• Forum - Concentration, BSA, Solution

[Biochimie] dosage des proteines

..incubation...6_ inoculation des AC de detection couplés a la peroxidase...incubation..lavag e...7_ajout de la solution de lenzyme peroxidase...lecture sur le lecteur elisa a 495nm.  [...] bradford. 1_solution de proteine reference BSA dans des tubes a concentration ascendante,volumes finaux egaux ajuster avec du NaCl, 2_solution de la proteine a doser (x) dilué, 3_ reactif de bradford que l'on ajoute dans les tube,meme dans le banc (qui ne contien rien),..courbe detalonage.  [...]

[Biotechnologie] méthode de Bradford

Et si j'ai bien compris la gamme de sérumalbumine bovine prédéfinie va réagir avec le Bradford qui aura une coloration de plus en plus intense plus la concentration sera élevée, en comparant avec notre solution à doser qui elle aussi à réagit avec le bradford et va donner une certaine coloration, on saura donner la concentration en proteine de la solution à doser en fonction de son intensité en bleu Ai-je bien compris.  [...] Le bradford est un réactif, il doit être ajouté dans chaque puits contenant une protéine à doser, que ce soit l'étalon (la BSA) ou la solution à concentration inconnue.  [...]

Gamme etalon BSA

Commencez par déterminer la concentration de BSA dans votre solution en mg/mL.  [...] Le signe % veut dire, comme son nom, l'indique pour cent. Une solution de 20 mL à 0,02% signifie une solution de 20 mL à 0.02g/100mL (ou encore 20mg/100mL).  [...]

[Biochimie] méthode de BRADFORD

Merci de m'avoir répondu. Mais en fait, je suis dans la zootechnie, et j'ai à determiner les concentrations en protèine d'ordre de microgramme (glandes hypopharyngiennes des abeilles) et je ne sais pas quelle concentration BSA à utiliser pour tracer ma courbe d'étallonnage autrement dit comment je dois préparer la solution mère (quantité de BSA en poudre et la quantité d'eau distillée).  [...] a mon avis, ce que tu peux faire, c'est de preparer ta solution a 100microgrammes/ml, que tu diluera par la suite pour obtenir les autres concentrations.  [...]

[Divers] gamme étalon

par exemple si tu veux doser la BSA (qui absorbe la lumiere a une longueur d'onde particulière) dans une solution, tu peut utiliser une solution pure de BSA et la diluer a certaines concentrations et regarder l'absorbance de chacune de ces dilution.  [...] en fonction de l'intensité d'absorbance de chaque dilutions dont tu connais la concentration (6-7 dilutions de différentes concentrations), tu peux tracer ton graphique d'absorbance et ensuite mesurer l'absorbance de ta solution mystère.  [...]

volume concentration dilution

Pour qu'on puisse t'aider il manque la concentration initial en collagenange, et pour le BSA il suffit de faire une produit en croix, en sachant que ton BSA initial est 100%.  [...] BSA 0.5%, c'est un rappot masse/volume. En solution aqueuse, 1% en masse représente 1g dans 100mL.  [...]

role de la BSA dans la mesure de la concentration des protéines !!

Determination of Total Protein Content. Total soluble protein was measured according to Lowry et al. [25]. Protein concentration was determined using bovine serum albumin (BSA) as a standard. The protein content of the chromatographic eluant was measured by monitoring the optical density at 280 nm.  [...] wé ta bien répondu sur ma quetion. seulement pour fixer les idées, les concentrations de la BSA sont utilisées comme gamme d'étalonnage. ensuite la valeur de la DO mesurée est projectée sur l'axe des abscisse. c'est bien ça.  [...]

[Biochimie] Méthode de Bradford

de mon coté je rencontre des difficultés pour tracer la droite,je sais que ça sera la DO en fonction de la concentration de BSA.mais le problème c'est qu'on a utilisé 5 tubes dont un est le blanc plsu deux autres de 1/10 et 1/100 de serum dilué (notre échantillon à doser est l'immun serum),dans ce cas la comment je tracerai ma droiteest-ce qu'elle passera par le zero ou nonet comment interpréter mes résultats.  [...] Ensuite tu reportes sur la courbe la DO que tu as obtenu pour tes deux échantillons (1/10eme et 1/100eme) et tu n'as plus qu'à lire la concentration de tes échantillons (en n'oubliant pas de rétablir le facteur de dilution). Pour être plus précis tu peux également calculer la concentration à partir de l'équation de la droite. A toi de voir.  [...]

[Biochimie] Dosage de protéine

Après de nombreuses recherches, je me tourne vers vous pour essayer de mettre au point un protocole de dosage de protéines. Je dois doser les protéines contenues dans une fraction purifiée d'un surnagent de bactéries marines et je ne sais quelle méthode choisir (Lowry, Bradford, spectro UV.   [...] ..). De plus, je n'ai aucune idée d'une concentration approximative dans ma fraction et je ne sais pas du tout sur quelle gamme étalon je dois partir en terme de concentration de BSA.  [...]

[Biologie Moléculaire] immunohistochimie sur rein de souris

Je dois faire une immunohistochimie sur des sections de rein de souris. J'utilise un protocole où je masque avec de l'eau oxygénée la péroxidase endogène puis je bout les sections dans du citrate de sodium pour réveler l'antigène. Je bloque avec de la BSA/PBS dans laquelle j'ai de la streptavidine puis le premier anticorps avec de la biotine dans la solution.  [...] Pour la révèlation j'utilise un second anticorps couplé à l'HRP puis la solution ABC (avidin-biotin complex) et enfin le DAB comme chromophore.  [...]