• Forum - Biologie moléculaire, Migration, ADN

[Biologie Moléculaire] Temps de migration de long fragments d'ADN

Je pense pas pouvoir m'aider de la migration du bleu, il me semble avoir lu quelque part qu'il se comportait comme un fragment de 300 à 1000 pb.  [...] Pour les grands fragments il faut passer par une électrophorèse en champ pulsé pour les séparer convenablement dans un gel d'agarose. Pour le gel il me semble évident qu'il faut prendre le moins concentré, 0,5-0,6%. Le temps de migration c'est au feeling. Vous faites migrer une ou deux heures, vous regardez sous UV, si ce n'est pas bon, vous refaites migrer etc.  [...]

[Biologie Moléculaire] migration protéine sds page

J'ai réalisé une électrophorèse sds page mais j'ai laissé migré trop longtemps les protéines, cela a-t il une influence au niveau des bandes lors de la révélation.   [...] Pour compléter, si tu laisses migrer trop longtemps, les protéines les plus petites (celles du marqueur comprises) vont sortir de ton gel. Et tu ne les verras donc pas lors de la révélation vu qu'elles ne seront plus là, mais en train de nager dans ton tampon de migration.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR: dépôts qui restent dans les puits lors de la migration

[Biologie Moléculaire] PCR. dépôts qui restent dans les puits lors de la migration.  [...] -une 2nde nested, pour laquelle le PM attendu est sensiblement le même que pour la 1ere PCR et qui me permet simplement d'ajouter 4nt à mon gène pour le clonage (utilisation d'un kit).   [...]

[Biologie Moléculaire] probleme de migration dans une electrophorese

donc on a produit la proteine et on a recolté plusieurs échantillons qu'on voulais faire migrer à la fin du cycle pour voir où il y en a le plus et où il est le plus pure.   [...] le problème est lors de la migration les dépôts dans les puits on commencé à migrer dans le gel de concentration mais au bout d'un moment la migration.  [...]

[Biologie Moléculaire] PCR : migration après amplification (sans digestion enzymatique)

[Biologie Moléculaire] PCR. migration après amplification (sans digestion enzymatique).  [...] On me demande de schématiser le résultat de la migration éléctrophorétique obtenue après amplification par PCR ainsi que la taille du produit d'amplification.  [...]

Acides Nucléiques

L'ADN est chargé négativement. La séparation se fait en fonction de la taille des fragments qui diffère d'un seul nucléotide entre chaque bandes les plus proches visible sur le gel.  [...] Salut. Au moment de la migration, la charge est identique pour chaque fragment d'ADN car la préparation de ton ADN pour l electrophorese sert justement a masquer la charge réel de tes fragments afin que ces derniers aient tous la même charge fictive et migrent uniquement selon leur poid moléculaire.  [...]

[Biologie Moléculaire] Migration SDS page en "sourire"

Je rencontre récemment un problème avec mes migrations SDS page. la migration ne se fait pas de manière droite, mais remonte de chacun des deux cotés, formant un front de migration en sourire, très génant s'il y a des échantillons placés aux extrémités.  [...] Cela cause une migration plus lente des échantillons des puits périphériques caractérisé par des bandes protéiques ayant migré plus rapidement au centre du gel, créant un patron ayant la forme d'un sourire... Pour assurer un refroidissement uniforme de tout le gel, diminuer le voltage et augmenter la durée de migration.  [...]

[Biologie Moléculaire] Problème de migration électrophorèse (produits bloqués dans les puits)

J'ai vérifié tous mes produits et ils sont tous corrects. Dans le doute j'ai fait une autre migration avec les produits issus d'une nouvelle PCR et je n'ai eu ce problème que sur un seul échantillon.  [...] salut j ai un petit rapport concernant notre TP en biomoléculaire, J aimerais que vous me disiez ce que vous en penser en laissant vos commentaires. Merci.  [...]

[Biologie Moléculaire] élèctrophorèse (ADN)

Donc, si tu n'observes pas de bande dans un puits c'est que le poids moléculaire de l'ADN fragmenté n'est pas dans la fourchette de taille observable par le gel d'agarose calibré (autrement dit, ton ADN est tellement petit qu'il a pu passer a travers ce maille et que lors de la migration, il a carrément quitter le gel en migrant vers une électrode).  [...] Par contre, j'ai du mal m'exprimer, ce que je n'arrive pas à expliquer c'est pourquoi à T0 on voit une migration avec nottament une barre près du puits, à T1 la migration est de même longueur sauf que la barre près du puits apparait moins nettement, et à T2 la migration est bien visible aussi mais il n'y a plus de barre tout près du puits.  [...]

[Biochimie] Bande inconnu sur gel d'agarose

(Ce type d'électrophorèse a été développé par Schwartz et Cantor en 1984 afin de séparer les grandes molécules d'ADN (. 50 kb) que l'électrophorèse classique en gel d'agarose ne permet pas de résoudre, même en diminuant au maximum la concentration d'agarose (en dessous de 0.  [...] 4% les gels sont impossibles à manipuler). La porosité d'un gel d'agarose classique est inférieure au micron alors que la longueur d'une molécule d'ADN de 50 kb complètement étirée est d'environ 18 microns. La vitesse de migration des molécules d'ADN dont la taille est supérieure à 20 kb n'est plus affectée par l'effet de filtration, elle est constante quelle que soit la taille de la molécule.).  [...]