• Forum - ARN, Protéines, Cible

[Biologie Moléculaire] Promoteurs altérnatifs

Le prof nous a dit au cours qu'un gène pouvait avoir plusieurs promoteurs et donc plusieurs départ de transcription possibles. Du coup pour un gène donné nous obtiendrons plusieurs ARN messager. Ma question est. Est ce que ces ARNm coderont pour la même protéine ou on obtiendra différentes protéines.  [...] Ca peut-être la même protéine mais avec des petities subtilités. Par exemple selon l'épissage de l'ARN mess tu peux avoir des protéines qui n'auront pas le même tissus cible ( foie, rein, poumon,...). L'épissage alternatif peut jouer sur les fonctions des protéines.  [...]

[Biologie Cellulaire] Ciblage des protéines

En fait j'ai beaucoup de mal à imaginer que dans une cellule 100% des produits arrivent jusqu'à leur cible. Du coup ma question est la suivante. lorsqu'un ARN est traduit en protéines, combien de ces protéines arrivent réellement jusqu'à leur cible finale et ne sont pas perdus ou dégradés en route en tombant par erreur sur une autre molécule avec laquelle elles auraient interagit.  [...] En conclusion. les protéines (et autres composants) n'interagissent pas avec tout, juste avec leur cible. Le ciblage jusqu'à la cible est complètement aléatoire, même s'il peut y avoir des aides (contraindre la protéine à un compartiment cellulaire particulier).  [...]

[Biochimie] Synthese des proteines

c'est encore une question peut-être bête, mais je ne m'embrouille... Bref est ce que ce sont les ribosomes libres dans le cytoplasme ou le REG qui fait la synthèse des proteines à visée extracellulaire ( exportation ).  [...] Les ARN messager de telles protéines portent une séquence cible qui indique qu'elle est destinée à être sécrétée, elle est donc traduite par les ribo du REG et insérée à l'intérieur du REG en même temps.  [...]

Contre le SIDA, idée saugrenue

les antigènes (protéïnes reconnues par les anticorps) à sa surface mutent très facilement. l'antigène permettant d'injecter son ARN dans la cellule cible est caché par une autre protéïne, ce qui la rend inatteignable par un anticorps. meme avec des anticorps efficaces, le virus ne disparait pas completement et peut donc relancer l'infection lorsque le taux d'anticorps baisse, et encore plein de viciosités dans le genre.  [...] En réalité, le récepteur CD4 seul est insuffisant pour une pénétration du VIH dans la cellule. Des co-récepteurs, comme les deux protéines transmembranaires nommées CXCR-4 et CCR-5sont nécessaires. Ces 2 co-récepteurs ne sont pas des protéines spécifiques des lymphocytes T4.  [...]

[Biologie Moléculaire] Les différents types d'ARN

.. Mais chez les mammifères les ARNs longs double brins sont reconnus comme viraux déclenchent une réponse de type interféron. Donc quand on transfècte des siRNAs en labo, on ls transfecte directement sous forme de petits ARNs. De plus, les siRNAs présentent une séquence parfaitement complémentaire à l'ARNm cible et entrainent le clivage et la dégradation de l'ARNm.  [...] Le micro-ARN va aussi présenter des mésappariements avec la séquence de l'ARNm cible, en en général il a été montré une inhibition de la traduction plutôt qu une dégradation de l'ARNm. Les micro-ARNs sonstituent une forme de régulation supplémentaire de l'expression des protéines.  [...]

[Biologie Moléculaire] augmentation du taux d'ARN mais non celui de la protéine

quand effectue une stimulation à l'aide d'un ligand qui induit une augmentation du taux d'ARN d'un gène cible alors que la protéine est non détectée en western-blot, qu'est ce que vous en pensez qu'est ce vous proposer comme expériences (stabilité ARN...) pour expliquer tout ça.  [...] C'est pas juste une dissociation entre la transcription/stabilité de l'ARNm et la synthèse/stabilité des protéines. C'est qu'il y a deux résultats non concordants.  [...]

[Biotechnologie] Interférence à l'ARN

Elle a donc des systèmes pour les reconnaître, dont fait partit DICER. Cette protéine et l'ARN double brin va alors activer Ago, du complexe RISC. Ago va alors séparer l'ARN double brin en deux simple brin, garder la séquence d'ARN guide, qui permet de reconnaître l'ARN cible (généralement, la séquence du siRNA) et dégrader l'ARNm.  [...] - les shRNA, pour small hairpin. Ces ARN interférants sont aménés dans la cellule par transfection (plasmide) ou infection (lentivirus, AAV, adénovirus). Il y a ainsi production par la cellule de shRNA, dirigé contre l'ARNm de la protéine d'interêt. Pour détailler un peu plus les shRNA, ils sont transcrit comme n'importe quelle protéine, mais ils possèdent la particularité d'avoir une séquence complémentaire en mirroir.  [...]

[Biologie Moléculaire] miRNA (ou microARN) - Page 2

Oui voilà, en fait le miRISC se fixerait en 3'UTR de l'ARNm et arrivé à ce niveau la traduction est bloquée. La proteine n'est pas libérée et reste dans le ribosome. C'est générallement cette possibilité qui est privilégié chez les miARN lorsque la complémentarité miARN-ARNm n'est pas parfaite.  [...] D'après ce que j'ai compris, les mi/siRNAs inclus dans un complexe RISC nucléaire, se fixent à une séquence d'ADN complémentaire. Une des protéines du RISC recruteune histone-méthyltransférase, qui méthyle l'histone H3 (sur la lysine 9). Cette modification induit la fixation, sur les histones H3, de la protéine HP1 (Heterochromatin Protein 1), qui a tendance à former des agrégats, et donc à rapprocher les nucléosomes, ce qui condense la chromatine.  [...]

[Biologie Moléculaire] siRNA

Normalement si le siRNA est correctement conçu, à ma connaissance, un seul est suffisant. Je pense qu'il est même préférable d'en utiliser un seul. En revanche lors de la commande de SiRNA il arrive que le fabriquant fournissent 4 siRNA à tester peut être est ceux à quoi tu fait allusion.   [...] Pour tester l'efficacité tu peux réaliser une qPCR sur le gène cible du SiRNA l'ARN étant dégradé si le siRNA est éfficace. Tu peux aussi faire un Western Blot pour observé que l'expression de ta protéine est bien éteinte.  [...]

[Biologie Moléculaire] délai de temps entre la transcription et la traduction

en termes d'ARN, j'observe une augmentation d'expression de mon gène cible de manière significative aprés 3 heures de traitement. à quelle moment environ verrais-je une augmentation au niveau protéique.  [...] ce que j'ai constaté après mon WB c'est que l'augmentation d'expression de la protéine cible se fait à 14 h.. légèrement à 6h (trés léger) et plus rien à 24h.  [...]