• Forum - Biologie moléculaire, Protocole, Extraction, ARN

[Biologie Moléculaire] Protocole d'extraction d'arn et de sucres

[Biologie Moléculaire] Protocole d'extraction d'arn et de sucres.  [...] J'aimerai savoir si il existe un protocole qui me permettrai d'extraire les ARN et les sucres sur d'un même échantillons. En effet je vais travailler sur peu de matériel (apex de racines d'arabidopsis) donc si je pouvais tour faire à partir des même prélèvements.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN total sur fourmi unique

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN total sur fourmi unique.  [...] De plus, le culot d'ARN est d'une couleur marron très foncé. J'ai essayé de purifié avec une colonne de kit, mais le problème ne s'améliore pas, alors que ça marche sur d'autres organismes. Je suppose que mon problème provient de la cuticule de la fourmi (je filtre mes échantillons sur colonne Qiashredder pour éliminer les gros débris avant la séparation de phase), et j'aimerais savoir si vous aviez des idées pour améliorer mon protocole.  [...]

[Biologie Moléculaire] Manipulation de laboratoire - Extraction d'ARN

J'étudie l'effet des corticostéroïdes utilisés pour traiter l'ostéoarthrite sur ces ménisques. Dans mes manipulations, je tente d'extraire l'ARN des cellules méniscales dans le but d'analyser si des gènes tels que ceux du collagène ou de l'aggrecan subissent une modification de leur expression.  [...] En théorie oui, il y a des cellules (en faible densité) qui produisent toutes sortes de constituants de la matrice extracellulaire à l'intérieur (comme par exemple le collagène).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN bactéries lactiques.  [...] Merci pour les liens. J'ai déjà essayé le kit Qiagen sans succès Je comptais justement essayer un protocole similaire à celui de Pasteur aujourd'hui, ca va me permettre de comparer et complèter.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN par la méthode phénol/chloroforme

[Biologie Moléculaire] Extraction des ARN par la méthode phénol/chloroforme.  [...] Le seul rôle que je connais pour le chlorure de césium, c'est la centrifugation par gradient mais ce n'est pas une obligation pour une phénol / chlo.   [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN ethanol 70%

Je prépare des TP de biologie moleculaire à la fac, dont un sur l'extraction des ARN. Après avoir extrait l'ARN des cellules avec du TRIZOL, on obtient 2 phases, la phase organique (phase inferieure avec phénol et chloroforme) et une phase aqueuse avec les ARN.  [...] De façon un peu plus moléculaire, l'ADN précipite car il n'est pas soluble dans l'alcool car celui-ci le déshydrate, tandis que les sels que l'on ajoute pendant l'extraction neutralisent les charges négatives de l'ADN (l'apport de charges positives permet la création de solides).  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN - Différents Time points

Je dois faire des extractions d'ARN à différents time points espacés de quelques semaines. Le but étant de regarder l'évolution de l'expression d'un gène au cours du temps (RT-qPCR).  [...] Sauf que pour des raisons techniques, j'aimerai faire les extractions à chaque time points avec le même protocole d'extraction, bien sûr.  [...]

[Biologie Moléculaire] ADN ARN extraction

J'ai un petit problème en TP de biologie moléculaire, c'est lors de l'extraction de l'ADN et de l'ARN. Ma question est. pourquoi l'ADN, à pH basique se retrouve en phase aqueuse, et pourquoi l'ARN se retrouve en phase aqueuse (tous les 2 lors de l'extraction bien entendu).  [...] Attention. pour faire des extractions d'ARN, il faut un phenol acide, et pour l'ADN un phénol tamponné. Si tu prends un phenol acide pour une extraction d'ADN, tu as un rendement très bas, car l'ADN reste dans le phenol et non dans la phase aqueuse.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction des acides nucléiques

J'ai un petit problème en TP de biologie moléculaire, c'est lors de l'extraction de l'ADN et de l'ARN. Mes questions.  [...] 2-pourquoi on utilise ph basique lors des extraction des acides nucléiques.  [...]

[Biologie Moléculaire] Extraction ARN Lignée cellulaire et Bactérie

J'ai regardé un peu ce qui se fait et bien souvent, il s'agit d'une extraction ARN classique qui inclue les deux ARN. J'ai également remarqué qu'il était aussi possible d'éliminer 90% de l'ARN eucaryotes avec un système de colonne mais là j'avoue que j'ai peur du prix (je me trompe peu être). Enfin bref qu'es qui vous semblent le mieux.  [...] je fais de la culture cellulaire sur des HCT-8 et si je ne me trompe pas les HT-29 sont un type relativement proche. Les HCT-8 résistent à beaucoup de chose et se redéveloppent très bien après 1h de Trypsine et un petit tour à la centrifugeuse. Mais à mon avis de toute façon si tu ne veux pas suivre la technique sur colonne il va falloir que tu tatonnes un peu pour trouver une technique qui te convienne... en plus c'est ça qui est drôle non..p.   [...]