• Forum - Congélation, Concentration, Cellule

[Biologie Cellulaire] Calcul de concentration dans un cryo-vial

Après centrifugation de ce 5 mL, on resuspend le culot dans 1 mL de milieu de congélation. Je transfert le tout dans un cryo-vial de 2 mL. Ma question est en fait comment trouver la concentration dans le cryo-vial.  [...] On part avec 3,9*10^7 cellules/5 mL. En mettant le tout dans 1 mL de milieu de congélation, la concentration sera 5 fois plus grande dans le cryo-vial (1,95*10^8 cellules/mL).  [...]

[Biologie Cellulaire] Utilisation du FACS

Ils nous ont aussi conseillé de fixer nos cellules soit en formol 2% soit en PAF 4% et de congeler azote liquide pour conserver. J'imagine bien évidemment qu'il faut rincer les cellules fixées avant de les congeler... La congélation est elle obligatoire, j'ai fait de l'immunoloc sur cellules et je n'ai jamais congelé j'ai toujours conservé mes préparation à 4°.  [...] Ma cinétique se déroulerait sur 40 jours et ça va être très difficile de le faire sur cellules fraiches. D'où la mise au point d'une methode de fixation/congélation la moins dénaturante possible. D'après ce que j'en sais la congélation à l'azote liquide devrait vitrifier l'eau ce qui n'endommage pas les cellules au moment de la décongélation mais c'est vrai que j'ai quand même quelques craintes.  [...]

[Biologie Moléculaire] Conservation de tissus à -80°C

non ça ne risque rien, conservé à -80°C, pendant 4 mois (c'est court) y a pas de problème. Le seul truc, comme toujours, est d'éviter les cycles de congélation/décongélation (ça c'est pas bon du tout).  [...] Dipediou, c'est pas mal le RNA later (on en utilise d'ailleurs). Mais dans mon cas j'extraie les ARN et les protéines à partir des mêmes échantillons. Le RNA later ne permet pas d'extraire les protéines, donc je n'avais que le choix de la congélation.  [...]

[Biologie Moléculaire] Nettoyage d'ARNs & Transfert de protéines

Sinon tu peux les repasser sur ta colonne d'extraction, par contre, tu risques de perdre au niveau rendement d'ARN alors tout dépend de ta concentration. Si tu précipites à l'isopropanol, tu risques également de perdre de l'ARN mais si il t'en reste suffisamment pour réaliser une RT PCR ça devrait aller.  [...] Concernant la précipitation tu as raison, c'est hyper dur à redissoudre. Je le fais dans du tampon 2D (saturé en urée, thiourée + CHAPS et SDS) et j'incube mes échantillons 1 nuit à 4°C (pas de congélation). Ca facilite la dissolution (le culot devient translucide, un peu gélatineux).  [...]

[Microbiologie] Conservation souches, et Souchier

ben en microbiologie on distingue 3 principales méthodes de conservation des souches. la lyophilisation en ce cas les souches seront conserver pour plusieurs années.mais aussi la congélation( -20°C à -80° C)ce qui bloque le métabolisme des souches chose qui aide à les conserver plus longtemps.  [...] Merci pour cette réponse mais je n'arrive pas à ouvrir le document qui est avec le lien que vous m'avez donné. Je voudrais en savoir plus sur la conservation par congélation en cryotube. Car dans les cryotubes on va mettre le milieu sur lequel la souche pousse plus du glycérol pour la conservation.  [...]

combien de temps peut on garder un organe en vie hors du corps ?

En générale moins de 15 minutes tout dépend du milieu où l'organe se trouve si c'est un endroit aseptique ou si c'est dans un endroit septique. Généralement les prélèvements d'organes (Chirurgie) sont directement conservé pour un examen ultérieur par congélation, empreinte ça fait partie des options bien entendu.  [...] En 1912, il obtint le prix Nobel de physiologie ou médecine en reconnaissance de ses travaux sur la suture vasculaire et la transplantation de cellules sanguines et d'organes, devenant à l'époque à la fois le plus jeune lauréat et le premier scientifique récompensé pour ses travaux hors de son propre pays.  [...]

[Biochimie] la conservation d'une viande dans l'espace

bonjour bon voila je travaille sur la conservation de viandes et je me suis posée cette question. Comme vous le savez beaucoup de viandes (supermarché) sont vendues sous vide (charal et tout) le vide est une technique de conservation reconnue.   [...] Vu qu'un congélateur conserve très bien à -20°C, je pense que d'un point de vue sanitaire, l'espace serait... pas mal, même sans le vide. Après au niveau organoleptique, une congélation aussi intense pourrait peut être avoir un effet sur les protéines en les cassant ou autre, je ne sais pas trop.  [...]