques dans le but de faire de la RT-PCR quantitative (mesure de l'expression d'un gène dans différentes conditions).  [...] On utilise ca pour extraire les ARN totaux de cerveaux de souris et de nos cultures cellulaires (=. et donc pourquoi pas bactéries..).  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de detection de ma protéine par immunofluorescence

j'ai fixé mes cellules avec du méthanol pur froid (-20°C) 48 heures apres la transfection 10 min, à 4°C. J'ai lavé avec du PBS, incubé avec mon anticorps anti-V5 (dilué au 1/200ème) 1h à 37°C, relavé avec du PBS et incubé 1h à 37°C avec mon anticorps anti IgG de souris couplé au FITC.  [...] J'ai une question un peu bête mais as-tu vérifié que ta protéine de fusion NS3-V5 est bien exprimée dans tes cellules après transfection avec un simple SDS-PAGE Je n'ai jamais fait d'expression en cellules eucaryotes mais je suppose que c'est un peu comme pour les bactéries.  [...]

Faire suivre une promoteur eucaryote et procaryote

Dans la construction du plasmide il est précédé du promoteur du CaMV 35S. Cependant pour réaliser la selection des bactéries transformé puis des cellules végétales transformé, on a besoin de l'expression de NPTII à la fois dans les bactéries et les cellules eucaryotes.  [...] Ma question est donc a-t'on pu laisser le promoteur procaryote initiale de NPTII, précédé du promoteur eucaryote 35S pour avoir une expression dans les deux situation, cela fonctionnerai t'il d'avoir deux promoteur qui se suivent Où a t'on simplement fait deux copies du gène NPTII, un avec son promoteur initiale l'autre avec le 35S.  [...]

[Biotechnologie] Une application biotechnologique de la transgénèse

Dans un premier temps, des chercheurs ont réussi à extraire de cellules humaines le gène de l'hormone de croissance puis à l'intégrer dans l'ADN des bactéries de l'espèce Escheridia coli. La production industrielle d'hormone humaine se fait alors dans de grandes cuves où l'on cultive ces bactéries génétiquement modifiées.  [...] 3-tu doit integrer ta construction dans la bacterie amplification de l'expression du gene puis selectionner les cellules qui on reçues la construction.  [...]

plasmide

La fonction du plasmide est la même que celle du chromosome. porter des gènes, qui auront un effet sur la cellule lors de leur expression. Chez les bactéries, il porte souvent des gènes s'exprimant dans des cas particuliers (résistance aux antibiotiques par exemple).  [...] je rajouterais avec vigueur que les plasmides ne sont pas limités aux bactéries... c'est un outil naturellement présent chez la levure, par exemple (simple copie, multi-copie etc) et qu'il peut être intégré dans des cellules de mammifères en culture in vitro.  [...]

[Biologie Cellulaire] Tumeur cancéreuse et non cancéreuse

- expression de la télomérase (normalement essentiellement exprimée par les cellules de la lignée germinale), ce qui lui confère une quasi immortallité comme l'a signalé Piwi, ces cellules sont vraiment des vraies saloperies et c'est un casse-tête pour comprendre ce qui se passe. car résistantes ou pas à la chimio.  [...] De manière générale pour qu'un cancer bénin se transforme en cancer malin il faut de plusieurs mutations ou dérégulation de l'expression de certains gènes encore et en particulier la capacité pour les cellules cancereuses de synthétiser des protéase et autres enzymes leur permettant de se détacher du groupe auquel elles appartiennent et de détruire les cellules de l'organismes.  [...]

La transition épithélio mésenchymateuse des tissus conjonctifs

après une rapide recherche sur internet, on appelle des cellules mésenchymateuses les cellules souches qui sont à sont à l'origine des cellules des tissus conjonctifs, (derme, cartilage, os...). Donc l'expression TEM désigne un retour de cellules épithéliales différentiées vers un état primitif, qui ressemble à des cellules mésenchymateuses.  [...] En l'occurrence, l'expression est bien approprié pour des cellules épithéliales. En ce qui concerne les cellules des tissus conjonctifs, je suppose qu'il s'agit d'un abus de langage puisque ce ne sont pas des cellules épithéliales. Il doit s'agir d'un phénomène similaire de dédifférenciation, qu'on appellerait TEM, par analogie.  [...]

immunité innée

-Classiquement, dans une reaction inflammatoire consecutive a une infection ou un dommage tissulaire, les neutrophiles sont la premiere ligne de defense et sont attires dans les tissus suite a l'expression de cytokines inflammatoires chimioattractantes par les cellules residentes, cellules immunitaires (macrophages, mastocytes) mais aussi d'autres types cellulaires (cellules endotheliales notamment).  [...] Les cytokines inflammatoires et PAMPs entrainent aussi l'expression de molecules d'adhesion par les cellules endotheliales des vaisseaux sanguins, ce qui permet aux cellules inflammatoires de s'accrocher a l'endothelium avant de le traverser pour s'infiltrer dans le tissu.  [...]

[Biologie Cellulaire] Etudier l'expression d'une protéine entre différentes cellules.

Merci de ta réponse, mais le Western blot ne permet pas (ou alors je ne voit pas comment) d'étudier l'expression dans UNE cellule.  [...] Eh bien le principe c'est que tu amplifies tes gènes d'intérêt à partir de l'ARN issu d'une seule cellule. Tu sais donc ce qui se passe dans une cellule et pas dans un homogénat de plusieurs cellules.  [...]

Synonyme

Salut. Ubiquitaire signifie que la nicastrine est exprimée dans tous les types cellulaires, qu'on la retrouve dans tous les types cellulaires pratiquement. ( on parle aussi de gène de ménages ou housekeeping genes pour qualifier les gènes qui codent pour ces molécules ). Voilà j'espère que c'est assez clair.  [...] cela signifie que l'expression de cette proteine a lieue dans toutes les cellules de l'organisme. Il n'y a pas d'expression tissu specifique.  [...]