• Forum - Concentration, ADN, Sonde

[Biologie Moléculaire] probleme de signal southern

J'ai essayé plusieurs choses, augmenter les concentrations, changer tout mes tampons, changer la sonde a marquer, changer le kit de marquage, utiliser une sonde purifiée par HPLC.  [...] Oui j'ai essayé de varier les concentrations des ADN a utiliser et j'utilise également ma sonde à la concentration optimum.  [...]

[Biologie Moléculaire] qPCR

en ce qui concerne le passage en sonde TaqMan à partir d'un SybrGreen, l'important est le ratio concentration sonde/concentration amorces.  [...] De ton coté, je pense qu'il vaut mieux partir avec tes concentrations d'amorces optimisées en Sybr et caler la sonde pour le TaqMan à une concentration moyenne de 200nM final. Ensuite, faire varier la concentration de sondes entre 100 et 400 et regarder si les résultats sont corrects.  [...]

[Biochimie] Différence entre puce à ADN et sonde à ADN !

[Biochimie] Différence entre puce à ADN et sonde à ADN.  [...] Re. Différence entre puce à ADN et sonde à ADN.  [...]

Sequence 5' pour un ADNc en Southern Blot

Voici ma question. Compte tenu du fait que l'ADNc ne contient que des exons comment se fait il que la sonde extremité 5' detecte quelque chose car il me semble que dans L'ARN mature ( qui permet d'obtenir l'adn c par RTPCR ), la sequence 5' n'est pas transcrite.  [...] Et deuxieme question. Comment expliquer les differences de kb entre la sonde extremité 5 ' pour l'adn c et la sonde extremité 5' pour l'ADNg.  [...]

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN

[Biologie Moléculaire] Marquage directe et indirecte d'une sonde ADN.  [...] Ma question est a propos du marquage directe et indirecte dune sonde ADN. Le prof nous a dit que le marquage indirecte est utilise pour amplifer le signal mais je n'ai pas compri pourquoi une necessité d'amplifier le signal.  [...]

gel shift : hhhheeeeelllp !!!!!!!

PS. 300 pb c'est bien, mais pas plus parce que apres tu seras obligee de diminuer la concentration d'acrylamide de ton gel, et que la manip va devenir tres delicate.  [...] g qd même encore une petite question...je sais qu'il faut faire des expériences de compétition sonde chaude/sonde froide pour tester la spécificité de l'interaction ADN/prot... s'il y a des aspécificités, est-ce dû au marquage de la sonde.  [...]

[Biologie Cellulaire] Exercices important!!

ce fragement est utilisé comme sonde ds une expérience de southern blot sur l'ADN génomique totale a partir duquel cette sonde avait été générée.  [...] NB. on considère que l'on est en phase exponentielle jusqu'à ce que les bactéries soient a une concentration de 10^8 bactéries/ml. l'origine d'une colonie il y a 1 bactérie.  [...]

[Biologie Moléculaire] technique d'hybridation moléculaire

j'ai réalisé une hybridation moléculaire avec des sonde 16S et des sonde spécifiques d'un gène avec les fragments d'ADN d'une souche bactérienne.Le profil d'hybridation avec la sonde spécifique du gène m'a donné une seule bande de taille 2 megabases. Mon prof ma dit qu'elle correspond à un mini-chromosome.  [...] Pour hybrider des sondes, il a fallu que tu mette un produit pour perforer les membranes afin de laisser passer ta sonde non Si tel est le cas, peut être que cette étape n'a pas fonctionné et que ta sonde à hybridé un bout d'ADN d'une bactérie lysée.  [...]

[Biologie Moléculaire] l'hybridation d'une sonde

Une sonde est une séquence d'ADN ou d'ARN qui va se fixer in vitro ou in situ sur sa séquence complémentaire. Cela est utilisé pour différentes techniques comme le Northern Blot pour quantifier une séquence d'intérêt ou comme en hybridation in situ pour déterminer la localisation de cette séquence dans une cellule par exemple.  [...] Cependant, si tu as marqué la sonde sonde, par exemple à l'aide d'une molécule fluorescente, tu peux alors la visualiser (avec un microscope à fluorescence par exemple). Par ailleurs, étant donné que la sonde est fixée sur ton ADN d'intérêt, le fait de visualiser ta sonde te permet de visualiser ton ADN.  [...]

[Biologie Moléculaire] Ribosonde

Pouvez vous m'expliquer simplement la façon dont on crée une ribosonde Je ne comprends pas en effet ce que contient le vecteur au départ (de l'ARN ou de l'ADN), pourquoi on l'appelle ribosonde et pas sonde tout court. D'ailleurs, c'est de l'ARN la ribosonde Bref, merci beaucoup d'avance.  [...] Ne pas oublier que la réaction de transcription ne synthétise qu'à partir d'un seul des deux brins de l'ADN. Ne pas se tromper de brin si l'on veux utiliser cette sonde pour un Northern blot.  [...]