• Forum - Enzymes, ADN, Fonction

ARN en PCR

les enzymes utilisés pour la PCR (ex. Taq polymerase) sont des enzymes ADN dépendante qui ont pour fonction de synthétiser un nouveau brin à partir d'un brin existant (fonction dans la réplication de l'ADN). Le fait qu'elles soient ADN dépendante signifie qu'elle ne peuvent reconnaitre qu'une matrice d'ADN. L'ADN est double brins.  [...] Le fait qu'elle ne reconnaisse pas l'ARN n'a rien à voir avec la structure double brin mais avec l'absence du 2'-OH de l'ADN. La présence du 2'-OH dans l'ARN conduit à des contraintes stériques et électrostatiques incompatibles avec l'interaction avec la Taq Polymerase.  [...]

Expériences en génétique…

Une fois que tu l'as et que tu l'as coupé tu vas le faire migrer sur un gel d'agarose (+ du bromur d'ethidium) parcouru par un courant electrique. La migration de l'ADN dans le gel va se faire en fonction de la taille. Comme tu as coupé ton gene tu as deux bouts, un grand qui migre lentement et un petit (ton gène en principe) qui migre plus vite.  [...] On utilise alors des enzymes qui coupent l'ADN au niveau de séquences précises et connues (enzymes de restriction). Ensuite on fait migrer l'ADN sur gel d'agarose, en fonction de sa taille, et on le révèle aux UV grâce à une molécule fluorescente, le Bromure d'éthyduim (BET).  [...]

[Biologie Moléculaire] Une question de temps

J'ai une petite question. je souhaite étudier l'activité de certaines enzymes sur la méthylation de l'ADN après stimulation de mes cellules par différents composants (comme ça je pourrais voir la variation d'activité enzymatique en fonction du composant étudié).  [...] Je m'explique. On a des cellules qu'on stimule avec différents composants. Ce qu'on a fait jusqu'à présent c'est quantifier l'ARNm correspondant à des enzymes pour voir si elles sont sur ou sous exprimées après stimulation (là on a utilisé les temps 2h, 4h, 6h, 8h).  [...]

amplification de l'ADN

moi, je veux savoir si, au moment de l'ajout de l'amorce, c'est possible de lier au bout de la sequence une suite de nucleotides qui auraient la meme fonction qu'une amorce...cela reviendrait a coller une suite de nucleotides a un brin d'ADN deja coupe. Etant donne que, in vivo, il existe des enzymes qui ont les proprietes de couper et coller des genes ou suites de nucleotides, je me demande si je peux les utiliser pour enchainer des bouts d'ADN.  [...] Et oui, il est également possible de faire des couper/coller de bouts d'ADN avec des enzymes de restriction. C'est comme ça qu'on fait des vecteurs pour transfecter des gènes dans des cellules. Mais c'est pas non plus de la PCR et on se sert pas d'amorces.  [...]

[Biologie Moléculaire] Réplication de l'ADN chez les eucaryotes SOS

n'a pas la fonction de changeur d'amorces On est bien d'accord que meme si sur les grands axes (bidirectionnelle, antiparallèle, nécessite des amorces, complémentaire, sens 5'3') la réplication de l'ADN des eucar. n'est pas la meme véritablement, surtout au niveau des enzymes utilisées, que celle des procar.  [...] en gros les 2 réplications eucaryote et procaryote sont très similaires que dans leurs grands principes (bidirectionnelle, antiparallèle, sens 5'3', complémentaire, nécessite des amorces) mais pas dans les détails (enzymes pas meme fonction c'est le cas pour ce que j'ai dit précedemment ou encore inexistence des fragments de Kleenow chez les procaryotes. (n'est-ce pas)).  [...]

La mort programmée ?

La mort est, à mon avis, le fait de la simple usure du temps qui emporte toute chose fonctionnant. Nous, mais aussi nos machines à laver ou nos televiseurs. Les pieces s'abiment, les réglages se dereglent et badaboom, tout casse.  [...] Ainsi, la cellule peut suivre 2 programmes distincts. un prog de division si la totalité de l'ADN est conservée ou un prog de mort si l'ADN est trop altéré et que les enzymes de réparation de celui-ci ne parviennent pas à réparer cet ADN altéré. Je citerai juste 2 oncogènes qui sont en dualité fonctionnelle par rapport à l'apoptose, à savoir le gène p53 ( déclachant l'apoptose )et bcl2 ( inhibant l'apoptose ).  [...]

Demi-vie des mitochondries musculaires

Je ne vois pas trop ce que pourrait être un tel entraînement. Une mitochondrie est quelque part assez simple, son fonctionnement dépend bien plus des protéines créées par la machinerie de la cellule hôte (i.e., l'ADN de la cellule hôte, ses ribosomes, transport vers et de la mitochondrie (transport d'un peu tout, métabolites tout comme enzymes et co-enzymes, etc.)) que d'une quelconque évolution propre.  [...] Lors d'une division générique, une cellule fille hérite de l'ADN, d'une partie de la membrane, et d'une partie du cytoplasme (dont ribosomes, et nombreux enzymes) de son unique parent.  [...]

[évolution] Théorie de l'évolution et Régression des organes inutiles - Page 3

En plus de toutes ces improbabilités, l'ADN peut à peine être impliqué dans une réaction en raison de sa forme spirale en double chaîne. Il devient alors impossible de penser que ceci peut être la base de la vie. D'ailleurs, alors que l'ADN ne peut se reproduire qu'avec l'aide de quelques enzymes qui sont en réalité des protéines, la synthèse de ces enzymes peut seulement être réalisée par l'information codée dans l'ADN.  [...] Je tiens juste à préciser qu'il n'est nullement question de mutations dans le darwinisme originel, sa formulation étant antérieure à la découverte de l'ADN et de sa fonction (à ne pas confondre avec celle de sa structure par Watson et Crick, beaucoup plus tardive).  [...]

[Biologie Moléculaire] TP digestion ADN par enzymes de restriction par électrophorèse sur gel d'agarose

J'ai fais une extraction d'ADN puis je l'ai mis en présence d'enzyme de restriction ( c'est le TP basique avec les enzymes BamHI, EcoRI, HindIII) c'est de l'ADN de phage lambda cependant comment savoir si l'ADN a été digéré par élélectrophorèse sur gel d'agarose car j'observe plusieurs fragments mais je comprends pas trop si quelqu'un peut m'éclairer merci infiniment.  [...] De plus comment savoir si mon fragments d'ADN a été digéré J'aurais plusieurs fragments Où est ce en fonction de la migration.  [...]

[Divers] crème à l'ADN : quelle réalité ?

Donc en faite il faut bien lire la pub et bien voir les petites lettres écrite après l'ADN. En faite il y a écrit ADNase ce qui signifie que ce sont des enzymes qui dénature l'ADN ou alors le polymérise c'est à dire le resynthétise. Ce qui est le cas ici. En effet cette crème permet de reformer l'ADN des céllules dit morte en profondeur c'est à dire les céllules les plus profondes qui sont dites morte.  [...] Ca fait peur ce que tu racontes... des enzymes qui resynthetisent l'ADN des cellules pour les relancer dans un cycle de meiose/mitose... ca ressemble a du jurrassic parc ca, ou a un fort agent cancerigene.  [...]