• Forum - But, Procédé, Protéine

[Biochimie] Purification de la catalase du foie de rat.

On réalise une dénaturation des protéines pour les détruire sauf la catalase. On réalise des fractionnements sur une colonne d'hydroxylapatite et on mesure l'activité catalasique et l'absorbance pour vérifier la pureté. Je n'ai pas vraiment saisi l'intérêt de cette purification et du TP.  [...] Je pense que le but était tout simplement de vous montrer comment on procède pour l'étude d'une protéine (purification, dosage, test d'activité...). Et la catalase a dû être choisie parce que les personnes qui vous font ce TP ont un protocole déjà préparé pour cette enzyme.  [...]

[Divers] Albumine dénaturée

Pourriez vous m'expliquer également par quel procédé chimique ou physique ces filaments de protéine dénaturée se regroupent autour des bulles d'air.  [...] Je me trompe peut-être mais vu ta formulation il semblerait que 65 kDa soit pour toi le nom d'une protéine...C'est la masse de la protéine. Beaucoup de protéines font cette masse, et un anticorps fait plus de 65 kDa (il fait 150 kDa).  [...]

Grippe Mexicaine (grippe A-H1N1), vos questions. - Page 22

Je suis bien contente d'avoir fait le vaccin à mon fils (et à moi même, et donc ainsi protéger ceux que j'aime et par la même occasion le troupeau d'imbéciles non vaccinés et encore vociférants qui vont filer comme un seul homme, dès les vraies manifestations graves massives dans leur entourage, se faire vacciner, d'ailleurs ça a déjà commencé) car maintenant, il a assez d'anticorps pour mieux lutter contre la A qui, contrairement à ce que vous dites, va déferler dans les jours qui viennent avec l'arrivée franche du froid de l'hiver.  [...] L'utilisation de la dépêche sur la vaccination procède en effet d'un même procédé que ceux dénoncés par ailleurs. Je l'ai fait dans un but pédagogique, pour voir la réaction et c'est vu.  [...]

[Microbiologie] Bactéries

Le but de notre expérience était de mesurer l'impact du procédé de fabrication sur la détérioration du lait après la date de péremption. Sur les géloses, le lait pasteurisé a donné des petites colonies que l'on a pu compter. Cependant les géloses sur lesquelles on a étendu le lait filtré étaient couvertes de grosses colonies comme on le voit sur la photo.  [...] Sur la photo, on voit la gélose ensemencée par un millilitre de lait dilué à 1.1 000 000. Les dilutions précédant celle-ci ont formé des tapis uniformes sur les géloses. Les géloses ont été incubées pendant un peu moins de 48 heures. La seule explication que nous avons pu trouvée est que le type de bactéries contenu dans lait filtré croît beaucoup plus rapidement que le type de bactéries contenues dans le lait pasteurisé.   [...]

[Biologie Cellulaire] Isolement d'un compartiment cellulaire

-j'aurais dit pour tous types de cellules contenant des proteines (car fractionnement avec solvant, detergents et digestions enzymatique...) mais y a-t-il des proteines dans les chloroplastes.  [...] Sinon, pour la pureté de mes fractions, je fais un western blot pout vérifier que je n'ai pas de protéine mitochondriale dans ma fraction cyto, et inversement.  [...]

La sécrétion d'insuline

Aprés, pour le procéssus de fabrication en soit, je ne sais pas. Mais c'est une proteine donc, production de deux chaines, et assemblage... (je n'en sais pas plus).  [...] Je voulais savoir si la synthèse de nouvelles molécules d'insuline se fait selon le meme modèle que la synthèse des protéines.  [...]

[Biologie Moléculaire] Concentration d'une hormone dans une prise de sang

Il ne faut pas que je me goure car en faite le soucis avec les hormones c'est qu'on dose des protéines dans un ordre du nanogramme. Donc il faut vraiment une technique très sensible.  [...] En tout cas, le site est très intéressant et me permettra certainement de prendre de l'avance sur les prochaines années d'étude.   [...]

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes?

[Biochimie] Comment désagréger des protéines recombinantes.  [...] Comment désagréger des protéines recombinantes La protéine est produite dans E.coli puis je procède à une extraction protéique, une purification IMAC et un dessalage. Enfin, je la filtre à 0.2um avant de la tester sur cellules mais la protéine d'intêret forme des agrégats après quelques jours de conservations à 4°C ce qui m'oblige à relancer des campagnes de production.  [...]

[Biochimie] Protocole de purification des protéines membranaires

quelles sont les étapes de purification qu'on doit accomplir afin d'obtenir la protéine de notre choix (protéine membranaire) pure et intacte.  [...] À mon avis les étapes de purification qu'on doit accomplir afin d'obtenir une protéine pure et intacte consiste a procédé a une chromatographie échangeuse d'ion, HPLC, l'électrophorèse sur gel, électrophorèses bidimensionnelle.  [...]

[Biotechnologie] isolation d'hepatocytes par perfusion a la collagenase(help:-( )

bonjoure a tous, dans le but de faire une culture primaire d'hepatocyte, on procede dabord a l'isolation d'hepatocytes apartir du foie entier par la technique de perfusion a la collagenase(dissociation a la collagenase).pourriez vous m'eclairer sur cette technique.  [...] Broyer dans une passoire à thé avec le piston d'une seringue pour récupérer les cellules. Récupérer le broyat dans du PBS-SVF 5%-EDTA 0,1M froid et laver.   [...]