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[Biologie Cellulaire] Comment dissoudre la Collagenase

enzyme stock solution is prepared by dissolving 0.05 - 0.1 mg/ml collagenase in 50 mM TES buffer, pH 7.4, containing 0.36 mM calcium chloride.  [...] Ce qui m'intrigue, c'est l'utilisation du Serum de veau foetal pour diluer la solution mère de collagenase, je croyais que le SVF inhibait les enzymes. qu'en pensez vous.  [...]

RT qPCR

Les enzymes se gardent à -20 dans leur solution stock, mais en réalité les protéines n'apprécient pas trop la congélation/décongélation et elles peuvent perdre leur activité enzymatique,  [...] Pour contrer cela on rajoute bien souvent du glycerol pour éviter ce phénomène, c'est pour ca que votre enzyme dans sa solution stock est conservée dans du glycerol (qui sert de cryoprotectant) et qu'elle est à -20.  [...]

[Biologie Moléculaire] Dilution PCR

Sinon, classiquement les dNTP sont préparés en un mélange 10mM, dilués de sorte à être utilisés à 1mM. Dès lors ce n'est pas bien sorcier. 10mM -. 1mM dilution d'un facteur 10. Si votre volume réactionnel est de V, vous mettez V/10 de votre solution stock.  [...] Le calcul doit pouvoir être fait par un élève de 8-10 ans... Moi je veux bien aider, mais il faut aussi que de l'autre coté les personnes y mettent du leur. Vous avez une enzyme dont la solution stock est de 5U/µL et vous vous demandez combien de µl il faut prendre pour avoir 5U. J'espère que c'est une blague.  [...]

[Biologie Moléculaire] Tampon d'extraction

Le souci est que la mention de % n'est pas claire pour le SDS. Les pourcentages se comprennent en v/v ou en p/v. Mettons que ce soit du p/v. Dans ce cas là vous préparez une solution stock [10 ou 20% (p/v)].  [...] Pour le pH à 8 il correspond au pH des solutions d'EDTA. Il faut donc préparer une solution stock d'EDTA (mettons 500 mM) puis ajuster le pH de cette solution à 8.  [...]

[Biologie Moléculaire] Mise en solution d'amorces

Ainsi tu as deux solutions stock à 100µM que tu peux conserver au congélateur, mais avant cela, tu prépares une solution que tu utiliseras pour tes manips avec.  [...] ça te fait ainsi une solution d'amorces à 10µM que tu pourras décongeler quand tu en auras besoin sans devoir tout le temps re-décongeler tes solutions stocks (qui pourrait a terme dégrader tes amorces).  [...]

[Biochimie] Protocole de TP un peu flou

ensuite, on doit enregistrer le spectre d'absorption molaire d'une solution contenant du lysozyme.  [...] A partir de cette solution stock,preparer 5ml d'une solution de Phe 2mM dans le tampon phosphate.  [...]

[Biochimie] Protocole détaillé préparation d'une solution stock d' EDTA

Autre question, à quoi correspond la concentration d'un tampon (1x, 10x, 50x...) et comment calculer les masses des différents produits pour préparer une solution stock de tampon (par exemple un tampon TBEx5).  [...] Après ajustement, je transfère la solution dans une fiole jaugée de 500ml à l'aide d'un entonnoir et je complète jusqu'au trait de jauge, puis je transfère enfin dans une bouteille en verre pour le stockage.  [...]

[Biologie Moléculaire] Précipité dans solution stock Tris HCl

[Biologie Moléculaire] Précipité dans solution stock Tris HCl.  [...] J'ai préparé il y a quelques jours une solution stock de Tris HCl pH8. Après passage à l'autoclave, voilà que j'ai un précipité bleu qui se forme.  [...]

[Biotechnologie] Culture in vitro

J'ai une question à propos la culture in vitro. comment dissoudre l'anti-oxydant PVP ansi que l'hormonde de croissance BAP Mercii d'avance.   [...] La solution stock courante est 1000 ppm, tu dissous donc 0,2g de BAP dans du NaOH 1N et tu complètes à 200ml ddH2O.  [...]

[Divers] Conservation du tampon RIPA + antiprotéases

l'idéal est de faire du tampon de base a conserver a +4, et de faire en parallèle une solution d'inhibiteurs qui se garde a -20. Il suffit d'ajouter la quantité suffisante extemporanément. Par exemple les tablettes de chez roche peuvent se dissoudre dans le tampon directement, mais on peut aussi faire un stock 25X qui se garde a -20.  [...] Pour faire une solution stock 25X, je dois dissoudre une tablette dans 400 ul de tampon RIPA puis aliquoter (le volume me semble quand même assez faible).  [...]