• Forum - Enzymes, Activité, Restriction, Modification

[Biologie Moléculaire] les enzymes de restrictions ...

j'ai lu que c'est 2 enzymes possédent l'activité de restriction et modification au méme temps comment ça ce passe.  [...] Je n'ai pas vraiment compris ta question mais la différence entre ces enzymes est la température et le tampon dans lequel elles agissent. Après je ne sais pas trop si ça répond à ce que tu as demandé.  [...]

Intégration de VIH-1 dans la chromatine: la chute d'un dogme.

de l'éviction de nucléosome). Ce qui est connu c'est qu'effectivement son activité est régulé in vivo surtout au niveau du recrutement du remodeleur sur les sites à remodeler. Ce sont généralement les modifications d'histones (acétylation/méthylation) qui recrutent certaines protéines qui elles même vont recruter le remodeleur.  [...] Nous in vitro l'activité on la contrôle par un test simple d'accessibilité aux enzymes de restriction. Le phénotype qu'on observe est dépendant de l'activité de SWI/SNF (on le voit pas en absence d'ATP, ni avec d'autres complexes de remodelage).  [...]

Enzymes de restriction

Ici on parle un peu du même système qu'avant, mais au niveau du phage. Lorqu'un phage infecte une bactérie, il veut éviter qu'un autre phage infecte cette meme bactérie (coinfection) pour cela il utilise le système de restriction/modification. Ainsi l'ADN du deuxième phage entré sera clivé s'il n'a pas les bonnes modifications.  [...] ça grâce à l'activité des enzymes de modifications qui fait la méthylation au nivaux de ces sites de restriction c'est une mécanisme de protection contre l'autorestriction qu'il possèdent les microorganismes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Protocole digestion

Ben disons que la restriction ca peut prendre la tête, les enzymes qui ne coupent pas, les enzymes qui ne sont pas compatibles, faire du séquentiel. La chiotte quoi.  [...] derniere chose, n'oublie pas qu'il ne faut pas depasser 10% de ton volume total en enzyme de restriction. Sinon le glycerol qu'elles contiennent fini par totalement perturbé ta digestion (inhibition, activité star etc...).  [...]

Doc / bouquin cours [Bio Mol]

-. modification enzymatique de l'adn (adn polymérase enzyme restriction...).  [...] J'ai bien consulté la documentation proposée via ce forum mais les information sont assez succintes. On trouve des info en cherchant via google mais j'aimera bien avoir un seul site ou un seul ouvrage traitant de tous ces sujets.   [...]

[Microbiologie] Passage dans le noyau de l'ADN ou ARN viral. - Page 2

C'est exact, on ne sait pas très bien qui des virus ou des cellules ont inventé ces systèmes de restriction modification (RM) les premiers, on pourrait même alternativement penser à plusieur invention indépendante. Ce qui est interressant c'est que certains virus Eucaryotes double brin ADN (ex.  [...] Oui je suis d'accords mais je parlais dans ce fil des systèmes de restriction/modification utilisé par les organismes pour se défendre contre des acides nucléïques exogènes (ex. virus).  [...]

[Biochimie] Enzymes de restriction pour détecter les mutations

Dans la correction seule l'enzyme 4 (CTAG) est valable.. comment ca se fait... normalement l'enz 1, 3, 4 et 5 peuvent etre utilisé (selon moi ) etant donné qu'on a GAG ou TAG dans la sequence de l'enzyme.  [...] Il me semble voir la confusion que tu as faite. ATTENTION. il faut que tu prennes en compte la séquence de coupure de l'enzyme EN ENTIER. Ce sont des séquences spécifiques que reconnaissent ces enzymes. Un alignement GAG ou TAG ne suffit pas pour ces enzymes.  [...]

[Microbiologie] chloroforme dans la restriction/modification

[Microbiologie] chloroforme dans la restriction/modification.  [...] bonjour, dans un protocole de restriction-modification, quel est le rôle du chloroforme ajouté au prélevement d'un aliquot de culture.  [...]

[Biochimie] Preparation et analyse de plasmides

Apres on a utiliser les des enzymes de restriction HINd3 et ECOR1, si j'ai bien compris ces enzymes vont decouper l'ADN plasmidique en plusieurs parties, je me trompe.  [...] donc, avant digestion, on regarde la tête de l'ADN *non digéré* sur gel. Après digestion, on compare. si notre ADN a la même tête, c'est FAIL. si on a des bandes qui correspondent à ce qu'on a calculé d'après les positions des sites de restrictions (les regexp), c'est PASS.  [...]

[Biologie Moléculaire] précipitation de l'ADN diminution de la taille de mon fragment!!!

je digère un vecteur d'environ 6000pb avec une enzyme de restriction qui coupe une seule fois dans ce vecteur. je vérifie ma digestion sur gel d'agarose...une belle bande à 6000pb. je décide de précipiter (avec de l'éthanol) l'ADN sur la nuit. le lendemain, je re-dépose sur gel.  [...] Serait-il possible que ton endonucléase de restriction ait une activité qui puisse être modifiée en présence de fortes teneurs en éthanol (admettons une gène sur le site de reconnaissance) entraînant un mésappariement et la catalyse d'une coupure non spécifique.  [...]