• Forum - Colonies, Boîte, Cellules, Culture

[Biologie Moléculaire] clonage

Bonjour, SVP je voudrais savoir comment on appel le fait de mettre des cellules eucaryote dans une boite de pétrie a une concentration assez faible (100cellules par ml) afin d'obtenir des colonies individualisées et les mettre en culture par la suite dans des puits de sorte a retrouvé une colonie par puits dans une boite de 24 puits par exemple.  [...]

[Microbiologie] Les différents systèmes de comptage de colonies en boîte de Petri

Compter les colonies sur une boite revient à compter le nombre de cellules vivantes de la culture liquide que l'on y a étalé.  [...] Parfois on compte les colonies à l'oeil nu, d'autres fois on dilue la culture avant d'étaler pour éviter d'avoir des tapis ou un trop grand nombre de cellules (genre 10'000 colonies par boite), en procédant par dilutions en série d'un facteur 10 à 10^-10 maximum je pense.  [...]

Densité bactérienne

Le nombre d'UFC correspond au nombre de cellules vivantes, il se calcule en étalant des dilutions d'une culture et en comptant le nombre de colonies sur chaque boite (1 colonie est issue d'1 cellule vivante de la culture liquide) et en faisant des moyennes.  [...] La densité optique, mesurée au spectrophotomètre, quantifie le nombre de bactérie dans la culture mais certaines cellules mortes sont comptées aussi.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de construction d'une banque d'ADNc

En fait, j'ai vérifié toutes les étapes depuis l'extraction de l'ARN jusqu'au fractionnement... j'ai aussi vérifié la compétence de mes cellules... toujours aucune colonies sur boite.  [...] Apparemment c'est la ligation qui bloque... en utilisant une ligase différente de celle du kit et en étalant les cellules après centrifugation (concentrées) je me suis rendue compte qu'il y a des colonies sur ma boite.  [...]

[Biochimie] Créer une souche résistante

Si vous avez acces a des E. coli non pathogene, vous pouvez etaler 100 ul d'une culture sur une boite contenant de la rifampicin. Le lendemain vous devriez avoir entre 20 et 50 colonies resistantes.  [...] Par contre on a un problème comment faire une culture sachant que les e coli sont partout Existe t-il un médicament ou qqe chose comme cela qui en contient.  [...]

Transformation foci

Ils parlent de transformation foci ( foyers de transformation, a priori). Ils comptent le nombre de ces machins là chez les différentes souches, et cela leur permet de donner une estimation de l'instabilité génétique et de la tendance des cellules à accumuler les mutations (beaucoup de transformation foci = grande instabilité génétique).  [...] Les foci de transformation (ou foyers de transformation en français) sont utilisés pour apprécier la capacité de transformation tumorale de cellules en culture. les cellules poussent en colonies, elles ont perdus l'inhibition de contact, etc.  [...]

aide pour culture bactérie

Pour récuperer des bactéries c'est assez simple. Vous prenez une boite de culture avec du milieu, vous mettez vos doigts dessus (pas fraichement lavés), vous incubez à 37°C durant une nuit (ou deux) et vous devriez voir des colonies. Vous devriez trouver des colonies jaunes qui correspondent à staphylococcus aureus (staphylocoque doré).  [...] Une autre méthode facile pour cultiver des bactéries est de partir d'un yaourt. quelque millilitres dilués et étalés sur une boite devrait vous fournir des belles colonies de bactéries lactiques. Moins contraignantes que les Staph, les bactéries lactiques sont par contre plus résistantes à un certain nombre d'antibiotiques.  [...]

[Génétique] Taux de survie ; mutagenèse

Notre matériel est une souche mutante ORT128 de Saccharomyces Cerevisiae, mutée pour le gène h de la chaine de biosynthèse de l'adénine, se qui la rend auxotrophe à l'adénine et lui confère également une couleur rouge-orangée (arrêt à production d'Amino Imidazole Ribotide de coloration rouge).   [...] Dans notre boite témoin, au bout d'une semaine nous avons pu comptabiliser 24 colonies, comme à l'origine une colonie est une cellule qui se fixe et se divise alors nous y avons mis 24 cellules.  [...]

[Divers] Bactéries

Christelle, ne nous laisse pas comme ça, moi aussi j'arrive pas à comprendre cette methode de calcul du nombre de cellules dans une cultur pûre(1seul type de colonie).  [...] Et je t'assure que diluer 10 5 fois n'est pas de trop... Si tu a quelques millions de bactéries dans ta culture de départ, il faut au moins diluer 10 5 fois pour avoir quelques colonies sur ta boîte (on m'a dit que le nombre devait être de 30 à 300 colonies sur une boîte pour que ce soit acceptable ).  [...]

dosage des protéines

j'ai penser aux méthodes de dosage par l'ONP mais concretement je ne sais pas si je dois prélever les bactéries de la boite de petri (colonies) et réaliser le dosage directement.  [...] a partir des colonies sur la boite de petri tu en prends une que tu mets dans un milieu de culture liquide (5ml) tu mets le tout a agiter la nuit a 37°C.  [...]