• Forum - Cellules, Méthodes, Classiques

Isoler un ARNm

Bon alors le mieux c'est de lyser les cellules par les méthodes classiques, avec en plus un inhibiteur des RNases. Après tu fais une centri (10000rmp pendant 10-15 minutes) pour enlever les membrane et les organites. Après le mieux est de faire agir une DNase après avoir fait agir un dénaturant de protéines (SDS, beta-mercapto,  [...] ..) qui enlèvera les protéines liées à l'ADN pour mieux le dégrader. Avec ce que tu récupère (ARN plus ou moins purs), tu peux ensuite faire un gel dénaturant puis hybrider une sonde spécifique de l'ARNm que tu veux purifier (Northern). Tu auras donc une seule bande si ta sonde est assez spécifique et que tu n'as pas perdu ton ARNm en cours de route (normalement non ).   [...]

Questions en immunologie , vaccination

1), dans les méthodes classiques de l'atténuation, il est écrit dans le cours que la voie d'administration peut modifier le caractère immunogenique des microorganisme, je n'arrive pas à comprendre comment cette voie intervient dans l'atténuation de ces microorganismes, je sais que cette méthode basée sur la localisation de contacte de l'Ag avec les cellules immunocompétents, mais je ne vois pas que la relation de l'endroit de ce contacte avec l'élimination de l'agent pathogène, de la bactérie ou le virus, en conservant l'intégrité structurelle.  [...] pour la première question. Oui la voie d'administration du vaccin, parce que il est indiqué parmi les méthodes classiques d'atténuation des microorganisme il y la voie d'administration avec la souche apparentés et la modification des milieux dans lesquels ile vivent les microorganismes.  [...]

sélection et OGM

surtout les OGM permettent d'inclure des gène d'origines étrangères (par exemple un gène animal ou bactérien) dans un génome de plante par exemple, chose qui n'a pas beaucoup de probabilité d'arriver lors des méthodes classiques d'améliorations.  [...] Les méthodes plus classiques se basaient sur des croisements et des sélections de phénotypes d'intérêt. celà ne veut pas dire que ces méthodes sont bonnes à jeter, celà se fait toujours. Mais finallement la technique des OGM est différente car elle s'appuie sur des connaissances fondamentales des gènes, de leur organisation et de leur mode d'expression.  [...]

[Biologie Cellulaire] auraient on identifier toute les organites cellulaires de tous les êtres vivants?

parce que avec les méthodes classiques de détection de ces organites on a toujours la question de est ce que la méthode de marquage n'a pas endommagé quelques chose dans la cellule à analyser cette question qui ce pose toujours depuis l'aube de la biologie.  [...] ne parlons pas du neurone humains, ça serait trop important pour qu'on l'oublie...qu'y a-t-il à propos des cellules germinales des plantes à propos des cellules somatique de ces même plantes à propos des protozoaires parasites par exemple a t on découvert une méthode pour provoquer une brèche sur le protozoaire parasite à fin de faire pénétré des antibiotiques.  [...]

BL21 pour production protéines et extractions

J'aimerais extraire mes proteines recombinantes de mon mutant BL21, pour cela j'aimerais eviter les methodes classiques d'extraction (tampon et sonication).  [...] Je rejoins l'avis de Flying, pourquoi vouloir éviter les techniques classiques La sonication ou la french-press sont quand mêmes les méthodes les plus adaptées à la lyse des bactéries.  [...]

Un peu de biologie cellulaire...

Justement non. C'était tellement difficile de récupérer des macrophages adhérents sur des supports classiques (beaucoup de dégats par les méthodes de grattage) que notre méthode n'avait finalement aucune alternative pour le but que nous nous étions fixés.  [...] C'était tellement difficile de récupérer des macrophages adhérents sur des supports classiques (beaucoup de dégats par les méthodes de grattage) que notre méthode n'avait finalement aucune alternative pour le but que nous nous étions fixés.  [...]

Peut-on rendre saine une cellule cancéreuse ?

C'est totalement inenvisageable à l'heure actuelle. Le génome des cellules tumorales est sévèrement altéré, bien plus que dans les maladies génétiques classiques. Par exemple les cellules HeLa dérivées de cellules tumorales humaines ont environ 80 chromosomes au lieu des 46 habituels, en raison de duplications de chromosomes, de cassures de brins d'ADN et autres aberrations.  [...] C'est totalement inenvisageable à l'heure actuelle. Le génome des cellules tumorales est sévèrement altéré, bien plus que dans les maladies génétiques classiques.  [...]

[Biologie Cellulaire] prolifération et différenciation cellulaire

Et par curiosité, c'est myéloid, c'est quoi exactement (je suis pas très informé sur les cancers des cellules du système immunitaire), des monocytes tumoraux Si c'est le cas comment caractériser leurs fonctionnalités, sont ils encore capable d'enclencher des processus de différenciation comme par exemple la transformation en cellules dendritiques par les cocktails de cytokines classiques ou regarde t'on d'autres paramètres.  [...] Si c'est le cas comment caractériser leurs fonctionnalités, sont ils encore capable d'enclencher des processus de différenciation comme par exemple la transformation en cellules dendritiques par les cocktails de cytokines classiques ou regarde t'on d'autres paramètres.  [...]

La resistance aux antibiotiques - Page 2

donc branle-bas de combat, il y a 10 000 phages à secourir en georgie, (accompagné de ses chercheurs et universitaire)... aux dernières nouvelle cette méthode est bien le remplaçant des antibiotiques classique... finit les problème de resistance, les problèmes de ventillation et de d'eau chaude contaminé par des bactéries.  [...] On voit aussi qu'un vétérinaire anglais était face à un problème avec des bovins. il a essayé de guerrir ses animaux par les méthodes classiques, ça n'a pas marché. Il a décidé d'utiliser la voie des bactériophages (voie plutôt négligée par les occidentaux et le reste du monde durant la première moitié du siècle dernier, sauf en Géorgie), après plusieurs mois de recherche il trouva la solution et il n'était pas au courant des méthodes géorgiennnes.  [...]

[Microbiologie] Méthodes d'identification

je cherche a savoir les methodes classiques et modernes d'identification des bacteries.  [...] Bonjour, actuellement ce sont surtout des tests rapides qui sont utilisées. Microgalerie ( api ), Sérogroupage, voir meme identification par rapport à l'ADN ( j'ai perdu le nom de la méthode..) qui je pense sera de plus en plus utilisée dans les années a venir.  [...]