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[Biologie Moléculaire] micro damier à adn

a) Le puits prend une couleur jaunâtre tirant soit vers les rouges, soit vers le vert. L'ARNm du puits est exprimé dans la cellule saine comme dans la cellule cancéreuse, mais dans des proportions différentes selon la couleur vers laquelle tire le jaune.  [...] b) Le puits est vert. L'ARNm n'est exprimé que dans les cellules saines. Le gène correspondant est donc inhibé (voir absent s'il apparait par mutation) dans la cellule cancéreuse.  [...]

[Biologie Moléculaire] les puces à ADN

b) Le puits est vert. L'ARNm n'est exprimé que dans les cellules saines. Le gène correspondant est donc inhibé (voir absent car il n'est pas apparu par mutation) dans la cellule cancéreuse.  [...] c) Le puits est rouge. L'ARNm n'est exprimé que dans les cellules cancéreuses. Le gène correspondant y est donc activé (alors qu'il était inhibé dans la cellule saine, voir absent si il n'y a pas eu mutation).  [...]

[Biochimie] cDNA - regulation des genes

''Chacun de ces cercles est un CDNA qui est fixée au fond du puits, on réalise un hybridation dont la couleur va être proportionnelle a la quantité des ARNm ds la cellule qui ns intéresse.  [...] Un ADNc (= ADN complémentaire) correspond à la copie ADN d'un ARNm mature (sans les introns). Ces ARNm sont les produits témoignant de la régulation et de l'expression du génome d'une cellule.  [...]

[Biologie Cellulaire] lame de malassez

Il est aussi important de savoir si 30000 est le nombre de celulles que tu as initialment mis dans ton puits (avant la croissance) ou si c'est le résutat de ton comptage par la cellule de malacez.  [...] En fait au départ j'ai une plaque de culture à 6puits et 2mL de milieu de culture par puit avec 30000 cellules par puit ca c'est mon énoncé je suis d'accord avec toi ca fait vraiment pas beaucoup de cellules c'est ca qui m'embrouille un peu l'esprit et de la mon prof trouve d'après malassez qu'il y a 4*10exp6 cellules dans 6mL je ne vois pas dutout d'où ca vient.  [...]

[Biologie Cellulaire] Test cytotoxicité MTS

qqun pourrait-il m'aiguiller je ne connais pas le nombre de cellule optimum que je dois ensemencer dans ma plaque 96 puits pour réaliser ce test, pour les cellules HT29 N je dois ensemencer a 5000 cellules par puits.  [...] mais qu'en est-il pour les cellules HT29 SN38 et les HT29 G- vu qu'il sagit toujours de cellules colorectales cancéreuses mais dans des conditions différentes ( déplété en glucose, sensible et résistante au SN38) le nombre de cellule est identique.  [...]

Question :

J'ai comme modéle de cellule des CHO-K1, et pour atteindre mon but, j'ai penser faire des tests d'adhèrences sur microplaquettes avec des fibronectines par exemple comme recepteur dans les puits.  [...] 2 manips, en utilisant des cellules CHO-K1 traitées avec des enzymes qui vont cliver les parties extra mb des integrines ( j'ai pensé également à des glycohydrolases mais ce n'est pas assez spécifiques). Et en utilisant des CHO-K1 non traités avec l'enzymes, les microplaquettes peuvent etre traité avec le réactif de bradford on peut déterminer la concentration de proteines par spectro donc aux nombre de cellules dans les puits.  [...]

Besoin d'aide urgent !

J'avais 2300 cellules/uL, mon prof me demande pour une plaque de 32 puits combien de cette solution de cellule je dois mettre sachant que dans 1 puis je dois mettre 1x10^5 Celllules pour 100uL.  [...] Ton prof te demande simplement combien as-tu besoin de ta solution cellulaire pour remplir une plaque de 32 puits à 1x10e5 cellules / 100µL soit 3.2x10e6 cellules en tout. Il suffit de diviser ce nombre par ta concentration cellulaire et tu auras le volume dont tu as besoin.  [...]

[Biologie Cellulaire] Problème culture cellulaire HEK293 en plaque 96 puits

Le milieu des puits est alors changé et les cellules sont ensuite incubées 24h avec un milieu contenant des antibiotiques (Pen-strep) ainsi qu'une molécule cytotoxique. Le souci c'est que le lendemain, je retrouve dans mes puits contrôles des cellules disposées en auréole et complètement agglomérées en périphérie (rien ou presque au centre).  [...] On dirait que mes cellules se sont décrochées lors du changement de milieu pour s'agglomérer sur les bords... J'avoue que j'ai du mal à comprendre surtout que j'ai été assez délicat pour éviter de décrocher les cellules (tips au fond du puits, coincé sur le bord, et aspiration du milieu doucement à la pipette puis dépôt du nouveau milieu en plaçant le tip sur la face interne du puits).  [...]

[Biologie Moléculaire] Transcriptome

Si j'ai bien compris, on utilise une puce à ADN et dans chaque puits on met un gène amplifié. D'un autre coté on crée les cibles (extrait d'ARNm qu'on va faire retrotranscrire et marquer par fluorophore pour obtenir un ADNc marqué). Si par exemple on a deux conditions.  [...] Mon prof a dit que qu'on connait le gène qu'on a mis dans chaque puits et après comme on connait la séquence du génome de l'organisme qu'on utilise, on peut identifier les promoteurs... mais si un gène est la séquence non transcrite (promoteur) + séquence transcrite.  [...]

[Biologie Cellulaire] Culture cellulaire MDCK

ici le ratio 1.5 ou 1.10 t'indique la dilution qu'elles vont supporter lors du passage. En dessous de ce ratio il risque de ne pas avoir assez de cellule pour que la culture reparte. Ils t'indiquent aussi les conditions de culture, soit approx 1-2x10^3 cell/cm2 parce que tu peux les cultiver dans des flasques de 25cm2 ou de 75cm2 ou encore plus grande ou encore en plaques à puits.  [...] Ensuite quand ils parlent de production de carcinoembryonic antigen (CEA) c'est que ces cellules produisent cette protéine. Pour faire short, le CEA est une protéine de la famille des adhésines qui est normalement exprimée uniquement pendant la vie embryonnaire.  [...]