• Forum - Culture, Débris, Cellules

[Biologie Cellulaire] Culture primaire de fibroblastes de souris

Voici mon problème, je garde toujours un peu de cellules pour les remettre en culture mais à partir de là, elles changent de morphologie et sont plus grosses, pas mal d'entre elles meurent et beaucoup de débris sont présent dans le surnageant de culture. Je suppose que ce sont les signes de sénescence de la culture primaire.  [...] J'essai aussi de mettre en culture des cellules musculaires lisses de souris (issues d'aortes) mais je n'arrive pas à en obtenir même en suivant le mode opératoire du labo (découpe de l'aorte en petit morceaux, digestion 45min à la Collagénase I, centrifugation et mise en culture dans DMEM 20%) quelqu'un aurait une méthode.  [...]

[Biologie Cellulaire] Contamination non identifiée

Ce genre d'aggrégat se produit lorsqu'il y a de la lyse cellulaire après décongélation, ce qui provoque l'aggrégation des cellules lysées. Lors de la décongélation de cellules, il n'est pas rare après avoir adhérer qu'elles aient des débris cellulaires collés à leur membrane.  [...] Il s'agit des cellules qui n'ont pas supporté la congélation/décongélation, qui se sont lysées puis collées sur les cellules adhérentes. Il est donc normal qu'après décongélation tu obtiennes dans ta culture des débris collés sur les cellules et des aggrégats.  [...]

[Biologie Cellulaire] Culture de cellules non adhérentes

Voila je suis en train de mettre en culture des cellules non adhérentes (en l'occurence des U937 et des lymphoblastoides qui sont des cellules lymphocytaires humaines immortalisée EBV).  [...] Comment fait-on pour enlever les cellules mortes En effet pour les passer il est nécessaire de les centrifuger, mais dans ce cas tout même les débris sont culotés et remis en culture donc non éliminés, et des cellule smortes en culture c'est aps terrible pour que les saines poussent dans de bonnes conditions.  [...]

[Biologie Cellulaire] Contamination de cultures cellulaires

Perso je jetterais mes cultures et mes milieux et divers produit et je repartirais a zero. Si tes ampoules sont contaminées...il vas peut être falloir se refournir en cellules.  [...] Mais il vaudrait mieux être sur que c'en est, parce que des fois des cultures peuvent avoir l'air dégueulasses, c'est juste que les cellules sont dégueulasses (débris, etc).  [...]

recherche d'un contact par mail avec un laborantin

Clairement cette méthode artisanale ne permet pas d'obtenir de l'ADN pur même avec une centrifugeuse, puisque l'ADN est déjà précipité, il ira se mettre au fond du tube avec les débris cellulaire. En fait pour ne conserver que l'ADN, il faut centrifuger le mélange avant d'ajouter l'alcool afin d'éliminer les débris de cellules, puis récupérer le surnageant et faire précipiter l'ADN.  [...] Pour résumer. détruire les cellules (qui ont été lavées dans un tampon) à l'aide d'un détergeant (SDS trouvable dans le commerce), faire une première centrifugation courte pour faire descendre tout les débris cellulaires, prélever le surnageant (où il y a l'ADN et des protéines), puis faire précipiter l'ADN à l'aide d'Ethanol et d'acetate de sodium.  [...]

immunologie-terminale S

Le contact se fait donc indirectement par rapport à l'antigène. Après cela il y a prolifération clonale des deux types de lymphocytes puis différentiation des LTCD8 en LTcytotoxiques qui vont avoir pour rôle de détruire les cellules infectés, il restera des débris cellulaires récoltés par un autre phagocyte qui va définitivement les faire disparaître.  [...] Donc pour faire simple les LT vont détecter les débris de l'antigène grâce au phagocyte, vont proliférer et détruire les autres cellules infectées cela avec l'aide également des LB.  [...]

Arrêter les brûlures ?! - Page 2

Mais ce n'est pas une police britannique aux manières respectueuses et sans armes. Lorsqu'une cellule anormale est détectée, les natural killer cells (cellules tueuses naturelles, dites NK ) l'entourent immédiatement et lui injectent un poison qui fait littéralement éclater sa membrane et la détruit sur-le-champ.  [...] Après la bataille, d'autres cellules blanches, appelées macrophages, nettoient les débris et soumettent ces indices aux cellules NK qui détecteront plus rapidement de nouveaux intrus.  [...]

la névroglie

j'ai lu récemment que les cellules gliales telles que les astrocytes et les oligodendrocytes situées dans le cerveau pourraient avoir un rôle trés important pour le fonctionnement complexe de notre cerveau, j'aimerais savoir combien y a t-il de cellules gliales et leur rôle, et j'aimerais également savoir comment ces cellules communiquent entre elles et avec les neurones.  [...] J'ajouterai qu'on n'arrête pas de trouver de nouvelles fonction remplies par les cellules gliales, qui sont effectivement loin d'être de simples structures de soutien du système nerveux.  [...]

[Biochimie] Ma protéine se dégrade avec le temps dans les culots à -20°C, car je n'arrive plus à la purifier ?

Mon dernier fermenteur date de 5 mois à peu près, j'ai stocké mes cellules bactériennes dans des falcons à -20°C et à chaque fois je sors un falcon pour faire ma purif... au départ ça allait, mais depuis hier je ne retrouve plus ma protéine au moment de l'élution (sachant que ma protéine est taggée et je la purifie sur une colone d'affinité Nickel) alors ma question est.  [...] Après production, le mieux est d'effectuer quelques étapes de purification et d'éliminer le milieu de culture et les débris bactériens, si tu le peux.  [...]

Opération ongle incarné, questions

En général et surtout dans ce cas la, l'inflammation est causée par une infection et l'inflammation peut durer un peu après que l'infection se soit terminée (le pus, ce sont des globules blancs morts qui ont digérés les débris de cellules mortes et les bactéries et en général, il n'y a pas assez de débris pour former un abcès s'il n'y a pas infection).  [...] Cette opération n'est pas encore très connue et au moment ou j'écris ce post elle est encore en phase d'essai (à ce qu'on m'a dit à l'hôpital). Elle a de nombreux avantages comme le fait que ça dure 10 min, que le médecin le fait dans son cabinet (pas besoin de bloc opératoire), que le risque de récidive est réduit et que le temps d'arrêt après l'opération est de 3 jours au lieu de plusieurs semaines pour une opération classique.   [...]