• Forum - Décongélation, Protéine, Raisons

[Biochimie] Amylase et amidon

L'amylase est une protéine, une chaine d'acide aminés repliés les uns sur les autres dans une conformation très particulière. En chauffant la protéine on va l'amener à se déplier (pour une question d'entropie, d'énergie tout ça, c'est un peu long à décrire) et hors de sa configuration habituelle, elle n'est plus capable d'exercer sa fonction.  [...] La congélation ne détruit généralement pas les protéines, il s'agit justement d'une opération qui augmente leur stabilité en les forçant à se replier encore plus. (maintenant il faut savoir qu'un grand nombre de congélation-décongélation peuvent altérer la protéine pour d'autres raisons).  [...]

[Biologie Cellulaire] phosphorylation et congélation

je vous ai déjà envoyé qqs messages concernant la mise en évidence d'une phosphorylation sur une protéine d'intéret. J'ai pour vous une nouvelle petite question. pensez vous que la phosphorylation soit sensible à la congélation des échantillons. en d'autres termes, puis-je tester un traitement phosphatase après avoir immunoprécipité ma protéine à partir d un échantillon congelé à -80°C (et ayant donc subit un cycle de congélation/décongélation).  [...] Normalement pour l'étude que tu fais, un seul cycle de congélation/décongélation n'affectera pas ton expérience. Le paramètre qui est le plus affecté est la structure de la protéine, donc c'est surtout l'immunoprécipitation qui est concernée (dans le cas où l'anticorps reconnait un épitope conformationnel).  [...]

nitrates et santé

En cas d'utilisation modérée, il n'y a pas de problèmes et tous les nitrates seront transformés en protéines. Cependant, en cas de fumage excessif, la plante ne peut transformer tous les nitrates, avec comme conséquence qu'elle contiendra des résidus de nitrates.  [...] Congelez de petites portions de légumes riches en nitrates. Ceci permet d'accélérer le processus de congélation, et limite la transformation en nitrites par les bactéries. De même, essayez de maintenir le processus de décongélation le plus court possible, pour les mêmes raisons.  [...]

[Biochimie] Floculation des protéines

PS. C'est pour la même raison (c'est-à-dire pour éviter l'agrégation des protéines) qu'on les congèle rapidement aussi en utilisant par exemple de l'azote liquide.  [...] En revanche, circebio parlait d'autre chose. Généralement, après avoir purifié une protéine, on l'aliquote en petites fractions que l'on congèle. Et quand on veut faire des manips dessus (tests d'activité...), il faut faire attention à la décongélation. Voilou.  [...]

RT qPCR

Les enzymes se gardent à -20 dans leur solution stock, mais en réalité les protéines n'apprécient pas trop la congélation/décongélation et elles peuvent perdre leur activité enzymatique,  [...] Ce que Flying voulait dire, c'est que si vous avez mis l'enzyme, dans votre mix et que votre tube est retourné à -20, le glycerol est devenu minoritaire dans votre solution et votre enzyme dans l'eau ne va pas apprécier la congélation.   [...]

méthodes de lyse

Je voudrais donc savoir si quelqu'un utilise d'autres méthodes (cycles congélation-décongélation, utilisation de détergeants) et si oui quels en sont les avantages et les inconvénients.  [...] Perso, je fais 3 cycles de congélation dans l'azote/décongélation à 37°C, et après centri, les protéines sont plutôt jolies... (WB par ex.).  [...]

[Biologie Cellulaire] collagène pour culture cellulaire au congélateur

A la decongélation, il est devenu trouble. Savez vous si je peux encore utiliser ce collagene pour faire mon coating Y a t'il une solution pour renaturer les protéines (chauffage bain marie par exemple ).  [...] Oui je crois que tu peux essayer le chauffage au bain marie, mais il faut faire attention a ne pas la dénaturé de manière irréversible car c'est quand même une protéine.  [...]

[Biochimie] svp j ai besoin d'aide. mes echantillons ont ete decongeles

Bonjour chères collègues, mon travail de recherche consiste en analyse biochimique de tissus animals ( des poissons) j'ai conservé mes échantillons à -20°C et la catastrophe c'est que cette semaine il y avait une coupure d'électricité dans le centre de recherche et mes échantillons ont été décongelés.  [...] ma question. est-ce que je peux analyser certains éléments ( vitamines, minéraux, protéines...) qui ne seront pas deteriores a cause de la decongelation, même s'il y avait une repture de la chaine de froid.  [...]

Recongelation

Les bactéries resistent bien à la congélation, principalement en raison de leur paroi, voir certaines doivent etre capables de sporuler en attendant des jours meilleurs au fond du congelo.  [...] Il me semble que le sujet de ce post porte sur la congélation des produits alimentaires à domicile. Celle ci est déconseillée (c'est en général écrit sur l'emballage du produit) pour des raisons organoleptiques et bactériologiques.  [...]

[Biochimie] Stabilite des protéines

Juste un petit doute de dernière minute. J'ai lysé des cellules au RIPA + anti protéase en vue d'un Western Blot. Malheureusement, je ne peux faire ce WB que demain. Et du coup j'ai un petit doute.  [...] Les protéines n'aiment pas trop les cycles de congélation et décongélation. Ce que des gens font ici, c'est dénaturer les protéines tout de suite, les congeler et les déposer le lendemain. Je ne sais pas si cela t'aide mais apparemment ça marche.  [...]