• Forum - Anticorps, Technique, Protéines

[Biologie Moléculaire] Techniques de transfert

La technique utilise l'électrophorèse sur gel de polyacrylamide pour séparer les protéines, préalablement dénaturées, selon leur masse. Les protéines sont ensuite transférées depuis le gel sur une membrane (typiquement en nitrocellulose), où elles sont exposées à un anticorps spécifique de la protéine d'intérêt.  [...] Il est possible grâce à cette technique de détecter la présence d'une protéine dans un tissu, d'évaluer sa taille, sa concentration, les variations de cette concentration, effectuer des comparaisons de concentrations entre différents groupes, etc.  [...]

[Biotechnologie] cytométrie de flux/épifluorescence

la cytometrie de flux est une technique qui permet de détecter la taille, la granulosité d'une cellule ainsi que la fluorescence de protéines cellulaires (protéines fluorescentes comme la GFP ou marquées avec un anticorps couplé à un fluorochrome) ou de l'ADN (ex intercalant fluorescent de l'ADN).  [...] cette technique est réalisée sur un cytomètre qui n'est pas du tout un microscope. dans cet appareil, les cellules sont aspirées et passent une par une, elles vont être excitées avec des faisceaux lasers pour détecter les différents paramètres.  [...]

[Biochimie] Epigénome et immunoprécipitation

Je cherche à comprendre comment analyser l'épigénome, notamment à partir de la méthode d'immunoprécipitation. Le problème est que je ne connais rien de cette technique.  [...] Ha oui en effet. en fait les anticorps interviennent dans cette technique pour récupérer le DNA sur lequel sont fixées les protéines. On ligue des anticorps spécifiques de ces protéines (ici spécifique des histones modifiées sur leur queue aminoterminale) les anticorps sont eux même liés à des molécules de Sépharose, ce qui permet de récupérer le tout par centrifugation/précipitation.  [...]

Purification des organites cellulaires

Faut-il parler de la détection des organites grâce aux anticorps ( biotine - streptovidine ), d'électrophorèse et de chromatographie, les tris par bille électromagnétique Par ceux qu'il me semble que c'est technique ont plus pour objectif de purifier les protéines.  [...] Peux-on utiliser la technique des anticorps marqué pour détecter plus spécifiquement un organite et donc obtenir une fraction plus purifié suite à une centrifugation.  [...]

différence entre western blot et immunoblot

Un western blot est un cas particulier d'immunoblot. Un immunoblot est une technique avec laquelle tu détectes des molécules immobilisées sur une membrane avec des anticorps. Un western blot est un immunoblot dans lequel tu détectes des protéines séparées par électrophorèse.  [...] Dans le cas où tu extrais les noyaux, il n'y a plus de tubuline, on passe donc à l'actine. Elle est également (de temps en temps) utilisé lorsque l'on détecte des protéines nucléaires uniquement.  [...]

[Biologie Moléculaire] structure des protéines

Ici l'anticorps anti-proinsuline va réagir avec les protéines de proinsuline. On va donc par la suite pouvoir examiner la quantité ou les caractéristiques physiques de la protéine. On élimine ensuite les protéines qui ne sont pas liées à l'anticorps anti-proinsuline pour ne garder que les protéines de proinsuline.  [...] Par contres elles ont été immunoprécipitées par des anticorps anti-proinsuline, donc ces protéines possèdent le même épitope que la proinsuline, elles en sont donc très proches. Ce seraient donc des protéines de pré-proinsuline, ce qui collerait car leur PM est plus élevé.  [...]

[Biologie Cellulaire] Création d'anticorps polyclonaux et monoclonaux

C'est une des variantes de chromatographie. High Performance Liquid Chromatography, et ces techniques permettent de séparer les différents composant d'un mélange en fonction de leur affinité pour une phase solide (une plaque) sous l'effet d'une phase mobile (mélange de différents solvants).  [...] Tu peux te renseigner sur la technique (il y a des sites qui l'expliquent bien mieux que moi), mais la finalité sera la séparation des composants d'un mélange, donc ici, de séparer nos anticorps spécifiques de toutes les autres protéines contenues dans le lysat cellulaire.  [...]

[Physiologie] le prion

Tous les bébés humains reçoivent une certaine protection avant la naissance. Durant la gestation, la mère transmet des anticorps à son fStus à travers le placenta. Ces protéines circulent dans le sang du nourrisson durant quelques semaines à quelques mois après la naissance, neutralisant les microbes ou les marquant pour la destruction par des phagocytes, des cellules immunitaires qui consomment et détruisent les bactéries, les virus et les débris cellulaires.  [...] Cependant, les bébés allaités gagnent une protection supplémentaire provenant des anticorps, autres protéines et cellules immunitaires du lait humain.  [...]

[Biochimie] Normalisation de la quantité de protéine Western Blot chez E.COLI

je voudrai connaitre quelles sont les protéines chez E.coli qu'on utilise pour pouvoir normaliser une protéine d'intérêt (comme l'actine chez les eucaryotes).  [...] et Quel est l'anticorps (dirigé contre la protéine qui sert à normaliser) le plus efficaces pour ce genre de technique.  [...]

[Biochimie] Cherche matériel scientifique intéressant pr exposé!

Je pourrais te proposer autrement le biacore (résonance plasmonique de surface), pas mal pour étudier l'interaction entre deux protéines et les techniques d'immunologie (coimmunoprécipitation, western blot etc.), très très utilisées dans les labos (malgré le prix des anticorps ).  [...] -Le moins complexe. les techniques d'immunoprécipitation et coimmunoprécipitation. Beaucoup d'autres techniques d'immunologie comme le test ELISA ou l'immunofluorescence sont extrêmement simples à comprendre (c'est toujours le même principe de fixation d'un Anticorps spécifique sur une protéine).  [...]