• Forum - Apparition, Fragments, ADN

[Biologie Cellulaire] Marquage à l'iodure de propidium pour suivi du cycle cellulaire

Si j'ai bien compris le principe de cette méthode, la perméabilisation des cellules entraîne la sortie des fragments d'ADN de 180 bp, ce qui fait que l'intensité de fluorescence des cellules en apoptose est inférieure à celle des autres cellules (puisque proportionnelle à la quantité d'ADN), d'où l'apparition d'un pic en subG1.  [...] Pour le marquage IP, comme tu l'as dit, les cellules en subG1 le sont surtout à cause d'une fuite des fragments d'ADN clivés hors de la cellule. Seulement, le clivage régulier de l'ADN internucléosomal est typique d'un processus apoptotique. Dans le cas des autres morts cellulaires, la dégradation de l'ADN peut intervenir plus tardivement dans le cas d'une mort cellulaire par autophagie et/ou est plus anarchique comme dans le cas d'une nécrose.  [...]

[Biologie Moléculaire] Technique de laboratoire en biologie moléculaire

En pratique, l'analyse commence par une PCR classique afin d'amplifier le fragment étudié. Si la région amplifiée présente un polymorphisme hémizygote, deux types de fragments, correspondant à l'allèle sauvage et à l'allèle polymorphe, seront présents dans le produit de PCR.  [...] Les hétéroduplexes sont en fait des doubles brins d'ADN formés d'un brin venant de l'allèle sauvage et d'un brin issu de l'allèle polymorphe. La formation de tels fragments d'ADN entraîne alors l'apparition d'un mismatch ou mauvais appariement à l'endroit où est localisé le polymorphisme.  [...]

Bio mol

PJ. un schéma en bio est toujours beaucoup plus clair..). Sur le brin retardé, on voit donc l'apparition de petits fragments d'ADN, les fragments d'Okazaki.  [...] Pour répondre à ta question, tu dois connaitre la processivité (il me semble...) de ton enzyme de réplication, cad le nombre de nucléotides répliqués par minute. Ainsi, tu sauras combien de fragments d'Okazaki tu génères par minutes et donc le nombre de ligation.  [...]

[Evolution] processus des mutations génétiques.

quelle est le processus exact de l'apparition de nouveau allèle je connais la dérive génétique et la modifications des fréquences allélique et génotypique, mais pour que deux espèces différente mais proche morphologiquement et physiologique ce sépare d'un même ancêtre commun il faudrait pas qu'un seul nouveau allèle apparaît mais plusieurs.  [...] si le résultat et l'apparition de nouveau gène, ce qui est pour moi fortement improbable parce que le disign intelligent d'une bactérie ne peut pas lui permettre de muter de cette manière. ceci est d'autant plus vrai, si je trouve des difficultés à insérer les fragments d'ADN qui vont constituer la mutation artificielle.  [...]

[Biologie Moléculaire] ARNt structure

Mon prof de fac est passé très rapidement sur la structure des ARNt et une chose me paraît étrange en relisant mes notes, je cite.   [...] La structure secondaire ressemble à un trèfle, stabilisé par des appariements de bases qui forment des fragments d'ADN double brin.  [...]

Phénomène de réplication (eucaryotes)

Durant la phase d'initiation, l'ADN polymérase alpha synthétise l'amorce ARN-ADN de chaque brin continu et de chaque brin discontinu. Cette amorce correspond à un fragment d'ARN d'une dizaine de nucléotides et un fragments d'ADN de 20 à 30 nucléotides.  [...] 3', pour respecter la 1ère loi de la réplication). Ces blocs de nucléotides sont appelés fragments d'Okazaki, et chaque fragment d'Okazaki fait individuellement appel à une synthèse en 3 étapes comme décrite plus haut (c'est-à-dire Primase-Polymérase alpha-Polymérase delta).  [...]

TPE sur l'ADN aide pour l'électrophorèse :)

L'électrophorèse consiste a faire migrer des fragments d'ADN dans un gel grace à un champs électrique. L'ADN étant chargé négativement les molécules vont se déplacer vers la cathode. Comme le gel, consiste en un maillage, les grandes molécules sont plus retenues que les petites.  [...] arrêtez moi si je me trompe mais il me semble qu'il faut généralement amplifier par PCR l'ADN (ou plutôt les fragments) avant de la soumettre a une électrophorèse non ou alors c'est uniquement le cas pour l'arn.  [...]

replication

Les fragments d'Okazaki sont l'ADN synthétisé à partir des armoces ARN. C'est après le passage de l'ADN-pol-1 qu'en effet la ligase va relier les fragments pour les unifier en un seul brin d'ADN. Les fragments d'Okazaki sont mixtes. ils contiennent encore l'amorce ARN mais surtout la séquence d'ADN complémentaire nouvellement synthétisé par complémentarité.  [...] Les fragments d'Okazaki sont d'ailleurs synthétisés par l'ADN-pol-3 dans le même sens 5' ' 3' (par fragments - d'Okazaki ) que pour le brin synthétisé continuement.  [...]

[bio mol] pUC et LacZ

Cette région est placée en amont du gène de lacZ (d'une partie seulement en fait, lacZalpha) de sorte que si le fragment à cloner a intégré le vecteur, il décale le cadre de lecture de ce peptide qui n'est plus synthétisé. donc en présence de X-gal, pas de coloration bleue (voir explication plus haut).  [...] si on connais la protéine synthétisé, on la digère avec une protéase puis séquencage aa ce qui permet de retrouver le fragment d'adn et donc le clone.  [...]

[Biologie Moléculaire] Southern blot !!!

Bonjour tout le monde... A quoi sert svp l'adn du sperme du saumon dans la technique du southern blot et aussi par conséquent, à quoi sert la préhybridartion... merci de me répondre.  [...] Plus précisément, si on ne l'utilise pas, on a des intéractions nitrocellulose-sonde parce que la membrane est chargée positivement (liaisons hydrogènes ou électrostatiques ) et que la sonde est ainsi bloquée.   [...]