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[Génétique] Epigénétique et hérédité.

Pour ce qui est des comportements simples (agressivité, anxiété,...) il est probable que la génétique puisse entrer en ligne de compte. Des études sur la souris vont en tout cas dans ce sens. Le cerveau est complexe mais effectivement beaucoup de choses peuvent être expliquées biologiquement.  [...] Un cerveau mort qui n'est par conséquent plus en interaction avec l'environnement ne peut rien révéler. De même pour le mythe de la donnée quantitative. un gros cerveau serait plus intelligent qu'un plus petit. Et que n'a-t-on pas raconté comme sornettes à propos d'une soi-disant différence entre les caractéristiques du cerveau masculin et du cerveau féminin.  [...]

Fixation PFA 4% (ou formol)

Dans le but de réaliser de futures études d'immunohistochimie sur des coupes de cerveau de souris, j'ai fixé les cerveaux de mes souris au PFA 4%, je les ai gardé dans le PFA 4% pendant 24h, puis je les ai mis dans du PBS 0.1M. Comme je n'ai pas pu les couper tout de suite, on m'a conseillé de les remettre dans le PFA 24h (après le PBS) avant de les couper.  [...] Mon problème est que même après les avoir laissé même une semaine dans le PFA une deuxième fois, mes cerveaux de souris sont toujours très mal fixé. Pouvez vous m'aider afin d'optimiser les fixations de mes petits cerveaux.  [...]

[Divers] Ketamine/xylazine

Pour mon projet de recherche j'ai besoin de faire des études immunohistochimiques sur les cerveaux de souris, pour cela je fais d'abord une perfusion transcardiaque. Pourquoi est-ce qu'on utilise le cocktail Ketamine/Xylazine comme anesthésique pour la perfusion et non pas l'isoflurane.  [...] Je ne comprends pas la question. l'isoflurane est un anesthésique volatil, qui n'est pas destiné à être passé en perfusion, il est administré au masque. Donc pas question de l'injecter en intra-cardiaque, ni d'ailleurs où que ce soit.   [...]

[Biochimie] Problème Extraction ARN totaux méthode Trizol-Chloroforme

1/4 de cerveau de souris c'est deja trop à mon avis. Pour un mL de trizol je mettrais quelque chose de la taille d'une tete d'allumette. Sinon pour le chloroforme, je mets 250µL par mL de trizol.  [...] il y a chez qiagen un kit pour préparer pas mal d'ARN à la fois (RNeasy midi kit je crois, jusqu'à 1mg, mais peut être que le RNeasy mini te suffirait), que l'on peut associer à un tampon de lyse spécial pour les tissus riches en lipides comme le cerveau (qiazol lysis reagent).  [...]

[Divers] La Douleur

Une personne qui à la zone du cerveau qui crée la douleur endommagée ne recent pas la douleur. Donc pas de cerveau, pas de douleur. Le chien a un cerveau, il ressentira la douleur. Idem pour le chat, la souris, le rat, le hérisson, le serpent, le poulpe. Mais pas la méduse.  [...] Il y a là aussi des nuances à apporter. La douleur est traitée à la fois par le cerveau reptilien, limbique et par le néocortex. La système limbique, absent entre autres chez les reptiliens si je ne m'abuse, est celui qui colle une émotion à la douleur (c'est la raison pourquoi les êtres n'ayant pas de système limbique n'auraient pas la faculté de percevoir de manière émotive la douleur).  [...]

[Biochimie] anti LC3 humain aucun marquage en Western blot

J'ai essayé avec du cerveau de souris (censé etre un bon temoin positif). Toujours rien à la bonne taille. La technique de western n'est pas en cause car le marquage actine est impecable. Le LC3 est sensible à la degradation, donc les extraits sont realisés en presence d'inhibiteurs de proteases.  [...] Merci LXR, cet ab fonctionne en WB contrairement au premier que j'avais utilsé. J'ai fait un premier essai avec du cerveau de souris et j'ai bien un signal a 16-18kDa. Je ne distingue pas les deux isoformes sur mon premier essai mais je vais augmenter le % de PA.  [...]

Quantification d'ADNc après une reverse transcription

-Sachant que les ARNm ne représentent qu'une petite partie des ARNs totaux (10% chez les eucaryote si je me souviens bien) pourquoi s'attend-t-on à récupérer à la fin de la reverse transcription autant d'ADNc que d'ARN totaux en utilisant des oligoDt.   [...] Merci à tous pour votre aide. j'ai fait mes qPCR en me basant malgré tout sur le dosage des cDNA (comme dirait l'autre, parce qu'on a toujours fait comme ça...) et tous mes gènes sortent avec 1-2Ct de moins. Donc bon, léger gâchis de matériel, mais ça marche.   [...]

[Physiologie] Orientation cortex somatosensoriel rat ou humain

Dans l'étude que j'étudie, ils parlent de cortex somatosensoriel ipsilateral, contralateral et de cortex moteur ipsilateral dans un cerveau de rat. Bon, le terme ipsi et contra ne me dérange pas mais en faite j'ai du mal à savoir où se trouve l'ispilateral et le contralateral sur un cerveau.  [...] Aurais-tu les références de l'article Ipsilatéral signifie du même côté, est-ce que le cerveau de souris est stimulé sur un seul de ses hémisphères ou quelque chose comme ça Il faudrait un référentiel.  [...]

[Biologie Cellulaire] immunofluorescence

J'ai fait un marquage sur des lames paraffine avec le marqueur neuronal NeuN. Cependant j'ai deux marquages qui coexistent sur la lame et qui sont assez différent. Est-ce déjà arrivé à quelqu'un Si oui, quel est le problème Si non, est-ce quelqu'un a une idée.   [...] Ce sont des coupes de cerveau de souris âgées de 6mois à peu près.  [...]

[Biochimie] Combient de different types de cellules dans le cerveau d´un mamifère

Le problème, c'est que chez certains progèniteurs, lorsque j'effectue un immunomarquage de la protéine d'interêt, celle-ci est présente dans des sous -types de cellules que je n'arrive pas à identifier.   [...] Il existe des kits qui permettent de déterminer un nombre limités de sous-types cellulaires (neurone, cellules gliales...) mais ces kit ne m'ont pas aidé à localiser la protéine.   [...]