• Forum - Contrôle, Promoteur, Lactose

[Biologie Moléculaire] Expériences avec le facteur sigmaE

- on cultive des souches MC4100 qui portent un plasmide rapporteur contenant lacZ sous le contrôle d'un promoteur SigmaE dépendant, dans un milieu contenant du lactose à 30°C pour sélectionner les souches LacZ + qui ont bien intégré le plasmide.  [...] - on place ces souches sur milieu McConkey à 43°C =. les colonies rouges (LacZ + ) sont celles qui expriment bien LacZ (normal, puisque SigmaE est activé à haute température, et lacZ est sous le contrôle d'un promoteur SigmaE dépendant).  [...]

[Biologie Cellulaire] infos

quand aux opérons on les retrouvent chez les procaryotes (bactéries). Ces un ensemble de gènes sous le contrôle d'un unique promoteur. Ce qui va permettre de transcrire un ARN polycistronique qui traduira plusieurs protéines au fonction différente. Par exemple l'opéron lactose qui possède les gènes lacZ, lacY et lacA on obtient un ARN polycistronique dont la traduction aboutira à une B-galactosidase (lacZ), une B-galactosidase perméase (lacY) et une B-thiogalactosidase acétyltransférase (lacA).  [...] A l'inverse des eucaryotes où on a un promoteur pour un gène formant ainsi un ARN monocistronique qui sera traduit en une seule protéine.  [...]

[Biotechnologie] le système pET - surexpression de protéines

le gène de la T7 RNA polymérase est sous contrôle du promoteur lac UV5 qui s'exprime quand présence de lactose ou un de ses dérivés.  [...] La question 1 est juste car lorsqu'on ajoute un dérivé du lactose, l'IPTG, qui a l'avantage de ne pas être métabolisable, on induit l'expression de la T7 RNA polymérase et du gène d'intérêt. Ceci est un mécanisme de régulation classique par l'opéron lactose qui est situé dans le promoteur de la T7 RNA polymérase (lacUV5) et dans le promoteur du gène d'intérêt.  [...]

[Evolution] Épissage et Origine des Gènes de Développement

Suite a un stimulit, l'ARN polymérase et son complexe protéinique de traduction composée d'une vingtaine de protéines, traduit une chaine d'ADN (de manière continu) en ARN (pré-ARNm) a partir d'un site d'accrochage (TATA) qui donne accés a un promoteur sur la molécule d'ADN.  [...] Certain facteur environnementaux, (substance chimique, hormone et autre), ont le pouvoir (chimiquement.) de controlé l'expression de l'activité génétique. Non pas par le processus directe de synthèses via un promoteur sur l'ADN pour partir la synthèse d'un gène vers une protéines (comme le gène lactose des bactérie).  [...]

[Biologie Moléculaire] organisation plasmide

dans le cas de LacZ pour la complementation ce n'est pas le gène entier, juste une sous unité, et il se trouve derrière un promoteur constitutif qui n'est pas le promoteur initial de l'opéron lactose si je ne m'abuse.  [...] Non il ne faut pas aller chercher trop loin. Si c'est un plasmide RAPPORTEUR, on veut mesurer l'ACTIVITE d'un PROMOTEUR en mesurant indirectement l'expression d'un gène quantifiable comme ß-galactosidase. Dans ce cas la, on a besoin DU PROMOTEUR d'intérêt et c'est lui que l'on clone dans le MCS en AMONT du gène rapporteur.  [...]

[Biologie Moléculaire] Promoteur Taq

Je suis en Licence 2 de Chimie et j'étudie les promoteurs utilisés dans la transcription. On me demande de schématiser le promoteur Ptac qui est l'hybride entre le promoteur de l'opéron tryptophane (-50 -11) et celui de l'opéron lactose (-10 +30).  [...] J'aurais voulu savoir si quelqu'un pouvait me donner un site où trouver ou même la séquence du promoteur Ptac.  [...]

[Biologie Moléculaire] Répression de l'Opéron Lactose

donc on réprime tout ce qui est en rapport avec le glucose et le lactose se fixant sur le promoteur, on aura un RNAm polycistornique qui sera traduit en enzymes permettant le métabolisme du lactose.  [...] le lactose se fixe sur le tétramère, va modifier la conformation dans l'espace du tétramère, ˜ d'affinité du tétramère pour l'opérateur. Le répresseur ne se fixe plus sur l'opérateur mais bine l'ARN polymérase. Et on aura alors synthèse des protéines qui interviennent dans le métabolisme du lactose.  [...]

[Biologie Moléculaire] Vecteur d'expression

Je suis nouveau ici et j'ai déjà une question à vous poser concernant les vecteurs d'expression. Ma question est pour quelle raison on introduit un gène(lacI) codant pour l'enzyme répresseur au niveau du plasmide alors que ce gène est déjà présent au niveau du chromosome de la bactérie.   [...] Du coup, le gène est placé en aval d'un promoteur inductible. Ici, c'est le promoteur de l'opéron lactose qui est exploité. En présence de glucose, le gène transfecté ne sera pas exprimé par tes bactéries car lacI réprimera la transcription.  [...]

[Biologie Moléculaire] Aidez Moi Svp

Le lactose du milieu va en fait se fixer sur le répresseur (codé par lacI rappelons-le) et ça va induire un changement de conformation qui va empêcher la fixation du complexe répresseur-lactose sur l'opérateur, l'ARN polymérase pourra aller sur le promoteur et transcrire lacZ.  [...] S'il y a peu de glucose et pas de lactose il y a beaucoup d'AMPc donc CAP-AMPc peut se fixer au promoteur et induire la transcription de lacZ MAIS comme il n'y a pas de lactose le répresseur sera actif et va se lier à l'opérateur =. donc il n'y aura quand même pas de transcription de lacZ.  [...]

Un code bactérien φ80dlacZΔM15Δ(lacZYA-argF)...

Si je ne me trompe pas, le signifie une délétion dans la séquence d'un gène (c'est une souche mutante) et le lacZYA est effectivement l'opéron lactose avec les trois gènes lacZ, lacY et lacA qui se suivent et qui ont un promoteur et un terminateur communs.  [...] lacZ M15 = partial deletion of the lacZ gene that allows ± complementation of the ²-galactosidase gene. required for blue/white selection on XGal plates. Deletes the amino portion of lacZ (aa 11-41).  [...]