• Forum - Colorant, Visualisation, Migration, échantillons, ADN

[Biologie Moléculaire] kit d'empreinte génétique de Bio-rad

bonjour. j'ai étudié le kit de bio-rad pour l'empreinte génétique ainsi que leur exemple représentatnt les étapes de l'expérience. Au laboratoire, nous utilisons du BET pour l'eléctrophorèse avec observation sous U.V mais c'est un produit cancérigène alors que pour le kit, ils fournissent un colorant bleu pour la visualisation de la migration des échantillons d'ADN sans U.  [...] V et sans risques, mais ils n'ont pas précisé le nom du colorant bio-safe DNA stain. en faisant une petite recherche, j'ai trouvé le bio-safe coomassie stain mais utilisé pour les protéines. est ce que ce colorant est utilisé aussi pour la coloration de l'ADN et quel autres colorants bleu sont utilisés merci pour votre réponse.  [...]

Kit de dosage des acides nucléiques?

C'est un peu abbérant un laboratoire sans spectro (apres je sais pas quel est la spécialisation de ton laboratoire mais le spectro est utilisé quand même dans pas mal de manip').   [...] Si c'est à la louche fais une comparaison sur gel d'agarose aprés migration, coloration BET et visualisation sous UV... Tu peux comparer à l'oeil ou avec un logiciel d'acquisition. Encore faut il avoir des témoins corrects.  [...]

[Biologie Moléculaire] Questions de Biologie moléculaire

3* En ce qui concerne la visualisation de l'ADN je connais la coloration au bromure d'éthidium qui se fixe à l'ADN double brin et devient fluorescent lorsqu'il est exposé aux rayonnements UV.  [...] 4*La précipitation des acides nucléiques peut se faire à l'aide de l'éthanol ou l'isopropanol, la différence réside dans le fait que la méthode à l'éthanol nécessite la présence de sel et la précipitation se réalise par addition de deux volumes d'éthanol à un volume de la solution, alors que la méthode à l'isopropanol ne nécessite pas la présence de sel et la précipitation se fait par un mélange volume à volume.   [...]

[Divers] Système de visualisation d'ADN en gel, fluorescence et UV!

[Divers] Système de visualisation d'ADN en gel, fluorescence et UV.  [...] Quelqu'un pourrait me conseiller d'un système simple de visualisation de gel avec caméra et lumière blue/UV pour visualiser les bandes d'acides nucléiques (ADN et ARN) dans un gel d'agarose préparé avec de BET et de Sybr safe (fluorescence).  [...]

PCR : Réaction en Chaîne par Polymérase

Il y a de multiples variantes de PCR pour détecter une mutation. Par exemple, tu prends un couple d'amorce dans lequel une des deux amorces a son extrémité 3' qui s'hybride sur un nucléotide muté ou non. Si tu choisi une amorce spécifique du nucléotide non muté, la présence d'une mutation va empêcher l'hybridation de l'extrémité 3' de l'amorce, et la polymérase ne pourra pas amplifier le fragment.   [...] Un seul fragment d'ADN n'est absolument pas détectable si on effectue une visualisation sur gel après coloration avec du syBRgreen. Il y a nécessité d'avoir une forte amplification du fragment pour qu'il soit bien détectable.  [...]

[Biologie Moléculaire] tampon de charge

Le plus critique dans ce genre de tampon de charge, c'est de s'assurer qu'on n'a pas un colorant qui va gêner la visualisation de nos bandes d'intérêt.  [...] Dans le orange loading 6x il y a déjà du Tris et de l'EDTA...je migre dans du TBE 0.5X, le BET est inclus dans le gel lors de la préparation. La résolution est plutôt très belle.   [...]

Comment coder un rétro Virus?, Ou trouver de l'arn, creation d'un rétro virus et le coder HELP !

Je pensais créer un rétro virus, pour dupliquer des cellules saines, et contrer les maladies. rien de négatifs, ne devenez pas trop méchant quand même je n'y connais pas grand choses, je voudrais juste savoir si possible exemple. a l'aide d'une mutation se faire pousser un bras qui est coupé ou une jambe qui est handicapée tout simplement.   [...] Je pensez créer un rétro virus, pour dupliquer des cellules seines, et contrer les maladies. rien de négatifs, ne devenez pas trop méchant quand même je n'y connais pas grand choses, je voudrais juste savoir si possible exemple. a l'aide d'une mutation se faire poussé un bras qui et coupé ou une jambe qui et handicapé tout simplement.   [...]

[Biologie Moléculaire] Electrophorèse (ADN sur Agarose) et Bromure d'éthidium

Je ne comprends pas trop là... Si l'on lit ce paragraphe, il est en contradiction avec ce que tu disais plus haut. Pour moi, à la vue de ce paragraphe, j'aurais l'idée que l'ajout de BET dans le tampon de migration va améliorer la visualisation des bandes.  [...] Si vous avez perdu du signal en laissant trop migrer votre ADN et que vous n'avez pas mis de BEt dans le tampon de migration, vous pouvez également récupérer ce gel et le mettre dans un bain de tampon de migration + BEt + agitation. Il faut incuber pendant un bon moment quand même, donc s'il vous reste de l'échantillon ça peut être plus rapide de refaire un gel et d'en redéposer (en laissant moins migrer cette fois ou en mettant du BEt dans le tampon cette fois ).  [...]

Quel avenir pour la biologie cellulaire ?

Vu sa petite taille, la quantité d'ADN qu'il peut transporter d'une cellule à l'autre dans sa capside (ultra-résistante) est toute petite. environ 4500 nucléotides (simple brin, cela prends moins de place). Cet ADN a été séquencé très rapidement, et deux gènes codants pour 7 protéines (merci l'épissage) ont été identifiés, puis confirmé par visualisation de ces protéines.  [...] Aujourd'hui on peut visualiser les cellules (et des protéines marquées) en temps réel, les filmer, pas seulement in vitro, mais également au sein d'un tissu, voire d'un organisme. Quand on s'intéresse à de la migration cellulaire, des déplacements de protéines, de la réorganisation de cytosquelette, c'est essentiel.  [...]

[Biologie Moléculaire] Résultats PCR

Malheureusement j'avais le témoin négatif mais comme j'avais 14 puits j'ai préféré passer les échantillons en priorité (alors que le témoins négatif peut nous renseigner en cas de flop... maintenant je le sais).  [...] -je manipule de l'ADN génomique qui a été purifié et visualisé dans un laboratoire très performant où toutes les conditions étaient optomisées...ce n'est pas le cas de mon laboratoire notez que le smear n'est pas apparu lors de la visualisation de mon ADN (dans le labo d'accueil) et que les bandes étaient très claires.  [...]