• Forum - Bactéries, Colonies, Tapis, Plasmide

[Biologie Moléculaire] Probleme de ligase?

1/ Calcule to efficacité de transformation, si elle est en dessous de 10^6 colonies /ug de pUC18 (ou un plasmide de petite taille équivalent), jette tes bactéries et reprépares-en d'autres (ou achètes-en d'autres). Je vois trop d'étudiants me dire j'ai transformé 1ug de plasmide et j'ai un tapis, donc mes bactos sont OK.  [...] Des bactéries à 10^4 colonies/ug donneraient aussi un tapis avec 1ug de plasmide, pourtant elles seraient impropre à la plupart des constructions.  [...]

[Microbiologie] Bactérie dans le pot de choco

Ce sont des petites colonies rondes grises, à bord régulier, je dirais plus brillantes que mate. Je vais demander mardi prochain pour pouvoir faire un GRAM au laboratoire de microbiologie. Est-ce que ces bactéries pourraient être pathogènes.  [...] en montrant à ma prof de microbiologie oui ce sont clairement des bactéries, pourquoi parler vous de lipides vous voyez bien les tapis de colonies, elles sont identiques sur les boîtes de pétry.  [...]

Problème sélection kanamycine

J'essaie de sous cloner un gène dans le vecteur pADTRACK-CMV, donc un plasmide avec deux ORF, mais surtout une résistance à la kanamycine. Malheureusement jusqu'à maintenant j'obtiens toujours des tapis complet de colonie absolument partout et surtout même dans mes controles ne contenant que des bactéries (non transformées.  [...] Les HB101 je précise ne poussent pas sous forme de tapis, elle semblent plus sensible à la kanamycine que les DH5alpha, mais est ce que ces bactéries sont de bonnes bactéries.  [...]

[Biologie Moléculaire] extraction ARN

Bas si tu fais pousser un tapis bactérien tu devrais avoir des tonnes de bactéries que tu pourras récupérer. Je ne vois pas vraiment où se situe le problème.  [...] Toi, tu dois travailler sur les actinomycètes ou des bactéries pires encore. tu peux essayer de resuspendre tesz colonies/tapis dans de l'eau ou du Tris-EDTA (pour l'eau, absolument traitée au DEPC) et précipiter tout de suite les acides nucléiques.  [...]

[Microbiologie] Bactéries

Sur la photo, on voit la gélose ensemencée par un millilitre de lait dilué à 1.1 000 000. Les dilutions précédant celle-ci ont formé des tapis uniformes sur les géloses. Les géloses ont été incubées pendant un peu moins de 48 heures. La seule explication que nous avons pu trouvée est que le type de bactéries contenu dans lait filtré croît beaucoup plus rapidement que le type de bactéries contenues dans le lait pasteurisé.  [...] Ainsi, les tapis formés sur les géloses ne voudraient pas dire que la quantité de bactéries est beaucoup trop grande, mais bien que les colonies formées sont très grosses, ce qui remplit rapidement la surface de la gélose. Croyez-vous que cela est possible Et si oui connaissez- vous le type de bactéries qui pourraient causer ces grosses taches Car je n'ai rien trouvé en recherchant sur les types de bactéries. Merci de bien vouloir nous éclairer.  [...]

[Microbiologie] milieu de culture

Bah déjà, on n'étudie que UN clone lors d'un isolement, et il se peut que morphologiquement, tes colonies se ressemblent beaucoup mais qu'il s'agit d'un mélange. Sélectif ne veut pas dire qu'il n'y a qu'une population qui pousse dessus mais qu'on empèchent les autres de pousser dessus.  [...] Vous faites des stries pour diluer votre quantité de prélèvement et pouvoir isoler de jolies colonies et non pas vous retrouver avec un tapis bactérien (charge du prélèvement trop importante) prenant toute votre boîte. [Le tapis bactérien vous le faites pour l'antibiogramme en mettant le milieu liquide contenant les bactéries sur toute la surface de l'antibiogramme.].  [...]

[Microbiologie] Dénombrement

Parce qu'à cause du diamètre standard de la boîte de pétri, les colonies qui se développent le plus vite inhibe la croissance des autres (chimiotactisme) d'une part, d'autre part lorsqu'il n'y a pas de chimiotactisme inhibiteur de croissance on se retrouve vite avec des colonies fusionnées (= tapis bactérien).  [...] Le but étant de dénombrer le nombre d'unités bactériennes (bactérie, chaîne, tétrade, amas...) présentes dans votre aliquote par étalement, puis croissance (formation de colonies) de chacune de ces unités.  [...]

[Microbiologie] bactérie présente dans les cremes cosmetiques

Récupérer toutes les colonies sur ta peau, les cultiver et identifier Gros boulot, tu les cultives, bien. Sur quel milieu Un milieu riche, tu auras un tapis bactérien inutilisable, un milieu sélectif tu n'auras pas tout. Plusieurs milieux sélectifs Bouffe temps et tu n'auras pas tout.  [...] De plus, qui te dit que la composition de ta flore bactérienne est normale, ou que les souches qui la composent ne sont pas atypiques Ah de plus si ce n'est pas pour les mains, mauvaise idée, les compositions de flore sont différentes selon les endroits du corps, et même de la peau.  [...]

[Microbiologie] identification d'une bactérie

j'ai oublié de vous dire, aujourd'hui j'ai aussi constaté un petit tapis de colonies surrelevé de couleur rose-rouge avec le centre brun (H2S+), les colonies avaient l'air un peu sèche sur Salmonella-Shigella.  [...] Man+. peut-être, mais j'y crois pas trop. Je ne sais pas trop comment les entérobactéries poussent sur chapman. Es-tu sûr qu'il y a des colonies, et que ce sont bien elles qui font virer l'indicateur coloré.  [...]

Culture bactérienne sur milieu + IPTG

Ma seconde question peut sembler étrange, mais en fait l'idée serait de faire pousser des bactéries en tapis avant d'activer la beta-gal dans une partie de ce tapis.  [...] je travail actuellement avec l'IPTG pour induire le géne d'un cytochrome, l'IPTG je l'ajoute après que les bactéries soit à l'approche du plateau (0.9 OD 600nm) l'IPTG ne ralentit pas apparament la croissance, c'est plus la protéine surexprimée qui peut la ralentir.  [...]