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[Biologie Moléculaire] Concentration ADN plus élevé au picogreen qu'aux UV (spectrométrie)

J'ai fait plusieurs quantifications d'ADN et voilà que la concentration de mes échantillons est plus élevée au picogreen qu'aux UV. Voici comment je procède.  [...] Lorsque je compare les concentration de mes ADNs mesurées avec les deux technologies, alors qu'on devrait s'attendre à avoir une concentration plus élevée avec le UV c'est plutôt le contraire qui se produit et ce avec tous les échantillons (peu importe la provenance du client) que j'analyse.  [...]

[Biochimie] Absorbance de la molécule d'ADN

Expérimentalement, on montre qu'une solution d'ADN simple brin a une absorbance plus élevé qu'une solution de même concentration d'ADN double brin, lequel a une absorbance plus faible qu'une solution de dNTP.  [...] Ta réponse est meilleure que l'histoire du solvant. En fait, c'est juste une question de géométrie. Dans de l'ADN double-brin, les bases sont empilées et ce sont bien elles qui absorbent les UV. Si un photon recontre une base et est absorbé, cet empilement fait que la base qui est juste derrière celle qui a absorbé le photon est dans l'ombre et ne pourra donc pas être détectée, ce qui conduit à sous-estimer la concentration réelle.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction d'ADN

petite précision, l'ADN absorbe les UV a 260 nm, donc je suis sur de la longueur d'onde que j'ai choisi pour la lecture de la densité optique.De plus je trouve que l'expression de la concentration se fait par microlitre indépendamment du volume final du moment que chaque ul contient une quantité donné d'ADN.  [...] pour toute utilisation ultérieur (PCR) par exemple,on nous demande de prendre 2ul d'ADN concentré à 10ng/ul c'est pour cela je vous dit que le plus important c'est la concentration dans un volume donné (1ul).  [...]

[Biologie Moléculaire] Densité Optique a quoi sa sert en biologie ?

Les acides nucéiques absorbent la lumière à 260nm de longueur d'onde (UV). Mesurer l'absorbance à 260nm d'une solution d'ADN ou d'ARN te permet donc d'en déduire la concentration en l'un ou l'autre (loi de Beer-Lambert).  [...] Les mesures de DO sont aussi utilisées en biologie pour mesurer des concentrations de protéines, suivre des réactions enzymatiques ou encore des croissances bactériennes ou de levures en milieu liquide par exemple, le tout étant de savoir quelle longueur d'onde regarder pour tel ou tel contexte.  [...]

[Biologie Moléculaire] Dosage de l'ADN

La concentration d'une solution d'ADN est déterminé par spectroscopie UV. La valeur de DO mesurée est de 0.456. Parmi les propositions suivantes, quelle est la seule proposition fausse.  [...] Beh si le simple-brin absorbe davantage et qu'avec les calculs plus haut tu trouves que tu as une concentration d'ADN correspondant a de l'ADN natif, la DO devrait augmenter s'il y a denaturation.  [...]

dangerosité des ultraviolets

L'absorption de ces rayons va exciter électroniquement les bases formant l'ADN ayant absorbé ces UV et favoriser la formation de liaisons chimiques. Cela va donc entraîner des mutations (association de deux bases non volontaire par exemple) et de là, des cancers peuvent apparaître.  [...] Maintenant j'aimerais savoir pourquoi l'ADN réagi à une onde électromagnétique de longueur d'onde (153nm-400nm. UV[A,B,C]) mais n'a pas la même réaction pour une onde électromagnétique de longueur d'onde plus élevé (exemple. lumière visible). Elles ont exactement les mêmes propriétés seule la fréquence change.  [...]

altitude et végétaux

Seulement voilà, la répartition de l'auxine dans la plante dépend de la lumière. Si une plante recoit uniquement de la lumière par un côté elle va se courber vers ce côté car l'auxine va se répartir en plus grande concentration du côté ombragé.  [...] Enfin, mais là je ne suis pas sûr à 100%, je pense que le taux d'UV à un rôle. Plus le taux d'UV est élevé (et il augmente avec l'altitude) moins la concentration d'auxine dans la plante serAIT grande.  [...]

[Biologie Cellulaire] transfection

Le Glycérol c'est pas le top pour les cellules en général. Quand je congèle mes bactéries après miniprep la concentration finale en Glycérol est de 10% et je n'ai jamais eu aucun problème pour les faire repartir même en grattant un peu pour une midiprep de 200ml.  [...] Nous utilisions du glycerol pure et stérile (99%), pour une concentration finale de 25% (jusqu'à 50% pour les bactéries fragile, c'est à dire avec un grand plasmide (entre 15 et 20kpb).  [...]

[Biologie Moléculaire] élèctrophorèse (ADN)

Par contre, j'ai du mal m'exprimer, ce que je n'arrive pas à expliquer c'est pourquoi à T0 on voit une migration avec nottament une barre près du puits, à T1 la migration est de même longueur sauf que la barre près du puits apparait moins nettement, et à T2 la migration est bien visible aussi mais il n'y a plus de barre tout près du puits.   [...] Les fragments d'ADN ne restent pas sur le gel d'agarose d'où le fait que tu n'as pas plusieurs barre (sinon ça voudrait dire que les délétions dù aux UV donne des molécules d'ADN de tailles différentes) mais bien qu'une seul qui correspond à ton ADN qui est resté intacte (n'oublie pas que tu n'as pas qu'une seule molécule d'ADN dans un puit mais plusieurs).  [...]

[Biologie Moléculaire] pcr

plus ils sont petits et plus ils migrent vite vers la partie inférieure et positive du gel. C'est donc au cours de la migration que se fait la séparation entre ton ADN de départ (très grosse molécule qui restera en haut du gel) et les amplifiats (fragments plus petits qui seront plus bas dans le gel).  [...] Le BET (ou bromure d'éthidium) va se concentrer au niveau des régions du gel riches en ADN. La détection se fait en plaçant le gel sous une lampe UV qui va révéler la présence du BET par fluorescence. Seules les régions du gel très riches en BET, et donc en ADN, paraitront colorées.  [...]