• Forum - Concentration, Enzyme, Détergents

Biochimie-activité enzymatique

Je dois déterminer la concentration d'une enzyme en présence de détergents à différentes concentrations.  [...] Au final, je réalise une cinétique sur 10 min et je trouve, par exemple pour un detergent X à 100mM au départ.  [...]

[Microbiologie] Lyse efficace de Candida

Je suis à la recherche d'une méthode de lyse pour les Candida. J'ai déjà essayé plusieurs méthodes. lyse mécanique, avec enzyme, détergents... Mais rien n'est assez efficace. Il ya toujours une certaine lyse sur une très forte concentration de bactéries, mais je cherche une méthode qui serait super efficace pour récupérer le plus d'ADN possible.  [...] J'avais fait des essais comparés pour lyser des bactéries rapidement avec la meilleure efficacité possible et j'avais le meilleur rendement avec une lyse mécanique avec des billes. L'appareil utilisé était un minibeadbeater = un look est allemand, si vous pr évenez pas vos collègues, ils vont croire que le batiment s'effondre mais très efficace.   [...]

PCR, amorces

Correction, c'est le coté 3' qui doit etre GC riche (le mieux etant que l'amorce se termine par un ou plusieurs G ou C). Car la Taq n'amorcera la polymerisation que si l'amorce est parfaitement appariée en 3'.   [...] Sinon la composition du tampon joue aussi pas mal (concentration en MgCl2, KCl, détergents etc...).  [...]

[Biologie Cellulaire] pbs et pbs tween

- for lysing mammalian cells, at a concentration of 0.05% to 0.5% v/v, generally combined to other detergents, salts and additives.  [...] Le Tween est relativement doux, il est parfois utilisé en plus avec du Triton (qui est également un détergent, mais un peu plus puissant).  [...]

[Biochimie] Triton X 100

A des concentrations déontologiques il n'interfère pas du tout avec un dosage à 595 style bradford. Pour le BCA ou autre je ne sais pas.  [...] Pour les dosages BCA à faible concentration il n'interfère pas, mais souvent des tableaux sont vendus avec le kit de dosage reprenant les interactions éventuelles avec les principaux détergents. Tu trouveras à coup sur le triton x-100. Si tu l'utilise attention aux mains et aux yeux c'est très très agressif même si ça n'en n'a pas l'air.  [...]

sujet de TP Master microbiologie à réaliser : protocole à vérifier

Je suis étudiant en première année de Master 1 de microbiologie et j'ai un sujet de TP à réaliser. Je souhaiterais savoir si mon protocole vous convient.   [...] Identification de la bactérie responsable de la production de béta galactosidase*.   [...]

Désinfectant poly-enzymatique...?

Une amie m'a posé une question ce matin, et n'étant pas biologiste, ne faisant pas d'étude dans ce domaine je n'ai pas vraiment su lui répondre ( oui ce sont des excuses... ).   [...] Ces types de détergents sont composés par exemple de protéases (subtilisine), lipases, amylases, et bien d'autres encore enzymes.  [...]

[Biologie Cellulaire] Isolement d'un compartiment cellulaire

Pour le gradient de densité, grâce à la couleur donné de solution de chloroplastes on peut connaitre la concentration,non.  [...] -j'aurais dit pour tous types de cellules contenant des proteines (car fractionnement avec solvant, detergents et digestions enzymatique...) mais y a-t-il des proteines dans les chloroplastes.  [...]

[Biochimie] Lysis buffer

Pourquoi mettre le triton au dernier moment Perso je prepare mes tampons de lyse en 1x avec le detergeant. La seule chose a ajouter plus tard est le coktail de protease inhibitor.  [...] Pareil pour moi. Le triton étant un détergent, pas de problème de conservation. A la limite, on ne met pas les détergents dans les solutions stocks sur-concentrées (5X, 10X,...) à cause de problème de solubilisation.  [...]

[Génétique] genetique cycle lytique et lysogenique

Chez les cellules eucaryotiques, la destruction de la membrane plasmique ou la simple perte de ses propriétés sélectives d'échange (sous l'action d'enzymes, de détergents, de certains antibiotiques, etc.) suffisent à rompre les équilibres internes et à provoquer la mort cellulaire à court terme.  [...] La déstabilisation des membranes des lysosomes et la libération de leurs enzymes hydrolytiques jouent un rôle important dans ce processus.  [...]