• Forum - BSA, Molécules, Anticorps

Saturation BSA pour purif de protéine His-tagged

Durant mon mémoire, j'ai du faire beaucoup de mise au point de mes WB, un des anticorps primaire donnait des bruits de fond terrible, Je suis arrivée à des résultats incroyable en enlevant la BSA d'un part et en la remplacant dans les différentes solution le lait gloria par le lait amersham.  [...] Merci Fatcha mais là je ne pense pas que ce soit un problème d'anticorps. L'anticorps que j'utilise est super bon et on a tous cette bande (je travaille avec 2 autres personnes sur la même thématique). Pour les western par contre j'utilise du lait Marvel. C'est vachement bien mais on ne le trouve qu'en Angleterre donc pas super pratique.  [...]

[Biochimie] Dilution en cascade

Je doit réaliser une gamme étalon de la protéine standard BSA (Bovin Serum Albumin) pour doser les protéines de mes échantillons avec la méthode.  [...] Ben dans ce cas là tu prends ta solution solution mère à partir du tube précédent. C'est à dire que tu commences tout d'abord par créer ton tube 5 puis pour faire ton tube 4 tu prélèves dans le tube en l'utilisant comme solution mère puis tu complètes avec du PBS jusqu'à avoir un volume final de 100 uL.   [...]

Lait, hormone de croissance et cancer

Et enfin, vous avez critiquez uniquement ma dernière intervention, je ne dis donc pas que des bêtises en ce qui concerne la structure des protéines, l'oncogenèse, les traitements anticancéreux... vous me rassurez.   [...] Je suis scientifique donc je suis tout à fait prêt à vous croire dans la mesure où vous me montrez ces fameuses publies que je n'ai pas trouvé. il y en a plusieurs datant du début des années 2000 mais une plus récente datant de 2006 annule les conclusions de toutes les premières en montrant que l'IGF-BP aurait un rôle éventuel contrairement à l'IGF qui n'en aurait pas (je vous ai donné le lien dans un message précédent).   [...]

Problème de traduction publication.

Microbial cDNAs are then selectively captured by hybridization to biotinylated microbial genomic DNA that has been prehybridized with blocking microbial ribosomal DNA (rDNA) fragments.   [...] On parle ici d'ARNr bloquants car, comme dans toute hybridation (ELISA, Western, Southern...) on previent toute liaison non specifique en saturant les sites de fixation aspecifiques avec des generiques (proteines de lait ou BSA pour ELISA et Western, ARNr ici).  [...]

[Biotechnologie] Ogm

Il y a belles lurettes que je n'ai plus fais d'elisa à la main donc là je n'ai plus de protocole précis. Pour les PCR c'est assez simple. Un mix 10 mM dNTP, BSA 1µg/µl, une paire d'oligos nucléotides dirigés contre votre gène d'intérêt (un sens et un anti sens), pour des 20 mer on mets 5 ng/µl.  [...] Vous mettez tout cela ensemble dans un tube et en route pour le thermocycler pour entre 25 et 40 cycles. Le réglage dépend de vos oligos et de vos attentes. Classiquement on a un préchauffage à 95°C durant 2-5 minutes. Puis les cycles (dénaturation 95°C 30 secondes, hybridation 60°C 30 secondes, et élongation 72°C 30 secondes).   [...]